鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料对家兔下颌骨缺损愈合的促进作用及其机制 被引量：13

1

作者 朱文赫 钟秀宏 +5 位作者 张巍 徐俊杰 李妍 沈楠 张红 吕士杰 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期527-531,I0001,I0002,共7页

目的:制备鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料,探讨其对家兔下颌骨缺损愈合的促进作用及其可能机制。方法:将胶原溶液和壳聚糖溶液充分混匀,采用戊二醛交联法制备复合材料,扫描电子显微镜(SEM)下观察复合材料的微观结构。选择36只家兔建... 目的:制备鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料,探讨其对家兔下颌骨缺损愈合的促进作用及其可能机制。方法:将胶原溶液和壳聚糖溶液充分混匀,采用戊二醛交联法制备复合材料,扫描电子显微镜(SEM)下观察复合材料的微观结构。选择36只家兔建立兔下颌骨单侧缺损模型,分为实验组和对照组,每组又设4、8和12周亚组,每亚组各6只家兔。实验组家兔植入鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料,对照组家兔不植入任何材料。分别于术后4、8和12周采用CT观察家兔造模部位的组织学及周围神经重建情况,免疫组织化学法检测家兔骨组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达量,SEM下观察骨缺损处的超微结构。结果:复合材料呈现规则的层状皱褶结构,支架内部孔径变大且以片状结构为主,是生物材料理想的结构。术后4周,实验组家兔有新骨生成,新生骨样组织致密材料大部分降解,VEGF呈高表达;术后8周,实验组家兔中的骨缺损部位骨小梁明显增多,VEGF表达呈下降趋势;术后12周,实验组家兔新骨形成且密度基本与正常组织一致,VEGF表达恢复正常。术后各时间点实验组家兔骨缺损愈合程度和成骨速度明显优于对照组。结论:鹿茸多肽-胶原蛋白/壳聚糖复合材料对家兔下颌骨缺损愈合具有明显的促进作用,其机制可能与促进VEGF表达有关。 展开更多

关键词 鹿茸多肽 下颌骨缺损 血管内皮生长因子 骨组织工程

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高强度微波辐射对Wistar大鼠血清SOD、HSP70和肝脏MDA、Mit肿胀的影响 被引量：15

2

作者 田志杰 沈南 +4 位作者 吕士杰 王程 姜艳霞 李妍 罗军 《四川动物》 CSCD 北大核心 2009年第4期528-531,共4页

研究200mW/cm2连续10min的高强度微波辐射条件下对Wistar大鼠氧化应激和肝脏的影响,与空白组相比较,高强度微波辐射对血清中SOD含量的影响十分显著(P<0.05),呈现出距离辐射时间越短,SOD含量越低的现象(P<0.01);同样,高强度微波辐... 研究200mW/cm2连续10min的高强度微波辐射条件下对Wistar大鼠氧化应激和肝脏的影响,与空白组相比较,高强度微波辐射对血清中SOD含量的影响十分显著(P<0.05),呈现出距离辐射时间越短,SOD含量越低的现象(P<0.01);同样,高强度微波辐射显示出在辐射初期对血清MDA和HSP70含量的明显提高(P<0.01);线粒体损伤明显(P<0.05),且无明显改善(P>0.05)。表明高强度微波辐射(200mW/cm2)能导致雌性Wistar大鼠氧化应激加强和肝脏损伤。 展开更多

关键词 高强度微波辐射 SOD MDA HSP Mit肿胀

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鹿茸多肽对过氧化氢所致血管内皮细胞损伤的保护作用 被引量：16

3

作者 朱文赫 张巍 +2 位作者 李妍 徐俊杰 吕士杰 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期697-701,共5页

目的观察鹿茸多肽对H2O2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及其作用机制。方法体外培养人静脉血管内皮细胞EVC-304加入鹿茸多肽20,40和80 mg·L-1,培养24 h后再加入H2O2100μmol·L-1作用12 h。MTT法检测细胞存活率,Hoechst333... 目的观察鹿茸多肽对H2O2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及其作用机制。方法体外培养人静脉血管内皮细胞EVC-304加入鹿茸多肽20,40和80 mg·L-1,培养24 h后再加入H2O2100μmol·L-1作用12 h。MTT法检测细胞存活率,Hoechst333258染色法观察EVC-304细胞形态,用试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,Western蛋白质印迹法检测细胞内胱天蛋白酶3和热激蛋白70(HSP70)的表达。结果同正常组相比,H2O2使细胞存活率明显降低(P<0.01),细胞染色质固缩,细胞核致密浓染,且胞核变小浓集,SOD活性降低,MDA含量升高(P<0.01),胱天蛋白酶3和HSP70表达升高(P<0.01)。与H2O2组相比,鹿茸多肽20,40和80 mg·L-1组细胞存活率明显增加(P<0.01),凋亡率由(25.3±1.0)%下降至(15.2±1.2)%,(10.3±0.9)%和(7.9±1.4)%(P<0.01),SOD活性升至19.2±0.5,22.3±1.7和(24.9±0.6)kU·g-1蛋白(P<0.01),MDA含量降至1.51±0.2,1.48±0.3和(1.02±0.1)μmol·g-1蛋白(P<0.01),细胞内胱天蛋白酶3和HSP70表达显著下降(P<0.01)。结论鹿茸多肽对H2O2诱导的血管内皮细胞损伤具有明显的保护作用,其机制可能与改善细胞内的氧化应激水平有关。 展开更多

关键词 鹿茸多肽 过氧化氢 内皮细胞 细胞凋亡

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微波辐射对大鼠能量代谢及心肌细胞凋亡的影响 被引量：16

4

作者 朱文赫 沈楠 +2 位作者 徐俊杰 钟秀宏 吕士杰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期647-651,共5页

目的:探讨不同强度微波辐射对大鼠心脏的损伤作用,并初步探讨其作用机制。方法:分别以强度为500、1 000、1 500和2 000 W/m2,频率为2 450 MHz微波照射大鼠6 min,照射后6 h取大鼠心脏,检测心肌细胞中ATP含量、线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活... 目的:探讨不同强度微波辐射对大鼠心脏的损伤作用,并初步探讨其作用机制。方法:分别以强度为500、1 000、1 500和2 000 W/m2,频率为2 450 MHz微波照射大鼠6 min,照射后6 h取大鼠心脏,检测心肌细胞中ATP含量、线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活性,透射电镜观察心脏组织超微结构的改变,Muse细胞分析仪检测心肌细胞凋亡,Western blotting检测心肌细胞内cleaved caspase-3蛋白的表达。结果:随着微波辐射强度的增加,大鼠心肌细胞中ATP含量、线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活性呈现降低趋势,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。透射电镜结果显示,微波辐射致细胞线粒体数量减少且形态异常,大部分线粒体溶解空化,基质明显肿胀。心肌细胞凋亡检测结果显示,微波辐射能够诱导大鼠心肌细胞发生凋亡,且随着微波辐射强度的增加,细胞凋亡率呈上升趋势(P<0.05)。Western blotting结果显示,微波辐射后心肌细胞内cleaved caspase-3蛋白表达水平随着辐射强度的增加呈上升趋势(P<0.05)。结论:微波辐射对大鼠心脏具有明显的损伤作用,能够引起心脏能量代谢出现异常,诱发心肌细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 微波辐射 能量代谢 细胞凋亡 线粒体

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羊蹄根提取物对血小板减少症模型小鼠造血系统的作用 被引量：12

5

作者 马健康 姜艳霞 +3 位作者 马洪波 王新成 陈忠航 雷钧涛 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期82-86,共5页

目的:研究羊蹄根丙酮、乙醚提取物对小鼠血小板减少症的治疗作用。方法:80只BACB/C小鼠随机分为5组(每组16只):阴性对照组(色拉油)、羊蹄根丙酮提取物中剂量(0.5 g生药.kg-1)、高剂量(5.0 g生药.kg-1)组和乙醚提取物中剂量(0.5 g生药.kg... 目的:研究羊蹄根丙酮、乙醚提取物对小鼠血小板减少症的治疗作用。方法:80只BACB/C小鼠随机分为5组(每组16只):阴性对照组(色拉油)、羊蹄根丙酮提取物中剂量(0.5 g生药.kg-1)、高剂量(5.0 g生药.kg-1)组和乙醚提取物中剂量(0.5 g生药.kg-1)、高剂量(5.0 g生药.kg-1)组。小鼠连续3 d皮下注射环磷酰胺(0.3mL/20g),建立血小板减少症模型;将造模成功小鼠分别给予色拉油,中、高剂量羊蹄根丙酮提取物及中、高剂量羊蹄根乙醚提取物灌胃,20 d后处死动物采血检测血小板数、红细胞数、白细胞数。结果:①与造模前比较,造模后第14天各组小鼠血小板数量降至最低(P<0.01);②造模后第20天(实验结束时)各组小鼠血小板数量高于第14天(P<0.01),且小鼠血小板数羊蹄根丙酮、乙醚提取物各实验组高于阴性对照组(P<0.01);③羊蹄根丙酮、乙醚提取物各实验组小鼠红细胞、白细胞的数量与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:中、高剂量羊蹄根丙酮、乙醚提取物对小鼠血小板减少症有明显治疗作用。 展开更多

关键词 羊蹄根 血小板减少 疾病模型 动物

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高功率微波辐射对大鼠的肝损伤作用及对细胞因子的影响 被引量：7

6

作者 王月华 蒋林哲 +3 位作者 李强 孙艳美 吕士杰 钟秀宏 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期672-675,共4页

目的探讨高功率微波辐射对大鼠肝细胞形态结构及血清细胞因子的影响。方法以100mW/cm2功率对成年雄性Wistar大鼠进行微波辐射,并设立正常对照组。分别于辐射后1、7和14d进行心脏采血,取血清检测天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)... 目的探讨高功率微波辐射对大鼠肝细胞形态结构及血清细胞因子的影响。方法以100mW/cm2功率对成年雄性Wistar大鼠进行微波辐射,并设立正常对照组。分别于辐射后1、7和14d进行心脏采血,取血清检测天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、白介素(IL)-6、IL-10和IL-18水平;采血后处死大鼠,冰浴下取肝右叶组织,采用光镜观察肝组织结构的改变。结果形态学观察发现辐射后1、7d大鼠肝小叶内有散在、片状肝细胞变性、坏死及炎性细胞浸润,辐射后14d时病变减轻,但仍有部分肝细胞有变性及点状坏死。大鼠血清AST和ALT水平于辐射后1、7d与对照组比较均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);14d时ALT和AST与对照组比较差异无统计学意义。细胞因子IL-6和IL-18水平于辐射后1、7d明显高于对照组(P<0.01),14d时有所恢复;IL-10水平与对照组比较呈下降趋势,辐射后1d时与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论高功率微波辐射对肝脏结构和功能具有损伤效应,其机制可能与细胞因子IL-6、IL-10和IL-18的变化有关。 展开更多

关键词 高功率微波 辐射损伤 肝损伤 白介素6 白介素10 白介素18

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山楂黄酮对微波辐射所致Wistar大鼠脑损伤的治疗作用 被引量：7

7

作者 罗军 伍胶 +4 位作者 毛青花 曹发正 胡艳颖 徐俊晨 王齐 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期291-293,429,共3页

目的:探讨山楂黄酮对微波辐射所致Wistar大鼠脑损伤的治疗作用,阐明山楂黄酮对微波产生的非热效应和热效应的治疗效果。方法:36只Wistar大鼠随机分为正常对照组、辐射模型组和辐射给药组。辐射模型组和辐射给药组大鼠给予200mW.cm-2的... 目的:探讨山楂黄酮对微波辐射所致Wistar大鼠脑损伤的治疗作用,阐明山楂黄酮对微波产生的非热效应和热效应的治疗效果。方法:36只Wistar大鼠随机分为正常对照组、辐射模型组和辐射给药组。辐射模型组和辐射给药组大鼠给予200mW.cm-2的微波辐照5min,辐射给药组大鼠于辐射后给予40mg.kg-1的山楂黄酮,每日1次,连续14d。在开始给药后的10、11、12、13和14d采用Morris水迷宫检测大鼠学习与记忆能力的变化,停药后隔日处死大鼠取大脑,采用光学显微镜观察脑组织结构的变化。结果:与对照组比较,200mW.cm-2微波辐照后辐射模型组和辐射给药组大鼠Morris水迷宫目标象限时间、平台停留时间、经过平台次数和经过有效区次数均明显下降(P<0.05);与辐射模型组比较,辐射给药组大鼠上述数据均升高(P<0.05)。200mW.cm-2微波辐照后大鼠海马与小脑神经元胞核固缩、深染,辐射给药组大鼠海马神经元损伤有所减轻,呈恢复状态,小脑神经元和血管无明显变化。结论:200mW.cm-2微波辐照后可损伤大鼠学习记忆能力和脑组织结构,山楂黄酮对微波辐射所致损伤有一定的治疗作用。 展开更多

关键词 山楂黄酮 微波辐射 脑损伤

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青蒿琥酯通过增加活性氧簇生成诱导人肝癌HepG2细胞凋亡 被引量：5

8

作者 朱文赫 张巍 +3 位作者 李妍 徐俊杰 张红 吕士杰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期64-69,共6页

目的:探讨青蒿琥酯诱导人肝癌Hep G2细胞凋亡的机制及活性氧簇(ROS)在青蒿琥酯诱导Hep G2细胞凋亡中的作用。方法:采用MTT法观查青蒿琥酯对人肝癌Hep G2细胞存活的影响,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡形态的变化,流式细胞术检测He... 目的:探讨青蒿琥酯诱导人肝癌Hep G2细胞凋亡的机制及活性氧簇(ROS)在青蒿琥酯诱导Hep G2细胞凋亡中的作用。方法:采用MTT法观查青蒿琥酯对人肝癌Hep G2细胞存活的影响,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡形态的变化,流式细胞术检测Hep G2细胞的凋亡率,DCFH-DA检测细胞凋亡过程中ROS的变化。Western blot检测细胞内凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3和细胞色素C(Cyt C)蛋白水平的变化。采用NADPH氧化酶抑制剂夹竹桃麻素(apocynin)预处理Hep G2细胞,Western blot检测NADPH氧化酶亚基p47^(phox)和p22^(phox)蛋白表达水平,流式细胞术检测ROS变化。结果:与对照组相比,青蒿琥酯作用于Hep G2细胞24 h后,细胞存活率明显减少(P<0.05);细胞核呈致密浓染色,细胞凋亡比例升高(P<0.05);ROS明显升高(P<0.05);Western blot结果显示,青蒿琥酯作用后细胞内Bcl-2蛋白表达下调,Bax蛋白表达上调,Bax/Bcl-2蛋白表达比例升高,cleaved caspase-3和Cyt C蛋白水平升高。Apocynin预处理能降低青蒿琥酯给药组细胞内p47^(phox)和p22^(phox)蛋白表达及ROS的生成。结论:青蒿琥酯能诱导Hep G2细胞凋亡,其凋亡过程可能与ROS的生成增加相关。 展开更多

关键词 青蒿琥酯 肝细胞癌 细胞凋亡 活性氧簇

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胡桃醌对宫颈癌SiHa细胞增殖及细胞周期的影响 被引量：6

9

作者 张巍 吴亚猛 +4 位作者 陈思瑶 张琳娜 韩景春 那文婷 金瑛 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期697-700,共4页

目的:探讨胡桃醌对人宫颈癌SiHa细胞增殖及细胞周期的影响,阐明胡桃醌在宫颈癌治疗中的作用。方法:选取处于对数生长期的SiHa细胞,随机分为对照组和10、20、40、60、80和100μmol·L-1胡桃醌处理组。倒置显微镜下观察细胞的形态学变... 目的:探讨胡桃醌对人宫颈癌SiHa细胞增殖及细胞周期的影响,阐明胡桃醌在宫颈癌治疗中的作用。方法:选取处于对数生长期的SiHa细胞,随机分为对照组和10、20、40、60、80和100μmol·L-1胡桃醌处理组。倒置显微镜下观察细胞的形态学变化,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性和细胞生长抑制率,流式细胞术检测SiHa细胞的细胞周期。结果:与对照组比较,胡桃醌处理组SiHa细胞体积缩小,连接消失,与周围细胞脱离。与对照组比较,胡桃醌处理组细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞生长抑制率升高(P<0.05),且呈剂量依赖性,半数抑制浓度(IC50)为20.7μmol·L-1;流式细胞术检测,与对照组比较,10和100μmol·L-1胡桃醌处理组SiHa细胞的亚二倍体峰(SubG1)比率增加,G0/G1和S期细胞比率降低,G2/M期细胞比率先升高后降低。结论:胡桃醌对SiHa细胞增殖具有抑制作用,并可使细胞周期SubG1比率增加。 展开更多

关键词 胡桃醌 宫颈肿瘤 SIHA细胞 细胞周期

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不同浓度胡桃醌对HeLa细胞增殖及凋亡的影响 被引量：5

10

作者 张巍 赵行宇 +3 位作者 李妍 徐俊杰 姜艳霞 吕士杰 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期99-102,共4页

目的观察不同浓度胡桃醌对宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响,探讨胡桃醌的抗肿瘤作用。方法常规体外培养人宫颈癌HeLa细胞24h,加入10、20、50、100、200μmol/L浓度的胡桃醌再培养24h。通过倒置显微镜观察细胞形态学变化,采用MTT法检测... 目的观察不同浓度胡桃醌对宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响,探讨胡桃醌的抗肿瘤作用。方法常规体外培养人宫颈癌HeLa细胞24h,加入10、20、50、100、200μmol/L浓度的胡桃醌再培养24h。通过倒置显微镜观察细胞形态学变化,采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况,分光光度计检测细胞Caspase-3蛋白活性。结果细胞形态学观察显示,不同浓度胡桃醌均可导致细胞形态学发生改变;MTT实验表明,胡桃醌对HeLa细胞的生长有明显抑制作用,且抑制作用随药物浓度的增加而增强(P<0.05或P<0.01);流式细胞仪检测结果表明,加入胡桃醌培养24h后HeLa细胞出现G2/M期阻滞,10、20、50、100、200μmol/L胡桃醌处理后,HeLa细胞G2/M期的比例分别增加至12.92%、16.23%、23.64%、34.22%、52.64%。Caspase-3活性检测结果显示,不同浓度胡桃醌均可使Caspase-3蛋白活性增加,且具有剂量依赖性。结论胡桃醌可抑制HeLa细胞的增殖,且具有剂量依赖性,有望用于抗肿瘤治疗。 展开更多

关键词 胡桃醌 HELA细胞 细胞凋亡 细胞周期

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芩丹颗粒对微波辐射小鼠心脏损伤的防护作用 被引量：4

11

作者 朱文赫 钟秀宏 +2 位作者 徐俊杰 张红 吕士杰 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期559-564,共6页

目的探讨芩丹颗粒对微波辐射小鼠心脏损伤的防护作用。方法 60只小鼠随机分为正常对照组、100 m W·cm-2辐射损伤组、辐射损伤+芩丹颗粒2.5,5.0和10.0 g·kg-1防护组。芩丹颗粒防护组小鼠于辐射前7 d每天ig给药1次。辐射后6 h,... 目的探讨芩丹颗粒对微波辐射小鼠心脏损伤的防护作用。方法 60只小鼠随机分为正常对照组、100 m W·cm-2辐射损伤组、辐射损伤+芩丹颗粒2.5,5.0和10.0 g·kg-1防护组。芩丹颗粒防护组小鼠于辐射前7 d每天ig给药1次。辐射后6 h,取静脉血,用生化法检测血清谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性。取心肌组织,用比色法检测三磷酸腺苷(ATP)含量、线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活性,用光镜和电镜观察心肌组织结构的变化,用Western蛋白印迹法检测细胞色素c(Cyt c)和激活型胱天蛋白酶3表达的变化。结果与正常对照组比较,微波辐射组小鼠心肌细胞水肿、线粒体数量减少且形态异常,血清中GOT,CK和LDH活性升高(P<0.01),线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活性显著下降(P<0.01),心肌细胞Cyt c和激活型胱天蛋白酶3蛋白表达显著升高(P<0.01)。与辐射损伤组比较,芩丹颗粒5.0和10.0 g·kg-1防护组小鼠心肌细胞体积正常,细胞核和细胞器形态完好,心肌细胞结构损伤程度显著缓解;心肌组织ATP含量、线粒体呼吸链复合体Ⅳ和Ⅴ活性均显著升高(P<0.01);心肌细胞Cyt c和激活型胱天蛋白酶3蛋白表达均显著下降(P<0.01)。结论芩丹颗粒对微波辐射致小鼠心肌细胞损伤具有一定的防护作用,其机制可能与其改善微波所致心肌细胞能量代谢有关。 展开更多

关键词 微波辐射 芩丹颗粒 ATP 线粒体呼吸链

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玉米肽对微波辐射大鼠肝组织抗氧化系统损伤的治疗作用 被引量：5

12

作者 罗军 张巍 +3 位作者 李妍 姜艳霞 朱文赫 吕士杰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2014年第9期26-27,30,共3页

为了观察玉米肽对微波辐射引起动物肝组织抗氧化系统损伤和肝细胞形态变化的保护作用。将36只Wistar大鼠随机分为正常对照组、辐射模型组和辐射给药组,辐射模型组和辐射给药组大鼠给予100 mW/cm2的微波辐照6 min,辐射给药组辐射后给予60... 为了观察玉米肽对微波辐射引起动物肝组织抗氧化系统损伤和肝细胞形态变化的保护作用。将36只Wistar大鼠随机分为正常对照组、辐射模型组和辐射给药组,辐射模型组和辐射给药组大鼠给予100 mW/cm2的微波辐照6 min,辐射给药组辐射后给予600 mg/kg·d玉米肽,连续7 d。7 d后处死大鼠,光学显微镜观察肝细胞形态学变化,检测肝组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果与对照组比较,辐射模型组肝细胞体积增大,细胞核形态不规则,细胞水肿严重,细胞之间界限不明显,胞质淡染。肝组织TSOD[(242.98±27.79)U/mg]和GSH-Px活性[(718.82±169.14)U/mg]均极明显降低(P<0.01),MDA含量[(18.62±1.44)nmol/mg]明显升高(P<0.05);与辐射模型组比较,辐射给药组肝组织结构有明显恢复,肝细胞水肿明显减轻,细胞边界较清晰,肝组织TSOD活性[(373.14±15.74)nmol/mg]明显升高(P<0.01),GSH-Px活性[(943.08±274.54)U/mg]明显升高(P<0.05),MDA含量[(17.32±1.01)nmol/mg]明显降低(P<0.05)。表明玉米肽对微波辐射引起的肝细胞形态变化和肝组织抗氧化系统损伤有较好的治疗效果。 展开更多

关键词 玉米肽 微波辐射 肝组织 抗氧化

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玉米肽对微波辐照大鼠外周血象的保护作用 被引量：5

13

作者 罗军 李妍 +3 位作者 张巍 姜艳霞 芦晓晶 吕士杰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第8期29-31,共3页

为了观察玉米肽对微波辐照大鼠外周血象的影响,探讨其对动物辐射损伤的保护作用。取36只Wistar大鼠随机分为正常对照组、辐射模型组和辐射给药组,辐射模型组和辐射给药组大鼠给予100 m W/cm2的微波辐照6 min,辐射给药组辐射后给予600 mg... 为了观察玉米肽对微波辐照大鼠外周血象的影响,探讨其对动物辐射损伤的保护作用。取36只Wistar大鼠随机分为正常对照组、辐射模型组和辐射给药组,辐射模型组和辐射给药组大鼠给予100 m W/cm2的微波辐照6 min,辐射给药组辐射后给予600 mg/kg·d玉米肽,连续7 d。7 d后处死大鼠,腹主动脉抽血,抗凝管收集,进行血常规检测。结果与正常对照组比较,辐射模型组的白细胞总数(White blood cells,WBC)、嗜中性粒细胞绝对值(Neutrophile granulocyte,GRA)、淋巴细胞百分比(Lymphocytes percentage,LYM%)呈显著降低(P<0.05),辐射模型组的血红蛋白(Hemoglobin,HGB)、红细胞(Red blood cell,RBC)、红细胞压积(Hematocrit,HTC)、淋巴细胞绝对值(Lymphocytes,LYM)、血小板(Platelet,PLT)和血小板压积(Platelet hematocrit,PCT)呈极显著降低(P<0.01),辐射给药组的血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HTC)、血小板(PLT)、血小板压积(PCT)呈显著降低(P<0.05),与辐射模型组比较,辐射给药组的血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)、血小板压积(PCT)呈显著升高(P<0.05),而红细胞(RBC)、红细胞压积(HTC)、嗜中性粒细胞绝对值(GRA)呈极显著升高(P<0.01)。结论微波辐照可引起大鼠造血功能的损伤,影响机体免疫反应。玉米肽具有促进辐照大鼠外周血各类细胞的恢复,促进造血,提高免疫机能的作用。 展开更多

关键词 玉米肽 微波辐照 外周血象

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截短型人凋亡诱导因子AIF1-400对HeLa细胞的促凋亡作用 被引量：3

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作者 张巍 张勇 +5 位作者 韩涛 孟艳玲 温伟红 薛茜 任君琳 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期973-974,981,共3页

目的:观察人截短型AIF(AIF△1-400)对HeLa细胞的促凋亡作用。方法:在AIF△1-120基因克隆成功的基础上进一步改造,构建截去AIF基因线粒体定位信号、FAD结合结构域和NADH结合结构域(1～400位氨基酸)编码序列的AIF△1-400基因,将其克隆入pc... 目的:观察人截短型AIF(AIF△1-400)对HeLa细胞的促凋亡作用。方法:在AIF△1-120基因克隆成功的基础上进一步改造,构建截去AIF基因线粒体定位信号、FAD结合结构域和NADH结合结构域(1～400位氨基酸)编码序列的AIF△1-400基因,将其克隆入pcDNA3真核表达载体,用脂质体法转染HeLa细胞,通过Western blot检测该基因在转染细胞中的表达通过电镜观察截短型分子对肿瘤细胞的具有促凋亡活性。结果:经酶切鉴定与测序证实,AIF△1-400的真核表达载体构建成功。通过Western blot证实截短型基因在HeLa细胞中表达,电镜观察可见转染细胞骨架的破坏和细胞核固缩等凋亡特征。结论:人截短型AIF(AIF△1-400)基因的表达可诱导HeLa细胞凋亡。 展开更多

关键词 凋亡诱导因子 HELA细胞 细胞凋亡

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TMEM16A钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞的表达及其电生理特性研究 被引量：6

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作者 郝峰 白雪松 +6 位作者 鞠晓红 方芳 藏雨轩 朱杭飞 向国艳 张雲乔 袁忠海 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1633-1639,共7页

目的:探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞的表达及其电生理特性。方法:构建pUB6/V5-TMEM16A真核表达载体。脂质体方法转染TMEM16A至FRT细胞,同时优化脂质体和载体的量和比例,获得最佳转染效... 目的:探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞的表达及其电生理特性。方法:构建pUB6/V5-TMEM16A真核表达载体。脂质体方法转染TMEM16A至FRT细胞,同时优化脂质体和载体的量和比例,获得最佳转染效率和表达效果,杀稻瘟菌素(blasticidin)进行抗生素筛选,获取稳定表达TMEM16A的FRT细胞株。RT-PCR和免疫荧光检测TMEM16A于FRT细胞的表达情况;倒置荧光显微镜下观察TMEM16A在FRT细胞中的表达和定位;应用全细胞膜片钳技术和卤族元素敏感的荧光蛋白YFPH148Q/I152L检测TMEM16A钙激活氯离子通道的功能。结果:BamHⅠ和XbaⅠ双酶切的琼脂糖凝胶电泳和测序结果表明目的基因TMEM16A成功克隆到真核表达载体pUB6/V5中;RT-PCR和免疫荧光实验结果表明经杀稻瘟菌素筛选后的FRT细胞在mRNA和蛋白水平表达TMEM16A,倒置显微镜下观察结果表明TMEM16A在FRT细胞膜上有表达;应用全细胞膜片钳技术和卤族元素敏感的荧光蛋白YFP-H148Q/I152L证实稳定表达于FRT细胞的TMEM16A具有经典的钙激活氯离子通道特性。结论:FRT细胞可高效表达TMEM16A。TMEM16A是钙激活氯离子通道的分子基础。 展开更多

关键词 跨膜蛋白16A 钙激活氯离子通道 膜片钳术 Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞

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胡桃醌及其与顺铂联用对宫颈癌HeLa细胞存活和凋亡的影响 被引量：2

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作者 张巍 朱文赫 +5 位作者 李妍 赵行宇 罗军 徐俊杰 姜艳霞 金瑛 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期663-667,共5页

目的探讨胡桃醌及其与顺铂联合用药对宫颈癌HeLa细胞存活和凋亡的影响。方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞,加入胡桃醌10～200μmo.lL-1或者胡桃醌20μmo.lL-1+顺铂20μmo.lL-1继续培养8 h或24 h,用倒置显微镜观察细胞形态的变化,用MTT法测... 目的探讨胡桃醌及其与顺铂联合用药对宫颈癌HeLa细胞存活和凋亡的影响。方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞,加入胡桃醌10～200μmo.lL-1或者胡桃醌20μmo.lL-1+顺铂20μmo.lL-1继续培养8 h或24 h,用倒置显微镜观察细胞形态的变化,用MTT法测定细胞存活率,用流式细胞仪检测细胞周期和细胞早期凋亡率。结果胡桃醌10,20,50,100和200μmo.lL-1与HeLa细胞作用24 h,随着胡桃醌浓度的增加,光镜下HeLa细胞逐渐变小、变圆;HeLa细胞存活率明显降低,分别由对照组的(100.0±0.0)%降低至(87.2±5.6)%,(66.2±4.8)%,(54.5±4.9)%,(42.5±6.4)%和(32.0±2.2)%(P<0.05,P<0.01);HeLa细胞G2/M期百分率逐渐增加,分别由对照组的(7.5±1.2)%增加到(12.9±1.2)%,(16.2±2.8)%,(23.6±3.9)%,(34.2±4.2)%和(52.6±7.8)%(P<0.05,P<0.01)。胡桃醌联合顺铂作用24 h,光镜下脱壁细胞增加,细胞形态变圆,较胡桃醌和顺铂单用组更加明显;联合用药组细胞存活率为(35.0±6.1)%,较胡桃醌和顺铂单用组〔(78.2±12.5)%和(58.5±10.9)%〕明显降低(P<0.01)。胡桃醌联合顺铂作用8 h,HeLa细胞早期凋亡率为(24.6±5.7)%,高于胡桃醌和顺铂单用组〔(6.7±1.5)%和(0.4±2.8)%〕(P<0.01)。结论胡桃醌可抑制HeLa细胞存活,促进HeLa细胞凋亡,与顺铂联合使用具有协同作用。 展开更多

关键词 胡桃醌 顺铂 细胞凋亡 细胞周期

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微波辐射诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的可能机制 被引量：2

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作者 王程 李琴 +5 位作者 刘微 闫岗林 徐冶 于洋 刘师兵 潘文干 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期422-426,I0002,共6页

目的:观察微波辐射对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用10、30和50 mW.cm-2辐射强度的微波辐射SH-SY5Y细胞5 min,以假辐射组(0 mW.cm-2)为对照,光镜下观察细胞形态变化;荧光显微镜下观察DAPI染色细胞核的形... 目的:观察微波辐射对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用10、30和50 mW.cm-2辐射强度的微波辐射SH-SY5Y细胞5 min,以假辐射组(0 mW.cm-2)为对照,光镜下观察细胞形态变化;荧光显微镜下观察DAPI染色细胞核的形态;CTAB法提取细胞基因组DNA,电泳观察DNAladder;台盼蓝拒染法检测细胞存活率;AnnexinV-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率;MTT法检测细胞相对活性;蛋白质印迹检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果:微波辐射后SH-SY5Y细胞形态即刻改变,胞核、胞质结构欠清,细胞皱缩甚至脱壁;细胞核内的染色质出现不规则凝集,碎裂成2～5个微核;细胞DNA出现明显的梯状条带;细胞存活率随微波辐射强度增大逐渐降低,10 mW.cm-2辐射组与假辐射组比较,细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05),但30、50 mW.cm-2辐射组细胞存活率明显低于假辐射组(P<0.05);微波辐射后6 h的细胞凋亡率随辐射强度的增加逐渐升高,各辐射组细胞凋亡率均明显高于假辐射组(P<0.05);微波辐射后24和48 h,细胞相对活力随辐射强度的增加明显降低,各辐射组的细胞相对活力均明显低于假辐射组(P<0.05)。微波辐射后,细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、survivin表达水平逐渐下降,Bax、caspase-3和caspase-7表达水平逐渐升高,caspase-8和-9表达水平无明显变化。结论:微波辐射可诱导SH-SY5Y细胞凋亡,其作用机制可能与survivin、Bcl-2蛋白表达水平下调、Bax蛋白表达水平上调及caspase-3和caspase-7的作用有关,而与caspase-8和caspase-9介导的caspase-3活化这一作用无密切关系。 展开更多

关键词 微波辐射 人神经母细胞瘤 SH-SY5Y细胞 细胞凋亡

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pEGFP-N1脂质体转染方法的优化及其应用 被引量：5

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作者 李凤娥 向国艳 +4 位作者 孔繁利 郝峰 杨紫嫣 郑岩 方芳 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期612-616,I0004,共6页

目的:应用脂质体介导的转染方法将pEGFP-N1转染入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞中,并获得较佳的优化方案,阐明该优化条件在转染其他目的基因时的适用性。方法:分别选取不同配比的质粒和脂质体,将pEGFP-N1转入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮... 目的:应用脂质体介导的转染方法将pEGFP-N1转染入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞中,并获得较佳的优化方案,阐明该优化条件在转染其他目的基因时的适用性。方法:分别选取不同配比的质粒和脂质体,将pEGFP-N1转入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞。转染后36h,倒置荧光显微镜和流式细胞术检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况和转染效率;台盼蓝染色法检测细胞存活率,以此获得优化的转染条件。同时将pEGFP-Aquaporin2、pEGFP-Aquaporin4和pEGFP-Aquaporin5分别以上述条件转染,并获取相应优化的转染条件。结果:在质粒质量固定的条件下,随着脂质体质量的增加,其转染效率和细胞存活率升高;但是当质粒∶脂质体>1∶4时,转染效率和细胞存活率下降。在质粒和脂质体比例固定而质量增加时,其转染效率和细胞存活率下降;当质粒∶脂质体>3.2μg∶12.8μL时,转染效率降低。应用脂质体介导的方法转染pEGFP-N1和转染pEGFP-Aquaporin2、pEGFP-Aquaporin4和pEGFP-Aquaporin5时,在质粒与脂质体的配比为1∶4(3.2μg∶12.8μL)时,转染效率达最高。结论:在应用脂质体介导的目的基因转染时,pEGFP-N1优化的转染条件具有较为广泛的适用性,可用作后续目的基因高效转染优化条件。 展开更多

关键词 脂质体 PEGFP-N1 转染 甲状腺滤泡上皮细胞

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anoctamin 1在中国仓鼠卵巢细胞中的表达及其离子通道特性 被引量：2

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作者 郝峰 王皓 +5 位作者 许会静 方青 张丽 朱杭飞 张雲乔 鞠晓红 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1226-1231,1337,共7页

目的:探讨anoctamin 1在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中的表达情况,分析其离子通道特性,为研究钙激活氯离子通道的生理功能提供实验依据。方法:PCR方法获得anoctamin 1编码区基因,构建pcDNA3.1-anoctamin 1真核表达载体。脂质体转染anoctamin ... 目的:探讨anoctamin 1在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中的表达情况,分析其离子通道特性,为研究钙激活氯离子通道的生理功能提供实验依据。方法:PCR方法获得anoctamin 1编码区基因,构建pcDNA3.1-anoctamin 1真核表达载体。脂质体转染anoctamin 1至CHO中,抗生素筛选获取稳定表达anoctamin 1的CHO株。应用RT-PCR技术和倒置荧光显微镜检测anoctamin 1于CHO中的表达和分布情况。应用卤族元素敏感的黄色荧光蛋白双突变体YFP-H148Q/I152L检测anoctamin 1离子通道的功能。以加入calcimycin和高浓度碘离子的PBS缓冲液的为实验组,未加入calcimycin和高浓度碘离子的PBS缓冲液的为对照组。结果:限制性内切酶酶切后的琼脂糖凝胶电泳和测序,目的基因anoctamin 1克隆至真核表达载体pcDNA3.1;RT-PCR和倒置荧光显微镜观察,CHO在mRNA和蛋白水平表达anoctamin 1,且anoctamin 1蛋白主要表达于CHO膜上;荧光淬灭动力学实验,CHO表达的anoctamin 1具有转运碘离子的作用,且实验组碘离子转运速度显著高于对照组(P<0.05)。结论:anoctamin 1可高效表达于CHO膜;CHO表达的anoctamin 1具有经典钙激活氯离子通道特性。 展开更多

关键词 anoctamin 1 离子通道 卵巢细胞 中国仓鼠

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重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体的构建及其在FRT细胞中的表达和定位 被引量：3

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作者 李凤娥 郝峰 +4 位作者 藏雨轩 马睿泽 孔繁利 刘磊 李艳 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期273-277,428,共5页

目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的重组真核表达载体pEGFP-aquaporin-4,以EGFP示踪aquaporin-4在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞(FRT细胞)中的表达和定位,为进一步研究aquaporin-4提供实验依据。方法:应用RT-PCR方法获得a... 目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的重组真核表达载体pEGFP-aquaporin-4,以EGFP示踪aquaporin-4在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞(FRT细胞)中的表达和定位,为进一步研究aquaporin-4提供实验依据。方法:应用RT-PCR方法获得aquaporin-4编码区基因,克隆入真核表达载体pEGFP-N1。经酶切和测序鉴定证实为aquaporin-4后,Lipofectamine 2000脂质体转染重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体至FRT细胞中,倒置荧光显微镜下观察aquaporin-4在FRT细胞中的表达和分布,并应用Western blotting法检测aquaporin-4蛋白的表达。同时检测转入FRT细胞内钙黄绿素的相对荧光强度以判断FRT细胞水通透性的状况。结果:EcoRⅠ和KpnⅠ双酶切和测序重组载体结果证实目的基因aquaporin-4成功克隆到真核表达载体pEGFP-N1中。荧光显微镜下观察融合EGFP的aquaporin-4主要在FRT细胞膜上表达;Western blotting结果证实脂质体转染重组载体的FRT细胞表达aquaporin-4。转染重组EGFP-aquaporin-4融合蛋白真核表达载体的FRT细胞水通透性显著高于未转染的FRT细胞,其水通透性是未转染FRT细胞的1.65倍。结论:成功构建aquaporin-4真核表达载体,证实其可在FRT细胞中表达,并具有明显的膜蛋白特性和良好水通透性。 展开更多

关键词 AQUAPORIN-4 转染 FRT细胞 载体

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