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稳定表达NLRC5基因肝癌细胞株的建立
被引量:
1
1
作者
何莺华
徐涛
+4 位作者
倪明明
黄成
李娟
孟晓明
李俊
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2016年第1期5-8,共4页
目的建立起能够稳定表达NLRC5基因的肝癌Hep G2细胞株。方法设计遗传霉素(G418)的浓度梯度,通过对Hep G2细胞筛选最终确定筛选药物浓度。将构建好的人源p EGFP-C2-NLRC5重组质粒利用脂质体介导法转染至Hep G2肝癌细胞株中,用G418筛选出...
目的建立起能够稳定表达NLRC5基因的肝癌Hep G2细胞株。方法设计遗传霉素(G418)的浓度梯度,通过对Hep G2细胞筛选最终确定筛选药物浓度。将构建好的人源p EGFP-C2-NLRC5重组质粒利用脂质体介导法转染至Hep G2肝癌细胞株中,用G418筛选出耐药阳性克隆。通过免疫荧光技术观察绿色荧光蛋白稳定表达情况,Western blot法验证NLRC5蛋白表达情况。结果 G418在14 d内使Hep G2细胞全部死亡的最小浓度是300 ng/ml。用G418筛选瞬转p EGFP-C2-NLRC5 14 d在荧光显微镜下可见耐药克隆的形成。Western blot法检测显示,稳定过表达组NLRC5的蛋白水平比空质粒转染组高(t=15.356,P<0.05)。结论成功构建稳定表达NLRC5基因的肝癌细胞株,为进一步研究NLRC5基因在肝癌的体内实验奠定了基础。
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关键词
NLRC5
肝癌
稳定细胞株
HEPG2
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题名
稳定表达NLRC5基因肝癌细胞株的建立
被引量:
1
1
作者
何莺华
徐涛
倪明明
黄成
李娟
孟晓明
李俊
机构
安徽医科大学药学院
合肥瑶海区长淮街道社区卫生服务中心
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2016年第1期5-8,共4页
基金
国家自然科学基金(编号:81473268
81202978)
安徽省自然科学基金(编号:1308085MH145)
文摘
目的建立起能够稳定表达NLRC5基因的肝癌Hep G2细胞株。方法设计遗传霉素(G418)的浓度梯度,通过对Hep G2细胞筛选最终确定筛选药物浓度。将构建好的人源p EGFP-C2-NLRC5重组质粒利用脂质体介导法转染至Hep G2肝癌细胞株中,用G418筛选出耐药阳性克隆。通过免疫荧光技术观察绿色荧光蛋白稳定表达情况,Western blot法验证NLRC5蛋白表达情况。结果 G418在14 d内使Hep G2细胞全部死亡的最小浓度是300 ng/ml。用G418筛选瞬转p EGFP-C2-NLRC5 14 d在荧光显微镜下可见耐药克隆的形成。Western blot法检测显示,稳定过表达组NLRC5的蛋白水平比空质粒转染组高(t=15.356,P<0.05)。结论成功构建稳定表达NLRC5基因的肝癌细胞株,为进一步研究NLRC5基因在肝癌的体内实验奠定了基础。
关键词
NLRC5
肝癌
稳定细胞株
HEPG2
Keywords
NLRCS
liver cancer
stable cell line
HepG2
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
稳定表达NLRC5基因肝癌细胞株的建立
何莺华
徐涛
倪明明
黄成
李娟
孟晓明
李俊
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2016
1
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