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钙离子在顺铂诱导宫颈癌HeLa细胞自噬反应中的作用 被引量:5
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作者 徐路 曾林川 +4 位作者 于洋 窦茗瀚 刘师兵 李松岩 徐冶 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1045-1048,I0011,共5页
目的:采用钙释放抑制剂联合化疗药物作用于宫颈癌HeLa细胞,探讨钙离子(Ca^(2+))在肿瘤细胞自噬反应中的作用,为辅助肿瘤治疗和药物研发提供依据。方法:选择处于对数生长期的人宫颈癌HeLa细胞,随机分为对照组、顺铂组、2-APB组和顺铂联合... 目的:采用钙释放抑制剂联合化疗药物作用于宫颈癌HeLa细胞,探讨钙离子(Ca^(2+))在肿瘤细胞自噬反应中的作用,为辅助肿瘤治疗和药物研发提供依据。方法:选择处于对数生长期的人宫颈癌HeLa细胞,随机分为对照组、顺铂组、2-APB组和顺铂联合2-APB组(联合组)。MTT法检测HeLa细胞生存率,钙离子荧光探针法检测HeLa细胞胞浆和线粒体中游离Ca^(2+)水平,共聚焦显微镜检测HeLa细胞中自噬相关蛋白LC3和P62的共定位情况。结果:MTT法检测,与对照组比较,顺铂组和联合组HeLa细胞生存率明显降低(P<0.05);与顺铂组比较,联合组HeLa细胞生存率明显升高(P<0.05)。钙离子荧光探针法检测,与顺铂组比较,联合组细胞株胞浆和线粒体中游离Ca^(2+)水平及LC3和P62蛋白共定位荧光强度明显降低。结论:化疗药物可诱导肿瘤细胞发生自噬,联合钙释放抑制剂给药可以降低肿瘤细胞自噬水平,提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。 展开更多
关键词 顺铂 钙离子 自噬 宫颈肿瘤
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杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的凋亡诱导作用 被引量:6
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作者 于洋 刘亚萌 +6 位作者 吴少花 谢奇 衣丹 徐海月 胡耀狄 陈君 徐冶 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期902-906,I0001,I0002,共7页
目的:观察杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制及凋亡诱导作用,并探讨其可能机制。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,按杨梅素给药浓度将细胞分为对照组和低、中、高浓度杨梅素组,杨梅素给药浓度分别为0、20、40和60mg·L-1。MTT法... 目的:观察杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制及凋亡诱导作用,并探讨其可能机制。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,按杨梅素给药浓度将细胞分为对照组和低、中、高浓度杨梅素组,杨梅素给药浓度分别为0、20、40和60mg·L-1。MTT法检测各组SKOV3细胞存活率;激光共聚焦显微镜观察各组SKOV3细胞核形态变化并计算异常细胞核比率;免疫荧光法检测各组SKOV3细胞中凋亡相关蛋白-活化半胱氨酸蛋白酶3(active Caspase-3)的表达;Western blotting法检测各组SKOV3细胞中DNA损伤相关蛋白γ-H2AX的表达水平。结果:与对照组比较,低、中和高浓度杨梅素组SKOV3细胞存活率明显下降(t=-12.35,t=-11.42,t=-10.21,P<0.05);激光共聚焦显微镜下各浓度杨梅素组细胞出现核皱缩等凋亡形态学改变,且细胞中异常细胞核比率高于对照组(t=6.87,t=9.35,t=7.22,P<0.05),高浓度杨梅素组异常细胞核比率高于低、中浓度杨梅素组(t=9.55,t=7.25,P<0.05);随着杨梅素给药浓度的增加,SKOV3细胞中active Caspase-3的表达水平有升高趋势,各浓度杨梅素组SKOV3细胞中γ-H2AX的表达水平高于对照组(t=5.41,t=3.21,t=6.58,P<0.05)。结论:杨梅素可抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖并诱导其凋亡,DNA双链断裂可能是其促凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 杨梅素 卵巢肿瘤 SKOV3细胞 细胞凋亡 DNA双链断裂
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线粒体相关内质网膜在顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡中的作用 被引量:5
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作者 徐路 于洋 +2 位作者 刘师兵 李松岩 徐冶 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期539-543,共5页
目的:探讨卵巢癌细胞SKOV3在顺铂的作用下,对线粒体相关内质网膜(MAMs)的影响。方法:用6 mg/L顺铂处理SKOV3细胞0、12和24 h;通过间接免疫荧光法检测顺铂对active caspase-3的蛋白表达水平以及B细胞受体相关蛋白31(BAP31)和电压依赖性... 目的:探讨卵巢癌细胞SKOV3在顺铂的作用下,对线粒体相关内质网膜(MAMs)的影响。方法:用6 mg/L顺铂处理SKOV3细胞0、12和24 h;通过间接免疫荧光法检测顺铂对active caspase-3的蛋白表达水平以及B细胞受体相关蛋白31(BAP31)和电压依赖性阴离子通道蛋白1(VDAC1)的共定位的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率的变化;并通过透射电镜观察线粒体相关内质网膜的变化。结果:激光共聚焦结果显示,顺铂诱导卵巢癌SKOV3细胞中active caspase-3蛋白水平升高,同时也增加了BAP31和VDAC1的共定位;流式细胞术结果表明,顺铂可明显诱导细胞凋亡;透射电镜结果表明顺铂增加了线粒体和内质网之间的关联(P<0.05)。结论:顺铂诱导了SKOV3细胞凋亡,并伴有线粒体和内质网之间关联的增加,推测线粒体相关内质网膜可能参与了顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡的过程。 展开更多
关键词 线粒体相关内质网膜 顺铂 卵巢癌 细胞凋亡
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水通道蛋白4小分子抑制剂的筛选和验证
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作者 王楠 郭健 +5 位作者 闫冰 刘晴 张磊 许会静 李淼 孙美艳 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期511-518,共8页
目的:采用高通量筛选方法筛选出抑制视神经脊髓炎(NMO)-IgG与水通道蛋白4(AQP4)结合的小分子。方法:将FRT-AQP4细胞分为阴性对照组(不加小分子化合物)和筛选组,采用化学发光法检测辣根过氧化物酶(HRP)活性。将V79-AQP4细胞分为抑制剂组(... 目的:采用高通量筛选方法筛选出抑制视神经脊髓炎(NMO)-IgG与水通道蛋白4(AQP4)结合的小分子。方法:将FRT-AQP4细胞分为阴性对照组(不加小分子化合物)和筛选组,采用化学发光法检测辣根过氧化物酶(HRP)活性。将V79-AQP4细胞分为抑制剂组(neosutchuenenine)和二甲基亚砜(DMSO)组,采用免疫荧光法检测各组细胞荧光强度,荧光猝灭法检测各组细胞的水通透性,CellTiter-Glo~?发光法检测补体依赖的细胞毒性,水溶性四氮唑1(WST-1)法检测细胞活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞凋亡情况。结果:与阴性对照组比较,筛选组HRP活性明显升高(P<0.01)。与DMSO组比较,抑制剂组红色荧光强度明显降低,而绿色荧光无明显变化;与DMSO组比较,抑制剂组水通透性无明显变化(P>0.05),补体依赖的细胞毒性明显降低(P<0.01),细胞活性和细胞凋亡无明显变化(P>0.05)。结论:成功建立高通量筛选AQP4小分子抑制剂的方法,并筛选出具有阻断作用的小分子抑制剂neosutchuenenine。 展开更多
关键词 水通道蛋白 视神经脊髓炎 小分子抑制剂 高通量筛选
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