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Pygo2过表达促进大鼠胶质瘤C6细胞增殖 被引量：4
1
作者 陈玉英 王海东 +3 位作者 王占祥 谭国伟 刘希尧 沈上杭 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期413-417,共5页
目的通过构建过表达Pygo2的重组体上调Pygo2表达,探讨其在大鼠胶质瘤C6细胞增殖中的作用及机制。方法重组体经EcoR I和HindⅢ双酶切鉴定和DNA测序后,用脂质体2000将其转染大鼠胶质瘤C6细胞,采用Western blot检测外源Pygo2蛋白表达,应用... 目的通过构建过表达Pygo2的重组体上调Pygo2表达,探讨其在大鼠胶质瘤C6细胞增殖中的作用及机制。方法重组体经EcoR I和HindⅢ双酶切鉴定和DNA测序后,用脂质体2000将其转染大鼠胶质瘤C6细胞,采用Western blot检测外源Pygo2蛋白表达,应用克隆形成实验和MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,采用Western blot检测过表达Pygo2对C6细胞中cyclinD1、β-catenin水平的影响,并采用细胞免疫荧光法检测其对C6细胞中cyclinD1、β-catenin亚细胞定位的影响。结果双酶切和测序鉴定结果证实插入序列正确,重组体能有效上调Pygo2表达。将重组体转染C6细胞上调Pygo2表达后,细胞的生长增殖被显著促进,克隆形成显著增多,细胞周期进程从G1期至S期转变显著增强;且cyclinD1水平随之增高,亚定位无改变,β-catenin水平和亚细胞定位无明显改变。结论成功构建了过表达Pygo2的重组体,过表达Pygo2通过增高cyclinD1水平,促进细胞从G1期进入S期,从而促进大鼠胶质瘤C6细胞增殖。 展开更多
关键词 PYGO2 胶质瘤 细胞增殖 CYCLIND1
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组织变革背景下护士长工作体验的质性研究 被引量：6
2
作者 黄华玲 朱海华 +1 位作者 杨银玲 陈愔愔 《护理学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第18期51-53,共3页
目的探讨组织变革背景下护士长的工作体验,为医院管理者对护士长进行针对性管理提供依据。方法采取质性研究中的现象学研究法,以面对面、半结构式访谈方式对10名护士长进行深度访谈,运用Colaizzi 7步分析法形成主题。结果提炼出5个主题... 目的探讨组织变革背景下护士长的工作体验,为医院管理者对护士长进行针对性管理提供依据。方法采取质性研究中的现象学研究法,以面对面、半结构式访谈方式对10名护士长进行深度访谈,运用Colaizzi 7步分析法形成主题。结果提炼出5个主题:管理工作更加系统化、规范化;适应性调整管理方法;管理压力较大;工作家庭冲突明显;支持需求明确。结论医院管理者应重视组织变革给护士长管理带来的工作压力和挑战,帮助护士长积极寻求减轻工作压力的有效方式,提高管理效率和效益。 展开更多
关键词 护士长 组织变革 管理压力 工作家庭冲突 工作体验 质性研究
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下调Pygo2抑制脑胶质瘤U251细胞增殖、侵袭及其cyclin D1的表达 被引量：2
3
作者 陈玉英 王海东 +3 位作者 王占祥 刘希尧 谭国伟 沈上杭 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期128-133,共6页
目的构建RNA干扰(RNAi)重组体抑制Pygo2的表达,并探讨其对脑胶质瘤U251细胞增殖、侵袭的影响及其机制。方法针对Pygo2cDNA序列设计并合成一对特异性的含有短发卡的寡核苷酸序列及其阴性对照序列,经退火后插入pSuper中构建重组体。经Eco... 目的构建RNA干扰(RNAi)重组体抑制Pygo2的表达,并探讨其对脑胶质瘤U251细胞增殖、侵袭的影响及其机制。方法针对Pygo2cDNA序列设计并合成一对特异性的含有短发卡的寡核苷酸序列及其阴性对照序列,经退火后插入pSuper中构建重组体。经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定和DNA测序后,用脂质体2000将其转染脑胶质瘤U251细胞,采用实时定量PCR和蛋白质印迹方法检测Pygo2shRNA对U251细胞Pygo2mRNA和蛋白表达的干扰效果,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期分布,BrdU掺入法检测DNA合成,Transwell检测细胞侵袭。采用蛋白质印迹和免疫荧光法检测Pygo2shRNA对U251细胞cyclin D1、β-catenin蛋白水平和亚细胞定位的影响。结果双酶切和测序鉴定证实插入序列完全正确;Pygo2shRNA显著抑制了U251细胞Pygo2mRNA和蛋白的表达;Pygo2shRNA抑制U251细胞Pygo2表达后,细胞增殖显著降低,细胞更多地阻滞在G1期,且BrdU掺入显著减少,侵袭细胞数显著减少。此外,抑制Pygo2表达可显著下调U251细胞cyclin D1的表达但不改变其亚细胞定位。U251细胞β-catenin表达及其亚细胞定位无明显改变。结论成功构建了抑制Pygo2表达的重组载体。抑制Pygo2表达能有效地抑制脑胶质瘤U251细胞DNA合成,可能通过下调Wnt信号靶基因cyclin D1的表达,使细胞阻滞于G1期而抑制细胞增殖和侵袭。 展开更多
关键词 PYGO2 胶质瘤 细胞增殖 短发夹RNA
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Pygo2在脑胶质瘤组织和细胞的表达及临床意义 被引量：3
4
作者 王海东 陈玉英 +3 位作者 王占祥 刘希尧 谭国伟 沈上杭 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期75-78,共4页
目的:检测Pygo2在脑胶质瘤组织和细胞中的表达,并探讨其临床意义。方法:采用RT-PCR检测5种胶质瘤细胞株Pygo2 mRNA表达,Real-time PCR检测67例Ⅱ～Ⅳ级脑胶质瘤组织中Pygo2 mRNA表达,免疫组织化学SP法检测80例脑胶质瘤组织中Pygo2的蛋... 目的:检测Pygo2在脑胶质瘤组织和细胞中的表达,并探讨其临床意义。方法:采用RT-PCR检测5种胶质瘤细胞株Pygo2 mRNA表达,Real-time PCR检测67例Ⅱ～Ⅳ级脑胶质瘤组织中Pygo2 mRNA表达,免疫组织化学SP法检测80例脑胶质瘤组织中Pygo2的蛋白表达。结果:Pygo2 mRNA在5种胶质瘤细胞株中均有表达,其中U251细胞中最高,C6细胞中最低。Pygo2mRNA在正常脑组织中表达极低,而在脑胶质瘤Ⅱ～Ⅳ级表达显著增高,且Pygo2 mRNA表达随肿瘤分级的增高而显著增强(P<0.05)。Pygo2在脑胶质瘤组织细胞中定位于胞核,在正常脑组织中表达呈阴性,而在脑胶质瘤组织中约有65.0%阳性表达,两者差异显著(P<0.01)。Pygo2表达Ⅱ级(WHOⅡ)中低,Ⅳ级(WHOⅣ)中高。Pygo2在脑胶质瘤Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级中表达阳性率分别是5/13(38.5%)、12/26(46.2%)、15/19(78.9%)、20/22(90.9%),Pygo2蛋白表达与肿瘤分级密切相关(P<0.01)。此外,Pygo2蛋白表达水平与患者的性别、年龄均无显著性差异(P>0.05)。结论:Pygo2在正常脑组织中呈阴性,在脑胶质瘤组织和细胞中均高表达,且在组织中其表达随胶质瘤级别增高而显著增强,提示Pygo2可能在脑胶质瘤的发生、恶性演进中起了重要作用。 展开更多
关键词 Pygopus2 REAL-TIME PCR脑胶质瘤表达
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脑胶质瘤的被动免疫治疗 被引量：6
5
作者 徐昊 王占祥 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第20期1295-1298,共4页
脑胶质瘤是颅内发生率最高的原发性中枢神经系统肿瘤。目前临床上多采用手术治疗与放化疗结合的治疗方法,但效果不理想。近年来免疫治疗,尤其是被动免疫治疗凭借其独特的优势被应用于胶质瘤的辅助治疗,显示出了巨大的潜能。本文综述了... 脑胶质瘤是颅内发生率最高的原发性中枢神经系统肿瘤。目前临床上多采用手术治疗与放化疗结合的治疗方法,但效果不理想。近年来免疫治疗,尤其是被动免疫治疗凭借其独特的优势被应用于胶质瘤的辅助治疗,显示出了巨大的潜能。本文综述了近年来国内外被动免疫治疗应用于脑胶质瘤的现状和发展方向。 展开更多
关键词 胶质瘤 免疫治疗 被动免疫
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侧脑室内促肝细胞生长素对脑积水大鼠的干预作用 被引量：2
6
作者 张绍林 刘锋 +4 位作者 王占祥 刘希尧 朱宏伟 沈上杭 徐昊 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期513-518,共6页
目的研究促肝细胞生长素(hepatocyte growth promoting factors,pHGF)对脑积水大鼠模型的干预作用,并探讨其可能的作用机制。方法雄性SD大鼠40只随机分成两组:pHGF干预组(实验组)和生理盐水干预组(对照组),每组20只。3%高岭土混悬液侧... 目的研究促肝细胞生长素(hepatocyte growth promoting factors,pHGF)对脑积水大鼠模型的干预作用,并探讨其可能的作用机制。方法雄性SD大鼠40只随机分成两组:pHGF干预组(实验组)和生理盐水干预组(对照组),每组20只。3%高岭土混悬液侧脑室缓慢注射制作脑积水模型,同时采用植入式胶囊渗透压泵对大鼠侧脑室分别持续缓慢灌注pHGF或0.9%氯化钠进行持续干预。术后第11天行Morris水迷宫实验,第16天行MRI检查,处死动物,收集脑组织标本,RT-PCR和免疫组化检测转化生长因子β1(transforming growth foctor beta 1,TGF-β1)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在脑组织中表达。结果MRI示实验组形成的脑积水相对较轻,侧脑室指数(0.47625±0.14116)与对照组(0.61325±0.11691)相比较,差异有统计学意义(t=3.205,P<0.05);水迷宫实验显示实验组大鼠空间学习记忆能力强于对照组;RT-PCR结果示pHGF能明显抑制脑组织中TGF-β1基因(t=22.359,P<0.05),而促进HGF和MMP-9基因水平表达(t=17.496,P<0.05和t=16.155,P<0.05);免疫组化结果与PCR结果一致。结论pHGF可抑制脑积水的形成和进展,对脑积水具有一定的治疗作用;这种作用机制可能是通过抑制TGF-β1,促进HGF和MMP-9表达,抑制局部炎症反应和胶质增生。 展开更多
关键词 脑积水 纤维化 促肝细胞生长素
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口服抗凝治疗护理管理自我效能量表的汉化及信效度检验 被引量：4
7
作者 黄华玲 祝捷 +1 位作者 夏欣 杨银玲 《护理学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第21期50-53,共4页
目的汉化口服抗凝治疗护理管理自我效能量表(Self-Efficacy Scale for Oral Anticoagulant Nursing Therapy Management,SE-OAM),检验其信效度,为临床提供合适的评估工具。方法对原量表进行翻译、综合、回译,经文化调适后形成中文版SE-O... 目的汉化口服抗凝治疗护理管理自我效能量表(Self-Efficacy Scale for Oral Anticoagulant Nursing Therapy Management,SE-OAM),检验其信效度,为临床提供合适的评估工具。方法对原量表进行翻译、综合、回译,经文化调适后形成中文版SE-OAM;对292名护士进行正式调查,在调查2周后从中便利抽取20名护士再次填写量表,检验量表信效度。结果中文版SE-OAM共5个维度21个条目,项目分析高、低分组各条目评分比较,t=16.380~22.830(均P<0.05),相关系数0.762~0.935;I-CVI为0.870~1.000,S-CVI/Ave为0.970。探索性因子分析共提取出5个公因子,累计方差贡献率71.279%。总量表Cronbach′sα系数为0.982,重测信度为0.971。结论中文版SE-OAM信效度较好,可用于测量护士在患者口服抗凝治疗管理中的自我效能水平,为护理管理者制定针对性的自我效能提高方案提供依据。 展开更多
关键词 护士 抗凝治疗 护理管理 自我效能 评估量表 汉化 信度 效度
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miR-193b通过负向调控MCT7基因的表达抑制人胶质瘤U251细胞的迁移与侵袭
8
作者 谭国伟 高鑫 +4 位作者 李张昱 郭剑峰 陈四方 朱宏伟 王占祥 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期653-658,共6页
为探讨miR-193b对人胶质瘤U251细胞的迁移和侵袭能力的影响,利用HiPerFect转染试剂瞬时转染miR-193b模拟物(mimics)上调U251细胞中miR-193b的表达,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其转染效率,然后进行细胞划痕实验及侵袭实验,分别检测... 为探讨miR-193b对人胶质瘤U251细胞的迁移和侵袭能力的影响,利用HiPerFect转染试剂瞬时转染miR-193b模拟物(mimics)上调U251细胞中miR-193b的表达,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其转染效率,然后进行细胞划痕实验及侵袭实验,分别检测miR-193b对U251细胞迁移及侵袭能力的影响.结果显示过表达miR-193b可抑制U251细胞迁移和侵袭的能力.应用生物信息学软件预测,提示单羧酸转运蛋白7(MCT7)基因可能是miR-193b的潜在靶基因.进而构建双荧光素酶报告基因系统从转录水平上证明MCT7为miR-193b调控的靶基因;qRT-PCR及蛋白质免疫印记(Western blot)分别在mRNA和蛋白水平上进一步证明MCT7基因的表达受miR-193b的负调控.由此可见,miR-193b很可能通过负向调控MCT7基因的表达来抑制U251细胞的迁移与侵袭. 展开更多
关键词 胶质瘤 miR-193b MCT7 迁移 侵袭
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抑制Pygo2表达对U251细胞增殖的影响
9
作者 陈玉英 王海东 +3 位作者 王占祥 谭国伟 刘希尧 沈上杭 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期497-501,共5页
目的构建RNA干扰(RNAi)重组体抑制Pygo2的表达,并探讨其对脑胶质瘤U251细胞增殖的影响。方法针对Pygo2 cDNA序列设计并合成一对特异性的含有"短发卡"的寡核苷酸序列及其随机对照序列,经退火后插入pSuper中构建重组体。经EcoR... 目的构建RNA干扰(RNAi)重组体抑制Pygo2的表达,并探讨其对脑胶质瘤U251细胞增殖的影响。方法针对Pygo2 cDNA序列设计并合成一对特异性的含有"短发卡"的寡核苷酸序列及其随机对照序列,经退火后插入pSuper中构建重组体。经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定和DNA测序后,用脂质体2000将其转染脑胶质瘤U251细胞,采用RT-PCR和Western blot检测Pygo2 shRNA对U251细胞Pygo2 mRNA和蛋白的干扰效果,应用克隆形成实验和MTT法检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期,BrdU掺入法检测DNA合成。结果双酶切和测序鉴定证实插入序列完全正确;Pygo2 shRNA显著抑制了其mRNA和蛋白的表达,MTT分析其细胞增殖也被显著抑制(P<0.01)。与scr shRNA组的克隆形成数(78.9±6.8)%相比,Pygo2 shRNA组克隆数(55.4±5.2)%显著减少(P<0.05)。与对照组的BrdU掺入率(20.96±2.19)%相比,Pygo2 shRNA组的BrdU掺入率(8.81±0.56)%显著减少(P<0.05),而scr shRNA组的BrdU掺入率是(20.35±1.73)%无显著变化。而且,Pygo2 shRNA使U251细胞处于S期百分比显著减少、G1期显著增加(P<0.01),致细胞周期阻滞于G1期。结论成功构建了抑制Pygo2表达的重组载体,下调Pygo2表达能有效地抑制脑胶质瘤U251细胞DNA合成,使细胞阻滞于G1期,抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 PYGO2 胶质瘤 细胞增殖 短发夹RNA
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经桡动脉入路血流导向装置治疗颅内动脉瘤:27例单中心应用经验 被引量：6
10
作者 李张昱 段国礼 +2 位作者 吴一娜 路智文 黄清海 《中国脑血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期217-222,共6页
目的研究经桡动脉入路(TRA)行血流导向装置(FD)置入术治疗颅内动脉瘤的可行性及安全性。方法回顾性连续纳入2021年2月至8月在海军军医大学第一附属医院脑血管病中心行TRA FD置入术治疗的颅内动脉瘤患者27例。收集所有患者的人口学信息... 目的研究经桡动脉入路(TRA)行血流导向装置(FD)置入术治疗颅内动脉瘤的可行性及安全性。方法回顾性连续纳入2021年2月至8月在海军军医大学第一附属医院脑血管病中心行TRA FD置入术治疗的颅内动脉瘤患者27例。收集所有患者的人口学信息、临床及手术资料,分析TRA建立的成功率及其对FD置入的影响、入路部位并发症及围手术期并发症发生情况。结果27例患者中,颈内动脉瘤15例(55.6%),椎动脉瘤5例(18.5%),基底动脉瘤4例(14.8%),大脑后动脉瘤1例(3.7%),椎-基底动脉冗长扩张症2例(7.4%)。14例(51.9%)经近端桡动脉入路(pTRA),12例(44.4%)经远端桡动脉入路(dTRA),1例(3.7%,大脑中动脉分叉部动脉瘤)因导引导管长度不够且微导管难以到位,由dTRA转换为经股动脉入路治疗。26例(96.3%)TRA病例均成功将FD输送到位并释放,未发生桡动脉痉挛、症状性桡动脉闭塞及穿刺点血肿事件。2例(7.4%)出现与TRA无关的围手术期并发症(1例穿支缺血事件和1例抗血小板聚集相关性穿刺道出血)。结论TRA行FD置入术治疗颅内动脉瘤具有较高的技术成功率和较低的入路部位并发症发生率。 展开更多
关键词 颅内动脉瘤 血管内治疗 血流导向装置 经桡动脉入路
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