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抑制lncRNA LUCAT1表达通过靶向调控miR-204-3p减轻高糖诱导的心肌H9c2细胞损伤
被引量：
8
1
作者
陈婉斐
泮慧俐
+1 位作者
李珍珍
卢慧琴
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第10期1761-1768,共8页
目的:探讨敲减长链非编码RNA肺癌相关转录本1(LUCAT1)表达减轻高糖(HG)诱导的心肌H9c2细胞损伤是否与其靶向调控微小RNA-204-3p(miR-204-3p)表达有关。方法:将体外培养的大鼠心肌H9c2细胞分为对照组、HG组、HG+siRNA-NC组、HG+siRNA-LUC...
目的:探讨敲减长链非编码RNA肺癌相关转录本1(LUCAT1)表达减轻高糖(HG)诱导的心肌H9c2细胞损伤是否与其靶向调控微小RNA-204-3p(miR-204-3p)表达有关。方法:将体外培养的大鼠心肌H9c2细胞分为对照组、HG组、HG+siRNA-NC组、HG+siRNA-LUCAT1组、HG+siRNA-LUCAT1+inhibitor-NC组和HG+siR⁃NA-LUCAT1+miR-204-3p inhibitor组,采用生物信息学软件预测和双萤光素酶报告基因实验验证LUCAT1和miR-204-3p的靶向关系,RT-qPCR法检测细胞中LUCAT1和miR-204-3p的表达水平,CCK-8实验检测细胞活力,乳酸脱氨酶(LDH)试剂盒检测LDH漏出量,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平,比色法检测超氧化物岐化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:生物信息学软件预测到LUCAT1和miR-204-3p之间存在互补的结合位点,双萤光素酶报告基因实验证实LUCAT1可与miR-204-3p靶向结合。与对照组比较,HG刺激后H9c2细胞中LUCAT1表达水平、LDH漏出量、细胞凋亡率、细胞中Bax蛋白表达水平和MDA含量均明显升高,而细胞中miR-204-3p表达水平、细胞活力、细胞中Bcl-2蛋白的表达水平及SOD和GSH-Px活性均明显降低(P<0.05)。与HG组比较,转染siRNA-LUCAT1可明显逆转HG引起的上述变化(P<0.05),但转染siRNA-NC对H9c2细胞无明显影响(P>0.05);与HG+siRNA-LUCAT1组比较,转染inhibitor-NC后H9c2细胞各指标无明显改变(P>0.05),但转染miR-204-3p inhibitor可明显逆转siRNA-LUCAT1对H9c2细胞的作用(P<0.05)。结论:抑制LUCAT1表达可通过靶向调控miR-204-3p表达抑制心肌H9c2细胞的凋亡和氧化应激,减轻HG诱导的心肌H9c2细胞损伤。
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关键词
心肌细胞
长链非编码RNA
肺癌相关转录本1
细胞凋亡
氧化应激
微小RNA-204-3p
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题名
抑制lncRNA LUCAT1表达通过靶向调控miR-204-3p减轻高糖诱导的心肌H9c2细胞损伤
被引量：
8
1
作者
陈婉斐
泮慧俐
李珍珍
卢慧琴
机构
台州市中心医院心血管内科
台州市
第一人民
医院
新生儿科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第10期1761-1768,共8页
基金
浙江省卫生适宜技术成果转化计划(No.s201231341)。
文摘
目的:探讨敲减长链非编码RNA肺癌相关转录本1(LUCAT1)表达减轻高糖(HG)诱导的心肌H9c2细胞损伤是否与其靶向调控微小RNA-204-3p(miR-204-3p)表达有关。方法:将体外培养的大鼠心肌H9c2细胞分为对照组、HG组、HG+siRNA-NC组、HG+siRNA-LUCAT1组、HG+siRNA-LUCAT1+inhibitor-NC组和HG+siR⁃NA-LUCAT1+miR-204-3p inhibitor组,采用生物信息学软件预测和双萤光素酶报告基因实验验证LUCAT1和miR-204-3p的靶向关系,RT-qPCR法检测细胞中LUCAT1和miR-204-3p的表达水平,CCK-8实验检测细胞活力,乳酸脱氨酶(LDH)试剂盒检测LDH漏出量,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平,比色法检测超氧化物岐化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:生物信息学软件预测到LUCAT1和miR-204-3p之间存在互补的结合位点,双萤光素酶报告基因实验证实LUCAT1可与miR-204-3p靶向结合。与对照组比较,HG刺激后H9c2细胞中LUCAT1表达水平、LDH漏出量、细胞凋亡率、细胞中Bax蛋白表达水平和MDA含量均明显升高,而细胞中miR-204-3p表达水平、细胞活力、细胞中Bcl-2蛋白的表达水平及SOD和GSH-Px活性均明显降低(P<0.05)。与HG组比较,转染siRNA-LUCAT1可明显逆转HG引起的上述变化(P<0.05),但转染siRNA-NC对H9c2细胞无明显影响(P>0.05);与HG+siRNA-LUCAT1组比较,转染inhibitor-NC后H9c2细胞各指标无明显改变(P>0.05),但转染miR-204-3p inhibitor可明显逆转siRNA-LUCAT1对H9c2细胞的作用(P<0.05)。结论:抑制LUCAT1表达可通过靶向调控miR-204-3p表达抑制心肌H9c2细胞的凋亡和氧化应激,减轻HG诱导的心肌H9c2细胞损伤。
关键词
心肌细胞
长链非编码RNA
肺癌相关转录本1
细胞凋亡
氧化应激
微小RNA-204-3p
Keywords
Cardiomyocytes
Long noncoding RNA
Lung cancer-associated transcript 1
Apoptosis
Oxida⁃tive stress
MicroRNA-204-3p
分类号
R587.2 [医药卫生—内分泌]
R363.2 [医药卫生—病理学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抑制lncRNA LUCAT1表达通过靶向调控miR-204-3p减轻高糖诱导的心肌H9c2细胞损伤
陈婉斐
泮慧俐
李珍珍
卢慧琴
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
8
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