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H7亚型禽流感病毒HA基因的原核表达及表达产物的反应原性分析
1
作者
董斌
陈海超
+7 位作者
杨伦
耿文学
熊晓妍
孙兴臣
李敏婕
陈闻
蒋家森
许家荣
《江苏农业科学》
北大核心
2016年第10期49-49,50,51,52,共4页
为构建新型H7亚型禽流感HA基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。从NCBI数据库下载H7亚型禽流感HA全基因序列,合成HA基因;定向克隆到原核表达载体p ET-32a(+)的多克隆位点中,构建重组原核表达质粒p ET-32a(+)-HA;转化入大肠杆菌B...
为构建新型H7亚型禽流感HA基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。从NCBI数据库下载H7亚型禽流感HA全基因序列,合成HA基因;定向克隆到原核表达载体p ET-32a(+)的多克隆位点中,构建重组原核表达质粒p ET-32a(+)-HA;转化入大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot法鉴定。结果显示,重组质粒经双酶切及基因测序鉴定构建正确;重组的HA融合蛋白约为84 ku,大小与预期融合蛋白大小一致;重组HA融合蛋白可以与His标签单克隆抗体特异性结合,与H7阳性血清有较强的反应原性。成功构建了HA基因原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中获得重组HA融合蛋白表达。
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关键词
H7N9禽流感病毒
HA基因
pET32a(+)
原核表达
反应原性分析
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职称材料
题名
H7亚型禽流感病毒HA基因的原核表达及表达产物的反应原性分析
1
作者
董斌
陈海超
杨伦
耿文学
熊晓妍
孙兴臣
李敏婕
陈闻
蒋家森
许家荣
机构
南京
农业
大学
南京千里光生物技术
有限公司
江苏省
句容市
科兴养殖基地
句容市浩源农业科技有限公司
出处
《江苏农业科学》
北大核心
2016年第10期49-49,50,51,52,共4页
基金
江苏省句容市科委项目(编号:NY2013029)
江苏省镇江市农业科技支撑项目(编号:SBK2014022021)
+2 种基金
南京农业大学教改项目(编号:2013Y021)
南京农业大学动物医学院教育教学改革研究项目
江苏高校优势学科建设工程资助项目
文摘
为构建新型H7亚型禽流感HA基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。从NCBI数据库下载H7亚型禽流感HA全基因序列,合成HA基因;定向克隆到原核表达载体p ET-32a(+)的多克隆位点中,构建重组原核表达质粒p ET-32a(+)-HA;转化入大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot法鉴定。结果显示,重组质粒经双酶切及基因测序鉴定构建正确;重组的HA融合蛋白约为84 ku,大小与预期融合蛋白大小一致;重组HA融合蛋白可以与His标签单克隆抗体特异性结合,与H7阳性血清有较强的反应原性。成功构建了HA基因原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中获得重组HA融合蛋白表达。
关键词
H7N9禽流感病毒
HA基因
pET32a(+)
原核表达
反应原性分析
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
H7亚型禽流感病毒HA基因的原核表达及表达产物的反应原性分析
董斌
陈海超
杨伦
耿文学
熊晓妍
孙兴臣
李敏婕
陈闻
蒋家森
许家荣
《江苏农业科学》
北大核心
2016
0
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