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牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E2基因重组卡介苗初步免疫研究
被引量:
2
1
作者
李健明
杨宇航
+5 位作者
王慧慧
曾范利
时坤
张妍
刘菲
杜锐
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期146-149,共4页
为评价表达牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(BVDV)E2基因重组卡介苗(rBCG)的初步免疫效果,本研究分别将rBCG-pMV261-E2和rBCG-pMV361-E2免疫实验用大耳白兔,通过间接ELISA方法和T淋巴细胞转化试验分别检测兔体内体液免疫和细胞免疫应答水平。...
为评价表达牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(BVDV)E2基因重组卡介苗(rBCG)的初步免疫效果,本研究分别将rBCG-pMV261-E2和rBCG-pMV361-E2免疫实验用大耳白兔,通过间接ELISA方法和T淋巴细胞转化试验分别检测兔体内体液免疫和细胞免疫应答水平。结果显示在体液免疫方面,两组rBCG均从第7 d开始产生BVDV抗体,抗体水平逐渐上升,在42 d达到峰值,并且rBCG-pMV361-E2刺激所产生的抗体水平始终高于rBCG-pMV261-E2;而rBCG血清中的抗结核菌抗体水平与正常BCG无显著差异,与BVDV阳性对照组和阴性对照组之间则差异显著;在细胞免疫方面,与阴性对照组相比,两组rBCG与BVDV灭活苗相同,免疫实验兔后淋巴细胞对特异性刺激均有明显的增殖。表明两组rBCG免疫实验兔后均使其产生了体液免疫应答和细胞免疫应答,为进一步研制BVDV新型基因工程疫苗奠定基础。
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关键词
牛病毒性腹泻-黏膜病病毒
E2基因
重组卡介苗
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职称材料
牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E2基因在卡介苗中的优化表达
被引量:
3
2
作者
曾范利
张云
+5 位作者
张梦
时坤
李建明
刘菲
李晶
杜锐
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期94-100,共7页
为构建牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(BVDV)基因工程活载体疫苗,根据已知的BVDV Changehun184毒株E2基因序列,利用DN.AStar生物学软件对其进行分析,预测了可能存在的抗原表位,设计6对引物,分别扩增了包含预测抗原位点的6个片段,1—297 aa、1...
为构建牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(BVDV)基因工程活载体疫苗,根据已知的BVDV Changehun184毒株E2基因序列,利用DN.AStar生物学软件对其进行分析,预测了可能存在的抗原表位,设计6对引物,分别扩增了包含预测抗原位点的6个片段,1—297 aa、1—345 aa、1—374 aa、45—297 aa、45—345 aa和45—374 aa,克隆至穿梭表达载体pMV361中,经酶切、PCR扩增和测序证实已正确插入到表达载体中,构建了6个原核表达质粒。阳性重组质粒通过电转化到卡介苗(BCG)感受态中,热诱导后,进行SDS-PAGE分析和免疫印迹检测。结果表明6个重组质粒在卡介苗中均有不同程度的表达,表达产物与理论推测的相对分子质量一致。Western blot结果显示其融合蛋白能被牛抗BVDV的阳性血清识别,具有相应的反应原性。本研究为进一步研究BVDV基因工程活载体疫苗奠定了基础。
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关键词
牛病毒性腹泻-黏膜病病毒
E
2
基因
卡介苗
优化表达
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职称材料
题名
牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E2基因重组卡介苗初步免疫研究
被引量:
2
1
作者
李健明
杨宇航
王慧慧
曾范利
时坤
张妍
刘菲
杜锐
机构
吉林
农业
大学
中药材
学院
吉林
农业
大学
动物
科学技术
学院
长春西诺生物科技有限公司
吉林
农业
大学
研究生
学院
教育部
动物
生产
及产品质量
安全
重点
实验室
/
吉林省
药用
动物
二级
实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期146-149,共4页
基金
国家科技支撑计划(2011BAI03B02-1)
国家自然科学基金(31072140)
+1 种基金
吉林省科技厅科技成果转化促进计划(20125067)
吉林农业大学博士启动基金(201209)
文摘
为评价表达牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(BVDV)E2基因重组卡介苗(rBCG)的初步免疫效果,本研究分别将rBCG-pMV261-E2和rBCG-pMV361-E2免疫实验用大耳白兔,通过间接ELISA方法和T淋巴细胞转化试验分别检测兔体内体液免疫和细胞免疫应答水平。结果显示在体液免疫方面,两组rBCG均从第7 d开始产生BVDV抗体,抗体水平逐渐上升,在42 d达到峰值,并且rBCG-pMV361-E2刺激所产生的抗体水平始终高于rBCG-pMV261-E2;而rBCG血清中的抗结核菌抗体水平与正常BCG无显著差异,与BVDV阳性对照组和阴性对照组之间则差异显著;在细胞免疫方面,与阴性对照组相比,两组rBCG与BVDV灭活苗相同,免疫实验兔后淋巴细胞对特异性刺激均有明显的增殖。表明两组rBCG免疫实验兔后均使其产生了体液免疫应答和细胞免疫应答,为进一步研制BVDV新型基因工程疫苗奠定基础。
关键词
牛病毒性腹泻-黏膜病病毒
E2基因
重组卡介苗
Keywords
bovine viral diarrhea-mucosal disease virus
E2 gene
recombinant BCG
分类号
S852.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E2基因在卡介苗中的优化表达
被引量:
3
2
作者
曾范利
张云
张梦
时坤
李建明
刘菲
李晶
杜锐
机构
吉林
农业
大学
中药材
学院
吉林
农业
大学
动物
科学技术
学院
长春金赛药业有限责任公司
吉林农业大学研究生学院 教育部动物生产及产品质量安全重点实验室吉林省药用动物二级实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期94-100,共7页
基金
国家科技支撑计划(2011BA103B02-1)
国家自然科学基金(31072140
+2 种基金
31272565)
吉林省科技厅科技支撑计划(20120225)
吉林农业大学博士启动基金(201209)
文摘
为构建牛病毒性腹泻-黏膜病病毒(BVDV)基因工程活载体疫苗,根据已知的BVDV Changehun184毒株E2基因序列,利用DN.AStar生物学软件对其进行分析,预测了可能存在的抗原表位,设计6对引物,分别扩增了包含预测抗原位点的6个片段,1—297 aa、1—345 aa、1—374 aa、45—297 aa、45—345 aa和45—374 aa,克隆至穿梭表达载体pMV361中,经酶切、PCR扩增和测序证实已正确插入到表达载体中,构建了6个原核表达质粒。阳性重组质粒通过电转化到卡介苗(BCG)感受态中,热诱导后,进行SDS-PAGE分析和免疫印迹检测。结果表明6个重组质粒在卡介苗中均有不同程度的表达,表达产物与理论推测的相对分子质量一致。Western blot结果显示其融合蛋白能被牛抗BVDV的阳性血清识别,具有相应的反应原性。本研究为进一步研究BVDV基因工程活载体疫苗奠定了基础。
关键词
牛病毒性腹泻-黏膜病病毒
E
2
基因
卡介苗
优化表达
Keywords
Bovine viral diarrhea-mucosal disease virus(BVDV)
E_2 gene
BCG
optimizing expression
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E2基因重组卡介苗初步免疫研究
李健明
杨宇航
王慧慧
曾范利
时坤
张妍
刘菲
杜锐
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E2基因在卡介苗中的优化表达
曾范利
张云
张梦
时坤
李建明
刘菲
李晶
杜锐
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
3
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职称材料
已选择
0
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