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BADH/pepB双价基因无选择标记表达载体转化苜蓿的初步研究 被引量:16
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作者 杨金慧 王丕武 +2 位作者 曲静 王巍 王俊玲 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2009年第4期20-23,共4页
选用公农1号紫花苜蓿,以5~7d苗龄的无菌子叶为外植体,通过农杆菌介导法将含有甜菜碱醛脱氢酶(BADH)和酸性蛋白酶(pepB)双价基因的无选择标记表达载体导入苜蓿子叶中,并用含有Na2CO3和NaHCO3碱性盐溶液的培养基进行筛选,得到抗... 选用公农1号紫花苜蓿,以5~7d苗龄的无菌子叶为外植体,通过农杆菌介导法将含有甜菜碱醛脱氢酶(BADH)和酸性蛋白酶(pepB)双价基因的无选择标记表达载体导入苜蓿子叶中,并用含有Na2CO3和NaHCO3碱性盐溶液的培养基进行筛选,得到抗盐碱转化植株。碱性盐浓度48mmol/L宜于子叶愈伤诱导,有利于转化植株的获得。对转化植株进行PCR检测,初步证明目的基因序列已经整合到苜蓿基因组中。移栽成活的13棵碱性盐抗性植株经PCR检测有3棵植株呈阳性。 展开更多
关键词 无选择标记表达载体 BADH pepB 转化 苜蓿
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大豆根际溶无机磷细菌Klebsiella sp.wj6的分离鉴定与溶磷特性分析 被引量:12
2
作者 王春红 武志海 +5 位作者 孙合美 于亭 张婷婷 刘晶晶 汲添 杨美英 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期560-567,共8页
[目的]为了明确黑土种植的大豆根际溶磷菌的种类及不同溶磷菌溶无机磷的特性,并有效利用溶磷菌,增加黑土的可持续利用能力。[方法]以NBRIP为分离培养基从大豆根际土壤中分离到1株溶磷菌(命名为wj6),采用Vitek 2自动分析系统和16S rDNA... [目的]为了明确黑土种植的大豆根际溶磷菌的种类及不同溶磷菌溶无机磷的特性,并有效利用溶磷菌,增加黑土的可持续利用能力。[方法]以NBRIP为分离培养基从大豆根际土壤中分离到1株溶磷菌(命名为wj6),采用Vitek 2自动分析系统和16S rDNA方法对其进行鉴定;以NBRIP分离培养基为基础,利用L25(53)正交设计试验,从碳源、氮源及pH值3个方面对菌株wj6溶磷培养基进行优化;利用优化后的NBRIP培养基测定wj6溶解Ca3(PO4)2、FePO4和AlPO4的特点以及溶磷过程中磷酸酶活性和葡萄糖脱氢酶活性。[结果]经Vitek 2自动分析系统和16S rDNA方法鉴定菌株wj6为Klebsiella sp.。菌株wj6以葡萄糖和蛋白胨为碳源和氮源,pH值为8时溶磷量最高;对Ca3(PO4)2、FePO4、AlPO4均有较强的溶解能力,最高溶磷量分别为409.28、60.59和32.90μg·m L-1。菌株wj6在溶解FePO4和AlPO4时受环境pH值的影响较大,当接种到pH值为8的溶磷培养基中,能溶解FePO4和AlPO4,而在培养基原液(pH3)中不具有溶磷能力;以Ca3(PO4)2为唯一磷源,在溶磷过程中酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和葡萄糖脱氢酶活性先增加后减小,36 h内葡萄糖脱氢酶活性较大,与其他时间内酶活差异显著。[结论]从大豆根际分离到的溶磷菌Klebsiella sp.wj6在不同难溶性磷酸盐中溶磷能力差异较大,且溶磷受环境pH值的影响。磷酸酶和葡萄糖脱氢酶在溶磷过程中起重要作用。 展开更多
关键词 KLEBSIELLA sp.wj6 溶磷特性 磷酸酶 葡萄糖脱氢酶
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鹅细小病毒研究进展 被引量:13
3
作者 马磊 董浩 +3 位作者 蒋运博 段小波 谷松至 胡桂学 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第6期165-168,共4页
小鹅瘟是由鹅细小病毒引起的一种急性、亚急性烈性传染病,是目前危害养鹅业的重要传染病之一。近年来关于鹅细小病毒的研究又有了新的发展和新的观点,作者从鹅细小病毒分子生物学、检测方法、致病机理和抗原位点的定位等方面进行了阐述。
关键词 小鹅瘟 鹅细小病毒 致病机理 抗原表位
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不同施氮水平下3种类型粳稻光合特性及干物质积累分析 被引量:8
4
作者 武志海 高娃 +4 位作者 金鸿明 郝娜 杨美英 凌凤楼 张治安 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第8期75-82,共8页
【目的】阐明吉林省主推粳稻品种在不同氮水平下光合特性及干物质积累的差异,为提高稻田氮肥利用率提供依据。【方法】采用大田试验,在不施氮(CK)、1N(纯氮70kg/hm2)、2N(纯氮140kg/hm2)和3N(纯氮210kg/hm2)4种施氮水平下,研究3个吉林... 【目的】阐明吉林省主推粳稻品种在不同氮水平下光合特性及干物质积累的差异,为提高稻田氮肥利用率提供依据。【方法】采用大田试验,在不施氮(CK)、1N(纯氮70kg/hm2)、2N(纯氮140kg/hm2)和3N(纯氮210kg/hm2)4种施氮水平下,研究3个吉林省主推水稻品种(吉农大505,吉农大603,吉农大809)灌浆期农艺性状、光合特性和干物质积累特性及产量的变化。【结果】随施氮水平的增加,灌浆期株高、分蘖数和叶面积指数均显著增大。吉农大505在2N条件下剑叶和倒三叶净光合速率最大,吉农大603在3N条件下倒三叶净光合速率较高,吉农大809功能叶净光合速率受施氮水平影响不明显,3个品种净光合速率的差异可能是由于不同氮水平对不同品种冠层结构的影响导致叶片表观叶肉导度不同而引起的。吉农大603和吉农大809茎鞘、叶和穗部的干物质积累量均呈现随施氮水平的增加而增加的趋势,吉农大505茎鞘的干物质积累量在2N水平达到最高值。吉农大603在3N水平产量最高,其他2个品种在2N水平下产量最高,这与对应氮水平条件下各品种灌浆期功能叶片净光合速率、高效叶面积有关。产量与茎鞘、穗及地上部干物质积累量显著或极显著正相关。【结论】不同类型粳稻品种适宜施氮量存在差异,吉农大505和吉农大809相对耐低氮,而吉农大603适宜在高氮下栽培。 展开更多
关键词 水稻 光合特性 干物质积累量
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外源溶磷菌对不同土壤条件下大豆生长特性的影响 被引量:11
5
作者 武志海 刘晶晶 +3 位作者 杨美英 卢冬雪 岳胜天 付丽 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期78-86,共9页
为了明确溶磷菌在多种土壤中的应用效果,探讨了两株溶磷菌对黑土及盐碱土种植大豆的促生效应。采用盆栽试验分析了不同处理对大豆光合作用、渗透调节物质含量、生物量、氮磷吸收及产量的影响。结果表明:加菌处理可增加植株Pn,显著降低R6... 为了明确溶磷菌在多种土壤中的应用效果,探讨了两株溶磷菌对黑土及盐碱土种植大豆的促生效应。采用盆栽试验分析了不同处理对大豆光合作用、渗透调节物质含量、生物量、氮磷吸收及产量的影响。结果表明:加菌处理可增加植株Pn,显著降低R6、R8两时期叶片可溶性蛋白、可溶性糖及游离氨基酸含量,增加R2~R8时期大豆株高和根干重,混合土壤中加菌处理也可提高植株地上部分氮、磷及植株全磷、全氮含量。添加wj1和混合菌处理的植株干重优于添加wj3的处理。黑土加混合菌可显著提高大豆R2期叶片WUE,增加V3、R2和R8这3个时期大豆地上、地下部分氮、磷及植株全氮、全磷的含量。黑土加wj1与混合土壤加菌处理的大豆株荚数、总粒数、单株粒重及百粒重均高于未加菌处理。添加外源溶磷菌,对黑土及盐碱土栽培大豆均有不同程度的促生效果,能明显增强大豆在混合盐碱土壤中的适应性,增加植株生物量、氮磷吸收量和产量,且混合菌处理对大豆的促生效应优于wj1及wj3单一菌株处理。 展开更多
关键词 溶磷菌 大豆 盐碱土 促生效应
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重组人胶原蛋白肽在大肠杆菌中的高效表达 被引量:7
6
作者 陈光 吴铭 +1 位作者 王刚 孙旸 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期656-660,共5页
目的:构建含有胶原蛋白基因的原核表达载体pET32a-CP6,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行高效表达,为获得大量可溶的胶原蛋白肽提供可靠依据。方法:将重组表达载体pET32a-CP6转化到大肠杆菌BL21中,以IPTG为诱导剂,对温度、接种量、诱导时机... 目的:构建含有胶原蛋白基因的原核表达载体pET32a-CP6,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行高效表达,为获得大量可溶的胶原蛋白肽提供可靠依据。方法:将重组表达载体pET32a-CP6转化到大肠杆菌BL21中,以IPTG为诱导剂,对温度、接种量、诱导时机、IPTG诱导浓度等各种发酵参数进行优化,筛选高效表达的发酵条件,并通过Ni-NTA亲和层析进行纯化分析。结果:菌株在37℃、接种量为2%、摇瓶培养约2.5h后,加入终浓度为0.5mmol.L-1的IPTG,37℃诱导5h,收获的蛋白产量最高为31.52mg.L-1,Westernblotting分析该表达产物与人COL6A2单克隆抗体有特异结合能力。结论:优化工程菌高效表达重组人胶原蛋白,纯化重组蛋白。 展开更多
关键词 重组胶原蛋白肽 重组蛋白纯化 大肠杆菌
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氮肥施用量对嵌合体‘金旗’玉簪叶色的影响 被引量:7
7
作者 刘岳路 张金政 +2 位作者 李晓东 刘洪章 孙国峰 《草业学报》 CSCD 北大核心 2011年第2期93-100,共8页
以嵌合体花叶玉簪代表品种‘金旗’为试验材料,研究了4个水平的氮肥处理(盆栽土尿素用量0,1,2,3g/kg)对其不同叶色部位叶色值、叶绿素含量、全氮含量、氮代谢关键酶活性以及叶绿体超微结构的影响。研究结果表明,氮肥主要影响‘金旗’玉... 以嵌合体花叶玉簪代表品种‘金旗’为试验材料,研究了4个水平的氮肥处理(盆栽土尿素用量0,1,2,3g/kg)对其不同叶色部位叶色值、叶绿素含量、全氮含量、氮代谢关键酶活性以及叶绿体超微结构的影响。研究结果表明,氮肥主要影响‘金旗’玉簪叶片黄色部位的叶色变化,0和1 g/kg氮肥处理能够维持其花叶性状,叶绿素、全氮含量以及氮代谢关键酶活性等指标无显著变化,叶绿体结构发育不完全,缺乏基粒堆积;2和3 g/kg氮肥处理导致叶片黄色部位转绿,与0和1 g/kg氮肥处理下各指标相比,叶绿素、全氮含量显著提高,谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酸合成酶(GOGAT)活性显著上升,叶绿体超微结构发育完全,并且出现大量类囊体片层结构。 展开更多
关键词 氮肥 嵌合体'金旗’玉簪 叶色 氮代谢 叶绿体超微结构
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大豆锰超氧化物歧化酶基因在乳酸乳球菌中的分泌表达 被引量:4
8
作者 马红丹 张丽媛 +4 位作者 赵邯郸 徐丹丹 曲静 关淑艳 王丕武 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第1期135-139,共5页
为使大豆锰超氧化物歧化酶(Mn superoxide dismutase,Mn SOD)在乳酸乳球菌中高效表达,将克隆的Mn SOD基因开放阅读框序列分别重组到质粒p NZ8149和经改造的质粒p NZS上,表达载体p NZ-SOD和分泌表达载体p NZS-SOD,将两者分别以电穿孔法... 为使大豆锰超氧化物歧化酶(Mn superoxide dismutase,Mn SOD)在乳酸乳球菌中高效表达,将克隆的Mn SOD基因开放阅读框序列分别重组到质粒p NZ8149和经改造的质粒p NZS上,表达载体p NZ-SOD和分泌表达载体p NZS-SOD,将两者分别以电穿孔法转化乳酸乳球菌L.lactis NZ3900,经Elliker琼脂板筛选、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、酶切鉴定正确后,获得的两重组菌株加入Nisin进行诱导表达,对L.lactis NZ3900/p NZ-SOD和L.lactis NZ3900/p NZS-SOD的表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和酶活性对比分析。结果显示:L.lactis NZ3900/p NZS-SOD菌株表达SOD总活性约是L.lactis NZ3900/p NZ-SOD菌株的1.6倍,是L.lactis NZ3900/p NZ8149的13.5倍,且可将表达的约2/3的SOD分泌到胞外,表明经改造的乳酸菌分泌表达系统L.lactis NZ3900/p NZS能够分泌表达SOD,并增强SOD的表达。 展开更多
关键词 锰超氧化物歧化酶(Mn SOD) 食品级分泌表达载体 乳酸乳球菌
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“5S”管理理念在高校生物化学实验室管理中的应用 被引量:10
9
作者 李雨婷 金周雨 +1 位作者 姜秀云 宋慧 《安徽农业科学》 CAS 2013年第30期12227-12228,共2页
介绍了"5S"管理的内涵,分析了高校生物化学实验室的特点及存在的问题,分别从整理(SEIRI)、整顿(SEITON)、清扫(SEISO)、清洁(SEISO)、素养(SHITSUKE)5个方面阐述了"5S"管理理念在高校生物化学实验室管理中的运用。
关键词 “5S”管理 实验室管理 生物化学实验室
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膦丝菌素乙酰转移酶的表达及单克隆抗体制备 被引量:5
10
作者 高旭东 王永志 +8 位作者 时圣凤 李忠鹏 李小宇 徐文静 张正坤 路扬 张佳诗 李启云 王金刚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期500-503,共4页
目的表达有生物活性的膦丝菌素乙酰转移酶(PAT),制备PAT蛋白单克隆抗体(mAb)。方法通过PCR克隆bar基因编码区全长,将bar基因与原核表达载体pET28a(+)连接,构建重组质粒pET28-bar并转化大肠杆菌菌株BL21(DE3),经IPTG诱导目的蛋白表达,利... 目的表达有生物活性的膦丝菌素乙酰转移酶(PAT),制备PAT蛋白单克隆抗体(mAb)。方法通过PCR克隆bar基因编码区全长,将bar基因与原核表达载体pET28a(+)连接,构建重组质粒pET28-bar并转化大肠杆菌菌株BL21(DE3),经IPTG诱导目的蛋白表达,利用镍离子亲和层析纯化PAT蛋白,分析PAT蛋白活性。免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾脏与Sp2/0细胞融合,经间接ELISA筛选分泌抗PAT蛋白抗体杂交瘤细胞。结果在大肠杆菌中以可溶形式表达出重组PAT蛋白,纯化的重组PAT蛋白具有乙酰转移酶活性,制备了9株抗PAT蛋白mAb。结论表达的PAT蛋白可以用于除草剂解除剂研究,制备的mAb可能用于转基因产品的检测研究。 展开更多
关键词 膦丝菌素乙酰转移酶 BAR基因 蛋白表达 活性 抗体制备
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金针菇菇脚对肉鸡生长性能、肠道发育及挥发性脂肪酸的影响 被引量:6
11
作者 王淑媛 宋慧 《饲料工业》 北大核心 2018年第8期37-42,共6页
为探讨金针菇菇脚(flammulina velutipes stem base,FVS)对肉鸡生长性能、肠道发育及挥发性脂肪酸(volatile fatty acid,VFA)的影响,进行试验。试验选用4 550只1 d爱拔益加(AA)肉鸡,随机分为5组,每组7个重复。在21 d和42 d,每个重复选择... 为探讨金针菇菇脚(flammulina velutipes stem base,FVS)对肉鸡生长性能、肠道发育及挥发性脂肪酸(volatile fatty acid,VFA)的影响,进行试验。试验选用4 550只1 d爱拔益加(AA)肉鸡,随机分为5组,每组7个重复。在21 d和42 d,每个重复选择3只肉鸡屠宰并取样,分别测量肉鸡平均日增重、平均日采食量和料重比等生长性能,十二指肠、空肠、回肠和盲肠的长度、重量,并利用气相色谱法测量盲肠VFA浓度。结果显示:与空白组相比,6%FVS阶段组肉鸡平均日增重显著增加;2%FVS、4%FVS组和6%FVS组的平均日采食量显著降低;4%FVS组和6%FVS阶段组料重比显著降低。与空白组相比,21 d 4%FVS组和6%FVS阶段组十二指肠长度显著增加;6%FVS阶段组十二指肠重量显著增加;6%FVS阶段组空肠长度和重量均显著增加;2%FVS组和6%FVS阶段组回肠重量显著增加;2%FVS组和4%FVS组盲肠重量显著增加。与空白组相比,42 d 2%FVS、4%FVS组和6%FVS组十二指肠长度显著增加;4%FVS组和6%FVS阶段组十二指肠重量显著增加,6%FVS阶段组空肠重量显著增加;4%FVS组和6%FVS阶段组回肠长度显著增加;6%FVS阶段组回肠重量显著增加;4%FVS组盲肠长度显著增加;2%FVS、4%FVS组和6%FVS组盲肠重量显著增加。与空白组相比,21 d2%FVS、4%FVS组和6%FVS阶段组盲肠食糜乙酸和丙酸含量显著增加,各FVS组盲肠食糜丁酸含量均显著增加;42 d 2%FVS、4%FVS组和6%FVS阶段组盲肠食糜乙酸、丙酸和丁酸含量均显著增加。与空白组相比,21 d 4%FVS组和6%FVS阶段组盲肠食糜pH值显著降低;42 d 4%FVS组和6%FVS组盲肠食糜pH值显著降低。以上结果表明,日粮中添加FVS可提高肉鸡生长性能,促进肠道发育,提高盲肠食糜VFA含量,降低盲肠食糜pH值,有利于肠道健康。 展开更多
关键词 FVS 肉鸡 生长性能 长度 重量 VFA PH值
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金针菇菇脚对热应激蛋鸡生长性能、HSP70 mRNA表达和短链脂肪酸含量的影响 被引量:4
12
作者 王淑媛 卫佳丽 宋慧 《中国家禽》 北大核心 2018年第9期24-29,共6页
为研究金针菇菇脚(Flammulina velutipes stem base,FVS)对热应激蛋鸡生长性能、HSP70 mRNA表达量和短链脂肪酸(Short chain fatty acids,SCFAs)含量的影响,试验选用72只84日龄伊莎褐蛋鸡,随机分为6组:常温空白组(CON)、热应激空白组(HS... 为研究金针菇菇脚(Flammulina velutipes stem base,FVS)对热应激蛋鸡生长性能、HSP70 mRNA表达量和短链脂肪酸(Short chain fatty acids,SCFAs)含量的影响,试验选用72只84日龄伊莎褐蛋鸡,随机分为6组:常温空白组(CON)、热应激空白组(HS)、热应激抗生素组(ANT)和热应激2%、4%、6%FVS组。试验期28 d。结果显示:整个热应激过程中,4%、6%FVS组平均日增重均显著高于HS组(P<0.05)。热应激第14天时,6%FVS组平均日采食量显著低于(P<0.05)其他各组;6%FVS组料重比显著低于HS组(P<0.05)。热应激第28天时,FVS组平均日增重均显著低于HS组(P<0.05)。整个热应激过程中,FVS组的HSP70 mRNA表达量均显著低于HS组(P<0.05),且与CON组和ANT组无显著性差异(P>0.05)。热应激第14天时,HS组SCFAs含量均显著高于其他各组(P<0.05);HS组总SCFAs含量显著高于其他各组(P<0.05);FVS组总SCFAs含量显著高于CON组(P<0.05)。热应激第28天时,2%、6%FVS乙酸含量均显著高于CON组(P<0.05);2%FVS组乙酸含量显著高于其他各组(P<0.05);FVS组丁酸含量显著高于CON组(P<0.05);2%FVS组和6%FVS组总SCFAs含量均显著高于CON组(P<0.05)。研究表明FVS可缓解热应激对蛋鸡生长性能、HSP70 mRNA表达和SCFAs含量的影响,有利于提高蛋鸡生长性能、增加SCFAs含量。 展开更多
关键词 FVS 热应激 蛋鸡 生长性能 HSP70 mRNA SCFAs
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长白山特有种单头橐吾的挥发油成分研究 被引量:8
13
作者 董然 南敏伦 刘洪章 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第36期17900-17901,共2页
[目的]分析长白山特有种单头橐吾叶片挥发油的化学成分。[方法]采用水蒸气蒸馏法提取叶片挥发油,用GC毛细管柱进行分析,用面积归一化法测定其相对含量,并用GC-MS法鉴定化学成分。[结果]检出10个色谱峰,鉴定出9种化合物,占挥发油总量的94... [目的]分析长白山特有种单头橐吾叶片挥发油的化学成分。[方法]采用水蒸气蒸馏法提取叶片挥发油,用GC毛细管柱进行分析,用面积归一化法测定其相对含量,并用GC-MS法鉴定化学成分。[结果]检出10个色谱峰,鉴定出9种化合物,占挥发油总量的94.62%。单头橐吾挥发油主要化学成分为石竹烯氧化物(50.00%),其次是植物醇,z-α-反式-香柠檬醇,环戊甲酸-3-异丙叉-龙脑酯,7-亚甲基-2,4,4-三甲基-2-乙烯基-双环[4,3,0]壬烷,3,7-二甲基-6-辛烯-1-醇甲酸酯,而石竹烯和正十六酸的相对含量均在3.00%以下。其中,石竹烯和石竹烯氧化物占总挥发油的52.17%,2种醇类和2种酯类分别占24.00%和10.44%,1种烷类占5.43%。[结论]鉴定出的9种化合物,均首次从该植物中检出,是开发祛痰止咳及强身类药物的重要资源植物。 展开更多
关键词 单头橐吾 挥发油 气相色谱-质谱
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重组人胶原蛋白肽的表达及纯化工艺的优化 被引量:2
14
作者 吴铭 徐珍珍 +2 位作者 王刚 孙旸 陈光 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第13期2768-2770,2782,共4页
将重组大肠杆菌pC6-BL21活化后,用IPTG诱导表达,探讨了大肠杆菌中重组胶原蛋白肽的最佳表达及纯化条件。结果表明,菌株在37℃,接种量为2%,摇瓶培养3.0 h后,加入终浓度为0.5 mmol/L的IPTG,30℃诱导5.0 h,收获的蛋白产量最高,经Ni-NTA柱... 将重组大肠杆菌pC6-BL21活化后,用IPTG诱导表达,探讨了大肠杆菌中重组胶原蛋白肽的最佳表达及纯化条件。结果表明,菌株在37℃,接种量为2%,摇瓶培养3.0 h后,加入终浓度为0.5 mmol/L的IPTG,30℃诱导5.0 h,收获的蛋白产量最高,经Ni-NTA柱亲和层析纯化,用梯度咪唑缓冲液洗脱蛋白,150 mmol/L咪唑缓冲液洗脱蛋白为纯蛋白,Western blotting分析显示该表达产物与人COL6A2单克隆抗体有特异结合能力。 展开更多
关键词 重组人胶原蛋白肽 纯化 表达
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大豆转录因子GmWRI1基因的分离及其转录激活特性分析 被引量:1
15
作者 陈欢 邓文波 +8 位作者 张莹 刘伟灿 于潇潇 王法微 王野 庄帅兵 张永红 王真慧 李海燕 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期447-453,共7页
为探讨大豆转录因子GmWRI1在大豆种子油脂形成过程中的调控作用,本研究从大豆吉育72花后35d的种子中克隆得到GmWRI1全长cDNA序列,并对该基因编码的蛋白的理化性质、结构功能进行了初步分析;通过实时荧光定量PCR对花后不同时期籽粒中GmW... 为探讨大豆转录因子GmWRI1在大豆种子油脂形成过程中的调控作用,本研究从大豆吉育72花后35d的种子中克隆得到GmWRI1全长cDNA序列,并对该基因编码的蛋白的理化性质、结构功能进行了初步分析;通过实时荧光定量PCR对花后不同时期籽粒中GmWRI1进行定量分析并对种子进行油脂含量的测定,推测GmWRI1的表达量可能与大豆籽粒中油脂含量有关。此外,利用重组DNA技术构建酵母表达载体pGBKT7-GmWRI1并转入AH109酵母菌株中,结果表明GmWRI1具有转录激活活性,属于转录激活子。 展开更多
关键词 大豆 转录因子 GmWRI1 油脂含量
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农杆菌介导轮状病毒抗原蛋白基因VP7转化紫花苜蓿的研究 被引量:2
16
作者 曲静 王丕武 +1 位作者 关淑艳 范玉广 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2011年第5期21-25,共5页
以公农1号紫花苜蓿5~7日龄无菌苗子叶为材料,通过农杆菌介导法将轮状病毒抗原蛋白基因VP7转入紫花苜蓿子叶中,并用卡那霉素进行筛选获得抗性植株。提取转化抗性植株叶片DNA作模板,用VP7基因特异引物进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳分... 以公农1号紫花苜蓿5~7日龄无菌苗子叶为材料,通过农杆菌介导法将轮状病毒抗原蛋白基因VP7转入紫花苜蓿子叶中,并用卡那霉素进行筛选获得抗性植株。提取转化抗性植株叶片DNA作模板,用VP7基因特异引物进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳分析表明有7株扩增出了960bp的特异条带。对7株PCR阳性植株进行PCR—Southern杂交和Southern杂交分析,有4株出现阳性杂交信号,表明目的基因已经整合到紫花苜蓿基因组中,并且是1~2个拷贝。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 子叶 VP 7基因 转化
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不同溶磷菌菌液对盛花期大豆生长的影响 被引量:1
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作者 刘晶晶 孙合美 +3 位作者 岳胜天 卢冬雪 武志海 杨美英 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期275-279,共5页
溶磷菌能将土壤中难溶性无机磷酸盐转化为植株能吸收利用的可溶性磷,从而提高土壤中有效磷含量,促进植株生长发育。分别采用从大豆根际土壤中分离的溶磷菌wj1、wj3及其wj1+wj3混合菌液施入土壤中,研究溶磷菌株对吉林省地区主推大豆品种... 溶磷菌能将土壤中难溶性无机磷酸盐转化为植株能吸收利用的可溶性磷,从而提高土壤中有效磷含量,促进植株生长发育。分别采用从大豆根际土壤中分离的溶磷菌wj1、wj3及其wj1+wj3混合菌液施入土壤中,研究溶磷菌株对吉林省地区主推大豆品种吉育47、吉育99和吉育406盛花期的光合作用、抗逆作用、生长量以及含磷量的影响。结果表明:溶磷菌菌液处理对3个品种大豆有不同程度的促生作用。wj1和wj3单菌种菌液处理增加了3个品种大豆盛花期的光合作用,混合菌可显著降低盛花期3个品种的蒸腾速率,从而提高植株水分利用率。wj3菌液对大豆盛花期生长量的影响较为显著,对根瘤的生长也有良好的促进作用,wj1和混合菌明显增强3个大豆品种植株的抗性。wj3和混合菌液对吉育406叶片中全磷量影响不显著,其它大豆根茎叶的全磷含量均高于对照。其中,wj1处理的根茎叶中全磷含量与对照相比达到显著水平。因此,wj1的综合促生能力优于wj3,更适合应用于农业生产中。 展开更多
关键词 外源溶磷菌 大豆 生长量 光合作用 抗逆作用 全磷量
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分枝杆菌噬菌体CJAUS9 lysB基因的克隆与序列分析 被引量:1
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作者 苏胜兵 姜秀云 +6 位作者 马红霞 高云航 么乃全 王春芳 胡静涛 宋磊 徐凤宇 《中国兽药杂志》 2013年第7期1-4,共4页
参照GenBank中lysB基因序列设计特异引物,以耻垢分枝杆菌噬菌体CJAUS9的基因组为模板,PCR扩增出1029 bp的条带,经酶切、PCR鉴定含有目的基因的克隆载体pMD19-T正确后进行测序分析。结果显示,克隆出的lysB基因与已知分枝杆菌肌尾噬菌体l... 参照GenBank中lysB基因序列设计特异引物,以耻垢分枝杆菌噬菌体CJAUS9的基因组为模板,PCR扩增出1029 bp的条带,经酶切、PCR鉴定含有目的基因的克隆载体pMD19-T正确后进行测序分析。结果显示,克隆出的lysB基因与已知分枝杆菌肌尾噬菌体lysB序列同源性为98.7%~99.1%;编码的氨基酸同源性为99%~100%,有酯酶保守的G-X-S-X-G基序,为研究LysB蛋白的生物学特性奠定了基础。 展开更多
关键词 分枝杆菌 肌尾噬菌体 lysB 基因克隆 序列分析
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紫萼玉簪皂苷的提取 被引量:2
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作者 曹岩 刘树英 +4 位作者 汪思远 刘继阳 孙叶迎 刘昕 刘洪章 《黑龙江农业科学》 2014年第4期107-110,共4页
为探讨紫萼玉簪皂苷提取的最优条件,采用单因素和正交试验(乙醇浓度、料液比、温度及超声时间)方法,研究最适紫萼玉簪皂苷提取条件。结果表明:最佳提取条件为乙醇浓度60%,料液比1∶15,温度70℃,超声时间50min。
关键词 紫萼玉簪 皂苷 单因素试验 正交试验
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复方中药体外抗霉菌及抑菌实验研究
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作者 王莘 王彬彬 +1 位作者 陈薇 王维 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期955-,共1页
关键词 抑菌实验 复方中药 阴道白色念珠菌 连续稀释法 最低抑菌浓度 抗菌作用 中药组方 琼脂稀释法 沙氏葡萄糖琼脂 液体培养基
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