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黄芪多糖对鸡免疫禽传染性支气管炎弱毒疫苗免疫效果的影响 被引量:2
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作者 乔海英 杨柳 +4 位作者 高湛翱 胡念之 王伟霞 李信涛 张鹏举 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第3期36-40,共5页
试验探究黄芪多糖(APS)对禽传染性支气管炎弱毒疫苗的免疫调节作用,以期发掘黄芪多糖用作疫苗佐剂的应用潜力。将120只14日龄蛋鸡随机分为3组,每组4个重复,每个重复10只蛋鸡,分别设置为APS+H120联合免疫组、H120疫苗组以及PBS阴性对照... 试验探究黄芪多糖(APS)对禽传染性支气管炎弱毒疫苗的免疫调节作用,以期发掘黄芪多糖用作疫苗佐剂的应用潜力。将120只14日龄蛋鸡随机分为3组,每组4个重复,每个重复10只蛋鸡,分别设置为APS+H120联合免疫组、H120疫苗组以及PBS阴性对照组。各组蛋鸡共进行3次免疫,每次间隔2周,每次鼻腔接种100μL/只。最后一次免疫14 d后经鼻腔攻毒禽传染性支气管炎病毒M41株,观察鸡的临床症状,检测肺脏和肝脏载毒量。结果显示,与H120疫苗组相比,APS+H120疫苗联合免疫能够诱导14日龄蛋鸡产生传染性支气管炎病毒(IBV)特异性免疫球蛋白G(IgG)和分泌型免疫球蛋白A(sIgA),有效保护蛋鸡抵抗同种异源毒株的攻击,蛋鸡存活率为100%。攻毒后APS+H120组蛋鸡未出现禽传染性支气管炎典型临床症状,蛋鸡生产性能未受到影响。研究表明,APS对禽传染性支气管炎H120弱毒疫苗的免疫效果具有促进作用。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎 H120弱毒疫苗 黄芪多糖 蛋鸡 免疫 生长性能
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鸡IBD病毒免疫原性VP2蛋白全悬浮培养工艺的研究
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作者 杜鑫 王博 +6 位作者 段小硕 孙佰强 赵博 付志鹏 宋莹 沈玥 杨柳 《吉林畜牧兽医》 2024年第8期7-9,共3页
为获取高稳定性、高均一性、高效价的鸡IBD病毒免疫原性VP2蛋白亚单位苗,本研究通过对不同的温度、病毒接毒量、细胞密度、收获时间、pH、溶氧(DO)、转数等培养条件,对鸡IBD病毒免疫原性VP2蛋白在SF9全悬浮细胞上培养工艺进行了优化,筛... 为获取高稳定性、高均一性、高效价的鸡IBD病毒免疫原性VP2蛋白亚单位苗,本研究通过对不同的温度、病毒接毒量、细胞密度、收获时间、pH、溶氧(DO)、转数等培养条件,对鸡IBD病毒免疫原性VP2蛋白在SF9全悬浮细胞上培养工艺进行了优化,筛选出了最佳的全悬浮培养工艺,用该工艺制备免疫原性VP2蛋白,灭活后配制成疫苗,并进行安全性、效力等检验。结果表明,抗体效价高于国家标准,免疫SPF鸡后安全性合格,均未出现不良反应,此培养工艺为SF9全悬浮细胞规模化和工业化生产鸡IBD病毒免疫原性VP2蛋白提供依据和理论基础,新型鸡IBD病毒免疫原性VP2蛋白亚单位苗研究,对鸡IBD的防控具有重要意义。 展开更多
关键词 免疫原性VP2蛋白 IBD 培养工艺 抗体效价
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MDCK悬浮细胞制备及流感病毒敏感性研究 被引量:5
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作者 李自良 王家敏 +7 位作者 赵彩红 王美皓 李莉 张雪梅 李倬 靳冬武 马忠仁 乔自林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期981-988,共8页
目的建立无血清悬浮培养MDCK细胞的方法,分析其传代、线性放大过程中的稳定性及增殖流感病毒的敏感性。方法运用逐步降血清悬浮驯化法将贴壁培养型MDCK细胞驯化为无血清全悬浮培养型MDCK细胞;进一步分析其生长动力学特性、连续传代稳定... 目的建立无血清悬浮培养MDCK细胞的方法,分析其传代、线性放大过程中的稳定性及增殖流感病毒的敏感性。方法运用逐步降血清悬浮驯化法将贴壁培养型MDCK细胞驯化为无血清全悬浮培养型MDCK细胞;进一步分析其生长动力学特性、连续传代稳定性,在5L生物反应器中扩大培养;接种流感和禽流感病毒,测定不同时间HA效价、CCID50滴度,分析其病毒敏感性。结果成功将ATCC引进的贴壁培养型MDCK细胞驯化为无血清全悬浮培养型MDCK细胞(命名为MDCK-XF02细胞)并冻存;不同接种密度培养MDCK-XF02细胞最大增殖密度均达13.0×10^6 cells/mL以上,且差异无统计学意义(P>0.05);连续传代培养过程中细胞形态和生长状况稳定,比生长速率差异无统计学意义(P>0.05);三个代次的MDCK-XF02细胞以2.0×10^6 cells/mL接种于5 L生物反应器,细胞生长状态良好,倍增时间小于21 h,在批培养中细胞浓度高达(14.57±0.47)×10^6 cells/mL,比生长速率分别为(0.027±0.012)h^-1、(0.028±0.013)h^-1、(0.027±0.013)h^-1(P>0.05);接种甲型流感病毒H1N1和H3N2,HA效价达到(6~7)log2HA/25μL、CCID50为(4.35~4.68)lgCCID50/mL;接种乙型流感病毒B/P和BX-35增殖效果更好,HA效价达到(9~10)log2HA/25μL,CCID50为(6.38~7.31)lgCCID50/mL。接种重组禽流感病毒H5亚型Re-5、Re-6、Re-10均能很好的增殖,HA效价达到(7~9)log2HA/25μL、CCID50为(6.21~6.96)lgCCID50/mL。结论本研究获得一株具有自主知识产权的流感/禽流感病毒敏感的无血清悬浮培养型MDCK-XF02细胞株,实现了生物反应器高密度放大培养,为我国开展流感疫苗研究和生产提供细胞基质,也为其他动物细胞悬浮驯化提供参考。 展开更多
关键词 MDCK细胞 无血清 悬浮驯化 流感病毒 禽流感病毒
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貉细小病毒RDPV-JL3株的分离鉴定及VP2基因序列分析 被引量:3
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作者 郭晓芹 于小亚 +5 位作者 李滋睿 李卓宸 吕甜甜 曹海旭 宋海岩 赵传芳 《特产研究》 2021年第5期13-18,共6页
本试验从吉林省某养殖场疑似患貉细小病毒的貉肠道组织中成功分离出1株貉细小病毒(Raccoon dog parvovirus,RDPV),将其命名为RDPV-JL3株。对其VP2基因进行克隆测序和序列分析,结果表明,VP2核苷酸基因序列与RDPV HeB10-3(KJ194463)株相... 本试验从吉林省某养殖场疑似患貉细小病毒的貉肠道组织中成功分离出1株貉细小病毒(Raccoon dog parvovirus,RDPV),将其命名为RDPV-JL3株。对其VP2基因进行克隆测序和序列分析,结果表明,VP2核苷酸基因序列与RDPV HeB10-3(KJ194463)株相似性为100%,属于CPV-2亚型。系统进化树表明其与RDPV HeB10-3株和RDPV-17-JL-9(MH581183)株处于同一进化分支且与CPV-Vac1疫苗株亲缘关系密切。本研究为更好地在本地区开展貉细小病毒流行病学调查提供了有益借鉴,也为深入研究貉细小病毒变异和传播的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 貉细小病毒 分离鉴定 VP2基因 进化分析
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重组禽流感病毒H5亚型Re-7株在MDCK细胞上增殖条件的研究 被引量:1
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作者 陈宏 王博 +6 位作者 赵海源 李金祥 赵博 李莉 王玉红 崔凯 朱长动 《中国兽药杂志》 2018年第1期1-6,共6页
为了探索重组禽流感病毒H5亚型Re-7株在MDCK细胞上的增值规律,确定最适的接毒量与最佳收获时间。将重组禽流感病毒H5亚型Re-7株接种至100 L生物反应器全悬浮无血清培养的MDCK细胞进行增殖试验,检测不同病毒感染量,接种后不同时间病毒的H... 为了探索重组禽流感病毒H5亚型Re-7株在MDCK细胞上的增值规律,确定最适的接毒量与最佳收获时间。将重组禽流感病毒H5亚型Re-7株接种至100 L生物反应器全悬浮无血清培养的MDCK细胞进行增殖试验,检测不同病毒感染量,接种后不同时间病毒的HA、TCID50以及EID50。根据确定的最佳增值条件将病毒接种到MDCK细胞中进行大规模增殖培养。确定最适接毒量MOI为10^(-2),最佳收获时间为60 h。在100 L生物反应器中进行重复验证,获得稳定的试验结果,病毒HA达到1∶1024,每1 m L病毒含量达到107.33TCID50,每0.1 m L病毒含量达到106.83EID50。研究为重组禽流感病毒H5亚型Re-7株的全悬浮规模化生产提供了相对稳定的参数指标。 展开更多
关键词 重组禽流感病毒 MDCK细胞 全悬浮培养 接毒量 收获时间
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当前鸡支原体感染病理特点及综合防控措施 被引量:3
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作者 李天增 史荣华 +1 位作者 王伟明 肖贤良 《吉林畜牧兽医》 2023年第8期77-78,共2页
从家禽中已分离出20多种支原体,而对家禽引起危害最常见的有鸡毒支原体(MG)、火鸡支原体(MM)和滑液囊支原体(MS)。在国内各品种家禽上鸡毒支原体(MG)感染后主要表现为咳嗽、流鼻液、呼吸道啰音和张口呼吸等慢性呼吸道症状;滑液囊支原体(... 从家禽中已分离出20多种支原体,而对家禽引起危害最常见的有鸡毒支原体(MG)、火鸡支原体(MM)和滑液囊支原体(MS)。在国内各品种家禽上鸡毒支原体(MG)感染后主要表现为咳嗽、流鼻液、呼吸道啰音和张口呼吸等慢性呼吸道症状;滑液囊支原体(MS)主要引起关节部位腱鞘及滑液囊膜损坏,导致肿胀和渗出性炎症反应,包括腱鞘滑膜炎或黏液囊炎等,最终引起鸡只瘫痪;火鸡支原体(MM)仅对火鸡有致病性,在国内很少发现。近年来,临床上家禽支原体感染发病率较高,给养殖业造成较大的经济损失,所以必须对家禽支原体流行病学特征充分了解,弄清发病原因,采取综合防控措施。 展开更多
关键词 家禽 支原体 流行病学 防控措施
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重组禽流感病毒H7N9 H7-Re1株在MDCK悬浮细胞中培养条件的优化 被引量:3
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作者 王博 陈宏 +6 位作者 赵海源 王玉红 杨柳 赵博 李翰志 李莉 朱长动 《吉林畜牧兽医》 2018年第2期5-7,共3页
目的:探索重组禽流感病毒H7N9 H7-Re1株的最佳培养条件,为规模化生产提供参数。方法:通过分析病毒培养液的血清浓度、温度、pH、胰酶终浓度和病毒接种量、收获时间来优化病毒在MDCK上的最佳培养条件。结果:重组禽流感病毒H7N9 H7-Re1株... 目的:探索重组禽流感病毒H7N9 H7-Re1株的最佳培养条件,为规模化生产提供参数。方法:通过分析病毒培养液的血清浓度、温度、pH、胰酶终浓度和病毒接种量、收获时间来优化病毒在MDCK上的最佳培养条件。结果:重组禽流感病毒H7N9 H7-Re1株在MDCK悬浮细胞上增殖的最佳培养条件为按接种量MOI 10^(-3),于胰酶终浓度为5μg/L、温度35.0℃、pH7.3±0.1的无血清病毒培养液中培养,收获时间为48~60 h,以48 h最佳。 展开更多
关键词 MDCK悬浮细胞 重组禽流感病毒 H7N9H7-Re1株 培养条件
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国产6000L反应器培养悬浮MDCK细胞关键参数的研究
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作者 朱长动 王仁君 +12 位作者 曾晓敏 赵海源 刘金伟 金燕斌 陈宏 谷亮 王传飞 王琳雅 王博暄 钟莉 李金祥 蒋晓梅 张天舒 《吉林畜牧兽医》 2019年第7期5-8,10,共5页
参照小型生物反应器悬浮培养MDCK细胞的pH值、溶氧、温度等最优工艺参数,结合6000L罐体搅拌桨叶、挡板、气体分布器等情况,在5L、25L、125L、600L、3000L、6000L罐体上进行反应器逐级放大培养试验,建立MDCK悬浮细胞生物反应器放大培养... 参照小型生物反应器悬浮培养MDCK细胞的pH值、溶氧、温度等最优工艺参数,结合6000L罐体搅拌桨叶、挡板、气体分布器等情况,在5L、25L、125L、600L、3000L、6000L罐体上进行反应器逐级放大培养试验,建立MDCK悬浮细胞生物反应器放大培养工艺。结果显示:取摇瓶悬浮培养的MDCK细胞用生物反应器连续放大培养,细胞大小均一,细胞倍增时间为22~24h,细胞增殖最大密度可达9.61×106个/mL。MDCK细胞能适应生物反应器连续放大规模化培养,用小型生物反应器优化获得的培养体系参数经拟合修正后,适用于大型6000L生物反应器培养MDCK细胞。 展开更多
关键词 MDCK细胞 大型6000L生物反应器 关键参数的研究
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重组禽流感病毒灭活疫苗(细胞源)破乳方法对比及应用 被引量:3
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作者 宋海岩 付春杰 +5 位作者 石莹 孟令伟 张丹 李莉 赵海源 王玉红 《吉林畜牧兽医》 2018年第1期17-19,共3页
为寻找适合重组禽流感病毒灭活疫苗(细胞源)油包水剂型疫苗的破乳方法,进而能够快速、有效的提取疫苗中的水相,通过析出的水相,尝试进行一些关于疫苗质量的试验,寻找合适的破乳方法并进行检测方法的运用。破乳采用三种方法进行对比,即:... 为寻找适合重组禽流感病毒灭活疫苗(细胞源)油包水剂型疫苗的破乳方法,进而能够快速、有效的提取疫苗中的水相,通过析出的水相,尝试进行一些关于疫苗质量的试验,寻找合适的破乳方法并进行检测方法的运用。破乳采用三种方法进行对比,即:冻融法、水浴法、丙酮沉淀法,提取的水相进行细菌内毒素测定和红细胞凝集试验。结果表明:通过冻融的方法能够提取水相,而水浴方法和丙酮沉淀方法未出现水相析出,故采用冻融的方法更适合重组禽流感病毒灭活疫苗(细胞源)油包水剂型水相的析出并且操作简便。对提取的水相进行细菌内毒素测定和红细胞凝集试验:细菌内毒素测定结果均小于10 EU/m L,与乳化前半成品细菌内毒素测定结果相一致。通过乳化前半成品的红细胞凝集试验结果和乳化后破乳析出水相的细胞凝集试验结果对比,无明显变化,符合乳化时水相各组分配比情况,通过两组试验说明乳化后灭活病毒细菌内毒素未增加,HA效价无变化,疫苗仍保持良好的质量。 展开更多
关键词 重组禽流感病毒 灭活疫苗(细胞源) 破乳方法
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重组禽流感病毒灭活疫苗(细胞源)保存期试验的研究 被引量:1
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作者 付春杰 杜鑫 +4 位作者 杨柳 高晓庆 苏操 张丹 赵海源 《吉林畜牧兽医》 2020年第2期9-10,共2页
为保证重组禽流感病毒灭活疫苗(细胞源)在有效期内使用是安全、高效、稳定、均一的,将公司生产的3批疫苗置2~8 ℃保存,分别于保存0、4、8、12、15个月时进行性状检验、效力检验及甲醛残留量测定。结果表明,保存15个月内疫苗性状稳定,免... 为保证重组禽流感病毒灭活疫苗(细胞源)在有效期内使用是安全、高效、稳定、均一的,将公司生产的3批疫苗置2~8 ℃保存,分别于保存0、4、8、12、15个月时进行性状检验、效力检验及甲醛残留量测定。结果表明,保存15个月内疫苗性状稳定,免疫SPF鸡后血清抗体效价无明显变化,甲醛残留量含量稳定。实际应用中,疫苗按规定条件储存,在有效期内使用是有质量保证的。 展开更多
关键词 重组禽流感病毒 灭活疫苗 细胞源 保存期
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H7N9禽流感的流行病学特征及防控措施 被引量:1
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作者 于盼盼 李洋 《吉林畜牧兽医》 2021年第1期82-83,共2页
2013年春季,一种新的禽源性甲型流感(H7N9)病毒在中国出现并在人与人之间传播。禽类感染H7N9禽流感病毒呈隐型感染,无明显的临床症状,但人感染H7N9禽流感病毒则会引起严重的急性呼吸道疾病甚至死亡。本文将对全球H7N9禽流感病毒的传播情... 2013年春季,一种新的禽源性甲型流感(H7N9)病毒在中国出现并在人与人之间传播。禽类感染H7N9禽流感病毒呈隐型感染,无明显的临床症状,但人感染H7N9禽流感病毒则会引起严重的急性呼吸道疾病甚至死亡。本文将对全球H7N9禽流感病毒的传播情况,发病机制以及防控措施进行阐述。 展开更多
关键词 H7N9 传播 发病机制 防控措施
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重组禽流感病毒细胞源灭活疫苗灭活工艺的研究及应用
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作者 杜鑫 付春杰 +7 位作者 苏操 孟令伟 石莹 张丹 曲艳娇 宋海岩 朱长动 杨柳 《吉林畜牧兽医》 2023年第10期5-6,共2页
为筛选β-丙内酯、甲醛、二乙烯亚胺、N-乙酰乙烯亚胺、盐酸聚六亚甲基胍对重组禽流感病毒细胞毒的最佳灭活条件,本研究采用不同浓度的β-丙内酯、甲醛、二乙烯亚胺、N-乙酰乙烯亚胺和盐酸聚六亚甲基胍,在不同作用时间下对重组禽流感病... 为筛选β-丙内酯、甲醛、二乙烯亚胺、N-乙酰乙烯亚胺、盐酸聚六亚甲基胍对重组禽流感病毒细胞毒的最佳灭活条件,本研究采用不同浓度的β-丙内酯、甲醛、二乙烯亚胺、N-乙酰乙烯亚胺和盐酸聚六亚甲基胍,在不同作用时间下对重组禽流感病毒细胞毒进行灭活,通过灭活检验、血凝(HA)测定和无菌检验确定灭活效果,筛选出了不同灭活剂灭活的最佳条件并配苗,分别进行效力和安全性检验。结果表明,抗体效价均高于国家标准,SPF鸡接种后安全性良好,均无不良反应,为规模化生产重组禽流感病毒细胞源灭活疫苗所需的理想灭活剂的应用提供参考依据。 展开更多
关键词 重组禽流感病毒细胞毒 抗体效价 灭活剂
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