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高效液相色谱法测定甘蔗节间果糖、葡萄糖和蔗糖的含量 被引量:30
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作者 逯平杰 代容春 +4 位作者 叶冰莹 林荣华 何文锦 陈由强 陈如凯 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第2期198-200,共3页
研究高效液相色谱(HPLC)示差折光检测法测定甘蔗节间糖含量,建立一种简便、快速和准确可靠的,能同时测定果糖、葡萄糖、蔗糖含量的高效液相色谱法。HPLC方法采用Agilent Zorbaxcarbohydrate柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水(7... 研究高效液相色谱(HPLC)示差折光检测法测定甘蔗节间糖含量,建立一种简便、快速和准确可靠的,能同时测定果糖、葡萄糖、蔗糖含量的高效液相色谱法。HPLC方法采用Agilent Zorbaxcarbohydrate柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水(75:25,V/V),流速1.0mL/min,柱温30℃,检测器温度35℃。该法相对标准偏差(RSD)为0.82%~0.87%(n=5),加标回收率为97.84%~99.12%,糖类质量浓度在0.625~20mg/mL内呈现良好的线性关系,相关系数在0.9982(n=6)以上。采用本法测定两种甘蔗品种不同时期、不同节间糖含量,均获得满意结果。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 甘蔗节间 果糖 葡萄糖 蔗糖
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高温大曲中产耐热性蛋白酶芽孢杆菌的筛选和鉴定 被引量:22
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作者 马校卫 颜林春 +2 位作者 汤二将 龚丽琼 黄祖新 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期169-173,共5页
从高温大曲样品中通过分离纯化,在牛奶琼脂平板上初筛得到产耐热性蛋白酶的菌株,然后液体发酵培养测定蛋白酶酶活挑选出产酶较强的菌株A1。在经过菌株形态特征、生化鉴定、16SrDNA分子生物学鉴定为芽孢杆菌属苏云金芽孢杆菌(Bacillus th... 从高温大曲样品中通过分离纯化,在牛奶琼脂平板上初筛得到产耐热性蛋白酶的菌株,然后液体发酵培养测定蛋白酶酶活挑选出产酶较强的菌株A1。在经过菌株形态特征、生化鉴定、16SrDNA分子生物学鉴定为芽孢杆菌属苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)。选择三个主要影响因子葡萄糖、酵母浸出粉和pH,运用响应面法优化发酵培养基,最佳产酶培养基为pH为8.4,葡萄糖添加量为1.092%,酵母浸出粉添加量为0.902%,最佳酶活力为142.81u/mL。测定蛋白酶酶作用的最适温度是61℃,且在55~70℃之间有较高的酶活力,60℃相对酶活为97.63%。 展开更多
关键词 高温大曲 苏云金芽孢杆菌 蛋白酶 16SrDNA 响应面法
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甘蔗UGPase5'侧翼序列克隆及缺失表达分析 被引量:1
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作者 叶冰莹 王婷 +2 位作者 何文锦 邱思 陈由强 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期62-67,共6页
以甘蔗(FN95;-1702)为材料,通过接头连接PCR方法克隆该基因不同长度5'侧翼序列。将不同长度的5'侧翼序列连同UGPase基因的外显子片段定向插入到GUS基因上游,在保证其后GUS编码框不发生偏移的情况下,插入的UGPase外显子融合GUS... 以甘蔗(FN95;-1702)为材料,通过接头连接PCR方法克隆该基因不同长度5'侧翼序列。将不同长度的5'侧翼序列连同UGPase基因的外显子片段定向插入到GUS基因上游,在保证其后GUS编码框不发生偏移的情况下,插入的UGPase外显子融合GUS表达成为新的报告基因。根据此策略,构建了一系列表达结构为5'Flanking Sequence-UGPase Exon-GUS-Nos polyA的5'侧翼序列缺失表达载体,进行启动子活性分析。注射法转染烟草叶片组织检测GUS瞬时表达,分析结果表明,所克隆到的UGPase基因5'端侧翼序列不具有启动子活性。 展开更多
关键词 5’侧翼序列 缺失表达 甘蔗 UGPASE
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转录因子NAC的研究进展 被引量:3
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作者 何炜 叶冰莹 +2 位作者 周平 陈由强 陈如凯 《亚热带农业研究》 2008年第4期311-315,共5页
NAC转录因子是植物所特有的一类转录因子,并广泛存在于不同的植物中。从NAC发现至今经过十几年的时间,NAC转录因子的结构和功能得到了较深入的研究。本文介绍了NAC家族的分类,NAC结构域蛋白的特点,NAC的生物学功能及其与植物的生长发育... NAC转录因子是植物所特有的一类转录因子,并广泛存在于不同的植物中。从NAC发现至今经过十几年的时间,NAC转录因子的结构和功能得到了较深入的研究。本文介绍了NAC家族的分类,NAC结构域蛋白的特点,NAC的生物学功能及其与植物的生长发育、抗性之间的关系。 展开更多
关键词 NAC转录因子 生物学功能 研究前景
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马尾松银松素合酶基因启动子区的克隆及特征分析 被引量:2
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作者 王冰梅 郭晋隆 +2 位作者 叶冰莹 许莉萍 陈由强 《亚热带农业研究》 2008年第4期292-296,共5页
银松素合酶(pinosylvin synthase,PS)是合成银松素类植物抗毒素的关键酶。本文根据前期工作所获得的PS基因序列,设计基因特异引物,利用连接介导的染色体步行技术,从马尾松总基因组中扩增PS基因上游的启动子区;通过PLAN-CARE等分析软件对... 银松素合酶(pinosylvin synthase,PS)是合成银松素类植物抗毒素的关键酶。本文根据前期工作所获得的PS基因序列,设计基因特异引物,利用连接介导的染色体步行技术,从马尾松总基因组中扩增PS基因上游的启动子区;通过PLAN-CARE等分析软件对5′侧翼区近700 bp进行启动子特征分析,预测启动子区调控元件。结果表明,在翻译起始密码子上游167 nt处可能存在TATA-box。此外还发现3个GATA-box(-260 nt、-295 nt、-386 nt和-295 nt)和若干个TGAC-like序列。 展开更多
关键词 银松素合酶 基因克隆 染色体步行 启动子分析
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甘蔗丝氨酸/苏氨酸激酶基因的克隆及序列分析 被引量:1
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作者 陈玲 叶冰莹 +3 位作者 黄贞杰 张积森 陈由强 陈如凯 《亚热带农业研究》 2012年第3期194-198,共5页
以福农28甘蔗品种为实验材料,电子克隆设计引物,克隆得到了甘蔗丝氨酸/苏氨酸激酶(serine/threonine kinase,STK)基因的cDNA片段。采用RACE技术克隆获得了甘蔗叶STK基因cDNA的5'及3'端序列,长度分别为750和1000bp。5'、3&#... 以福农28甘蔗品种为实验材料,电子克隆设计引物,克隆得到了甘蔗丝氨酸/苏氨酸激酶(serine/threonine kinase,STK)基因的cDNA片段。采用RACE技术克隆获得了甘蔗叶STK基因cDNA的5'及3'端序列,长度分别为750和1000bp。5'、3'端序列与中间片段重叠延伸后总片段长为1133 bp,其中5'UTR为54 bp,3'UTR为254 bp,包含完整的ORF为825 bp,共编码274个氨基酸。开放阅读框架查询器(Open Reading Frame Finder)确定其为丝氨酸/苏氨酸激酶,通过预测(//cn.expasy.org/tools)该蛋白质分子质量为29.9052 ku,理论等电点为6.36。将其基因序列与NCBI中其他植物的STK进行比对,与高粱、玉米、水稻、短柄草和大麦的相似性分别为97%、94%、89%、89%和88%。 展开更多
关键词 甘蔗 丝氨酸 苏氨酸激酶 基因克隆 电子克隆 序列分析
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白藜芦醇合酶基因在花生根中的特异表达
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作者 黄国强 叶冰莹 +2 位作者 董倩 陈由强 陈如凯 《花生学报》 2008年第4期1-5,共5页
利用花生白藜芦醇合酶基因特异片段,体外合成带地高辛标记的正、反义RNA探针;并与花生根的组织切片进行RNA原位杂交。结果表明,该基因的转录表达在根的韧皮部,其他组织中未见表达;酵母浸提液处理可使该基因的转录表达明显增强。
关键词 花生 白藜芦醇合酶 基因表达 原位杂交
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Cre/loxP系统介导删除酿酒酵母ALD_4基因研究
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作者 曹罗元 叶冰莹 +2 位作者 张积森 陈由强 陈如凯 《中国酿造》 CAS 北大核心 2009年第3期20-24,共5页
设计与酿酒酵母编码乙醛脱氢酶ALD4基因ORF两侧序列同源的删除组件引物,以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Kanr选择标记的删除组件。通过醋酸锂转化法将删除组件导入酿酒酵母菌,采用G418筛选阳性克隆子,将质粒pSH65转入阳性克隆子。半乳... 设计与酿酒酵母编码乙醛脱氢酶ALD4基因ORF两侧序列同源的删除组件引物,以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Kanr选择标记的删除组件。通过醋酸锂转化法将删除组件导入酿酒酵母菌,采用G418筛选阳性克隆子,将质粒pSH65转入阳性克隆子。半乳糖诱导pSH65表达Cre酶切除Kanr基因,在ALD4基因ORF处留下1个loxP位点,通过2次的转化筛选验证获得ALD4双倍体基因缺陷型突变株Y01-ALD4。 展开更多
关键词 酿酒酵母 乙醛脱氢酶 ALD4 基因删除
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