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医学院校实验中心管理工作的思考 被引量:2
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作者 梁峰 徐群清 《实验室研究与探索》 CAS 2006年第2期262-263,共2页
主要介绍了该院科学实验中心的建立及其发展的一些基本情况,为少数民族地区的民族医学院校进一步加强科学实验室的管理提供一些借鉴的途径和方法。
关键词 高等院校 实验室 管理
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超声-酶法提取两面针中别隐品碱的工艺优选 被引量:3
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作者 陆世惠 陈冉 +2 位作者 卢红梅 林瑶 韦健全 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期457-461,共5页
以别隐品碱提取率为指标,先考察提取溶剂加酸和酶解预处理对两面针超声提取的适用性,再用正交试验优化超声功率、提取次数和溶剂量,最后动态过程优化超声提取时间。结果证明提取溶剂p H≤3不利于别隐品碱的提取。最佳工艺条件为:复合酶... 以别隐品碱提取率为指标,先考察提取溶剂加酸和酶解预处理对两面针超声提取的适用性,再用正交试验优化超声功率、提取次数和溶剂量,最后动态过程优化超声提取时间。结果证明提取溶剂p H≤3不利于别隐品碱的提取。最佳工艺条件为:复合酶预处理后,以体积分数60%乙醇超声(250 W)提取3次,第1次以7倍量溶剂提取18 min,第2次以3倍量溶剂提取12 min,第3次以2倍量溶剂提取12 min,别隐品碱提取率为89.5%。该工艺经济、高效、节能、省时,可为开发利用别隐品碱提供实验基础。 展开更多
关键词 两面针 别隐品碱 超声 酶法 工艺
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超声-酶法提取两面针中血根碱的工艺优选 被引量:1
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作者 陆世惠 陈冉 +2 位作者 林瑶 陈楠 朱晓莹 《医药导报》 CAS 2017年第2期193-196,共4页
目的优化超声-酶法提取两面针中血根碱的工艺条件。方法以高效液相色谱(HPLC)法测定血根碱提取率为指标,考察提取溶剂加酸和酶解预处理对两面针超声提取的适用性,正交实验优化超声功率、提取次数和溶剂量,最后动态过程优化超声提取时间... 目的优化超声-酶法提取两面针中血根碱的工艺条件。方法以高效液相色谱(HPLC)法测定血根碱提取率为指标,考察提取溶剂加酸和酶解预处理对两面针超声提取的适用性,正交实验优化超声功率、提取次数和溶剂量,最后动态过程优化超声提取时间。结果最佳工艺条件为:两面针复合酶预处理后,以体积分数40%乙醇(含盐酸0.2%)超声(250 W)提取3次,第1次以6倍量溶剂提取15 min,第2,3次各以3倍量溶剂提取12 min,血根碱提取率为88.6%。结论该提取工艺经济、高效、节能、省时,可为开发利用血根碱提供实验基础。 展开更多
关键词 两面针 血根碱 超声-酶法 提取工艺
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微波辅助提取芒果核多酚及其抑菌活性的研究 被引量:12
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作者 黄祉健 阮玉凤 +5 位作者 罗宝芳 苏妹芬 覃靖娟 谢彩军 黄锁义 朱晓莹 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期295-298,共4页
研究芒果核多酚微波辅助提取的最佳工艺,考察芒果核多酚提取液体外抑菌活性。采用单因素及正交实验,以芒果核多酚得率为指标,考察乙醇浓度、料液比、微波提取功率和提取时间对微波提取芒果核多酚得率的影响。采用滤纸圆片法考察芒果核... 研究芒果核多酚微波辅助提取的最佳工艺,考察芒果核多酚提取液体外抑菌活性。采用单因素及正交实验,以芒果核多酚得率为指标,考察乙醇浓度、料液比、微波提取功率和提取时间对微波提取芒果核多酚得率的影响。采用滤纸圆片法考察芒果核多酚抑菌活性。结果显示,芒果核多酚最佳微波提取工艺为:乙醇浓度60%,料液比1∶20(g/mL),微波功率340W,微波提取时间60s,在此条件下芒果核多酚得率为9.27%±0.54%。芒果核多酚提取物对受试菌均有一定的抑制作用,其中对表皮葡萄球菌的抑制作用较强。本文为进一步开发芒果核的利用价值提供了一定理论依据。 展开更多
关键词 芒果核多酚 微波辅助提取 抑菌活性
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Fractalkine通过激活Wnt/β-catenin信号通路抑制脂多糖诱导的巨噬细胞M1型极化 被引量:8
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作者 巩奇明 姜艳 +1 位作者 卢俊玲 尤燕舞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1726-1731,共6页
目的研究Fractalkine(CX3CL1,FKN)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞免疫应答的作用机制。方法体外培养RAW264.7细胞,使用慢病毒技术构建过表达FKN的稳定细胞珠。细胞分为8组:(1)空白对照组;(2)LPS组,细胞给予脂多糖(1μg/mL,12 h);(... 目的研究Fractalkine(CX3CL1,FKN)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞免疫应答的作用机制。方法体外培养RAW264.7细胞,使用慢病毒技术构建过表达FKN的稳定细胞珠。细胞分为8组:(1)空白对照组;(2)LPS组,细胞给予脂多糖(1μg/mL,12 h);(3)ICG-001组,细胞给与Wnt/β-catenin信号通路抑制剂ICG-001(10μmol/mL,48 h);(4)过表达FKN组;(5)ICG-001+LPS组,细胞给与ICG-001(10μmol/mL预处理36 h)后,加入脂多糖(1μg/mL,12 h);(6)过表达FKN+LPS组,过表达FKN细胞给与脂多糖(1μg/mL,12 h);(7)过表达FKN+ICG-001组,过表达FKN细胞给予ICG-001(10μmol/mL,48 h);(8)过表达FKN+ICG-001+LPS组,过表达FKN细胞给与ICG-001(10μmol/mL预处理36 h)后,加入脂多糖(1μg/mL,12 h);应用CCK-8细胞增殖实验检测ICG-001作用于巨噬细胞中的安全浓度;应用酶联免疫吸附(ELISA)实验检测巨噬细胞上清液中M1型极化因子TNF-α和IL-6的含量;应用蛋白质免疫印记(WB)实验检测巨噬细胞中FKN、Wnt/β-catenin通路关键因子Wnt-4和β-catenin、M1型极化因子iNOS、TNF-α和IL-6的蛋白表达水平;应用免疫荧光(IF)实验检测巨噬细胞中M1型极化因子IL-6蛋白的定位。结果过表达FKN的RAW264.7细胞中FKN的蛋白水平较空白对照组明显升高(P<0.01)。CCK-8实验显示ICG-001作用于RAW264.7细胞48 h的IC50为10μmol/mL。与LPS组相比,ICG-001+LPS组上清液中TNF-α和IL-6的分泌量以及细胞内TNF-α、IL-6和iNOS蛋白含量均升高(P<0.05),而细胞内FKN、Wnt-4和β-catenin蛋白含量均显著降低(P<0.01);EXFKN+LPS组上清液中TNF-α和IL-6的分泌量以及细胞内TNF-α、IL-6和iNOS蛋白含量均显著降低(P<0.01),而细胞内FKN、Wnt-4和β-catenin蛋白含量均显著升高(P<0.01)。与LPS组相比,ICG-001+LPS组中IL-6在细胞质中的定位增强,而EXFKN+LPS组中IL-6在细胞质中的定位受到抑制。结论过表达FKN通过激活Wnt/β-catenin信号通路抑制脂多糖诱导的巨噬细胞M1型极化。 展开更多
关键词 巨噬细胞 极化 FRACTALKINE WNT/Β-CATENIN信号通路
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血管紧张素Ⅱ通过上调富含半胱氨酸蛋白61表达诱导HEK293T细胞凋亡 被引量:4
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作者 王俊杰 姜艳 +2 位作者 Soulixay Senouthai 付冬冬 尤燕舞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期810-815,共6页
目的探讨富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导HEK293细胞功能中的改变及作用。方法HEK293T细胞于体外培养,并应用CRISPR/Cas9技术敲低HEK293T细胞Cyr61基因。将细胞分为四组:(1)对照组;(2)Cyr61敲低组;(3)AngⅡ组;(4)An... 目的探讨富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导HEK293细胞功能中的改变及作用。方法HEK293T细胞于体外培养,并应用CRISPR/Cas9技术敲低HEK293T细胞Cyr61基因。将细胞分为四组:(1)对照组;(2)Cyr61敲低组;(3)AngⅡ组;(4)AngⅡ+Cyr61敲低组,以10-7mol/L AngⅡ处理细胞,48 h收集细胞用流式细胞仪检测细胞凋亡,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术及蛋白质免疫印迹技术检测细胞Cyr61及Bcl-2的mRNA及蛋白表达量。结果 Cyr61敲低组Cyr61蛋白水平较正常对照组明显下降(P<0.05),AngⅡ干预48 h后Cyr61蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白和mRNA表达水平明显下降(P<0.05),敲低Cyr61后Bcl-2蛋白和mRNA表达水平明显升高(P<0.05),与对照组凋亡率(11.88±1.46)%相比,Cyr61敲低组凋亡率为(3.87±0. 83)%,AngⅡ干预组HEK293T细胞凋亡率为(26.94±3.73)%(P<0.05),与AngⅡ干预组相比,Cyr61敲低+AngⅡ组凋亡率为(15.76±1.31)%(P<0.05)。结论 Cyr61表达量的上调与AngⅡ诱导的HEK293T细胞损伤有关,下调Cyr61的表达可以有效地保护AngⅡ诱导的细胞损伤。 展开更多
关键词 HEK293T细胞 CRISPR/Cas9 CYR61 AngⅡ 凋亡
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产酸克雷伯氏菌乳酸脱氢酶基因敲除提高2,3-丁二醇产量 被引量:3
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作者 叶广彬 银联飞 +3 位作者 王长丽 孙珊珊 杨睿睿 葛菁萍 《中国酿造》 CAS 北大核心 2020年第11期158-162,共5页
乳酸脱氢酶(LDH)是乳酸生成途径中的关键酶,敲除乳酸脱氢酶基因,理论上可以减少甚至消除乳酸的产生,提高2,3-丁二醇的产量和得率。该研究采用体外拼接方式构建乳酸脱氢酶基因的同源线性片段ldhL-Cmr-ldhR,将其电转化至Klebisella oxytoc... 乳酸脱氢酶(LDH)是乳酸生成途径中的关键酶,敲除乳酸脱氢酶基因,理论上可以减少甚至消除乳酸的产生,提高2,3-丁二醇的产量和得率。该研究采用体外拼接方式构建乳酸脱氢酶基因的同源线性片段ldhL-Cmr-ldhR,将其电转化至Klebisella oxytoca HD79中,通过Red同源重组技术筛选敲除成功的重组菌株,经聚合酶链式反应(PCR)、荧光定量-聚合酶链式反应(FQ-PCR)及2,3-丁二醇产量检测验证。结果表明,重组菌株2,3-丁二醇产量为40.20 g/L、转化率为0.38 g/g和生产强度为0.48 g/(L·h),相比供试菌株分别提高了26.8%、11.8%和45.5%;而乳酸产量则由4.83 g/L下降至2.45 g/L,相比供试菌株降低了49.3%。该实验为后续进一步提高2,3-丁二醇的产量和扩大菌株选择范围奠定基础。 展开更多
关键词 产酸克雷伯氏菌 乳酸脱氢酶 基因敲除 2 3-丁二醇 产量
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CX3CL1/fractalkine通过激活Wnt/β-catenin信号通路抑制脂多糖诱导的小鼠RAW264.7细胞凋亡 被引量:2
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作者 巩奇明 姜艳 +1 位作者 潘秀虹 尤燕舞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期110-115,共6页
目的 研究CX3C趋化因子配体1(CX3CL1/FKN)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞凋亡的机制。方法 用含红色荧光蛋白的过表达或敲低FKN的慢病毒质粒感染以及LPS处理小鼠RAW264.7巨噬细胞;使用流式细胞术检测RAW264.7细胞凋亡,Western... 目的 研究CX3C趋化因子配体1(CX3CL1/FKN)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞凋亡的机制。方法 用含红色荧光蛋白的过表达或敲低FKN的慢病毒质粒感染以及LPS处理小鼠RAW264.7巨噬细胞;使用流式细胞术检测RAW264.7细胞凋亡,Western blot法检测RAW264.7细胞FKN、 Wnt4、β联蛋白(β-catenin)、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、 c-caspase-9、 B细胞淋巴瘤因子2相关X蛋白(BAX)和细胞色素C(CytC)的蛋白水平,免疫荧光细胞化学染色检测c-caspase-3和c-caspase-9在RAW264.7细胞的表达和定位。结果 与空白对照组相比,LPS组的细胞凋亡率,FKN、 Wnt4、β-catenin、 c-caspase-3、 c-caspase-9、 BAX和CytC蛋白含量明显升高;与LPS组相比,FKN过表达联合LPS组细胞凋亡率明显下降,FKN、 Wnt4、β-catenin蛋白含量增加,而c-caspase-3、 c-caspase-9、 BAX和CytC蛋白含量降低,c-caspase-3和c-caspase-9在细胞质中的定位减弱;FKN敲低联合LPS组则结果相反。结论 CX3CL1/FKN激活Wnt/β-catenin信号通路减少线粒体凋亡途径关键蛋白的表达减轻LPS诱导的RAW264.7细胞凋亡。 展开更多
关键词 CX3C趋化因子配体1(CX3CL1/FKN) 巨噬细胞 细胞凋亡 Wnt β联蛋白(β-catenin)
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