小鼠脂肪间充质干细胞的分离培养及其在肝内归巢 被引量：5

1

作者 赵文秀 张磊 +2 位作者 刘建明 尹震宇 王效民 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1151-1154,共4页

目的建立小鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)分离培养的方法,并将ADSCs移植于体内,观察其致瘤性及肝脏归巢情况。方法取皮下脂肪用0.075%Ⅰ型胶原酶消化,贴壁培养获取小鼠ADSCs,通过流式细胞技术检测其表面分子、细胞周期;并将ADSCs注射到小... 目的建立小鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)分离培养的方法,并将ADSCs移植于体内,观察其致瘤性及肝脏归巢情况。方法取皮下脂肪用0.075%Ⅰ型胶原酶消化,贴壁培养获取小鼠ADSCs,通过流式细胞技术检测其表面分子、细胞周期;并将ADSCs注射到小鼠皮下观察其致瘤性,及尾静脉注射观察其肝脏的归巢。结果分离培养的细胞高表达CD29、CD44,不表达CD34、CD45、CD11b、CD14;细胞周期显示G0/G1、S、G2/M的细胞所占的比例分别为80.1%、7.9%、12%;ADSCs具有低免疫原性,不表达CD40、CD80、CD86、MHCI、MHCII以及PDL-1。在IFN-γ作用下,可轻度上调CD40、CD80以及PDL-1。ADSCs移植后未见成瘤,且可在肝脏实质内多处定居。结论胶原酶消化、贴壁培养可以从小鼠脂肪中分离出高纯度的间充质干细胞,且ADSCs移植后能在肝内定居。 展开更多

关键词 间充质干细胞 脂肪 小鼠 细胞归巢

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不同流式抗体分选小鼠原位肝癌模型中髓系来源抑制性细胞的比较 被引量：4

2

作者 赵文秀 张正奇 +3 位作者 许雅苹 吴端 尹震宇 王效民 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2013年第4期42-46,I0002,共6页

目的比较不同的流式抗体分选小鼠原位肝癌模型骨髓中的髓系来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)。方法建立BALB/c小鼠原位肝癌移植模型,10d后分离荷瘤小鼠骨髓细胞,分别进行CD11b、Gr-1单色标记及CD11b和Gr-1双色... 目的比较不同的流式抗体分选小鼠原位肝癌模型骨髓中的髓系来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)。方法建立BALB/c小鼠原位肝癌移植模型,10d后分离荷瘤小鼠骨髓细胞,分别进行CD11b、Gr-1单色标记及CD11b和Gr-1双色标记后,进行流式分选。比较这三种方式分选的MDSCs纯度、活力,并检测分选的细胞精氨酸代谢酶1(arginase-1,Arg-1)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达,并通过活性氧检测试剂盒检测MDSCs活性氧(reactive oxygen species,ROS)表达。结果三种方法分选到的细胞活力和纯度都大于90%。CD11b标记进行分选操作最为方便,易于统一,但纯度略差;Gr-1标记进行分选时,细胞群不好确定,但纯度高;双色标记进行分选纯度最高。分选的细胞高表达Arg-1、iNOS和ROS。结论三种抗体标记方法均能从小鼠原位肝癌模型骨髓中的分选到纯度高、活力好的MDSCs,而用CD11b单色标记操作方便,易于统一,可作为首选方法。MDSCs的成功分选,对于后续开展MDSCs的生物学和免疫学功能研究奠定了基础。 展开更多

关键词 髓系来源抑制性细胞 肝癌 荧光激活细胞分选 流式分选 抗体 骨髓 小鼠

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Bim和细胞外调节蛋白在肝癌多药耐药细胞中的表达 被引量：3

3

作者 闫峰 王效民 +2 位作者 马全明 袁思波 蒋楠 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1838-1841,共4页

目的检测人肝癌耐药细胞Hep G-2/ADM和亲本细胞Hep G-2中ERK1,ERK2、ERK5和Bim的表达,探讨其对肝癌细胞多药耐药的影响。方法小剂量缓慢诱导法诱导建立人肝癌耐药细胞株Hep G-2/ADM;CCK-8法测定Hep G-2/ADM对多种化疗药物的交叉耐药性;W... 目的检测人肝癌耐药细胞Hep G-2/ADM和亲本细胞Hep G-2中ERK1,ERK2、ERK5和Bim的表达,探讨其对肝癌细胞多药耐药的影响。方法小剂量缓慢诱导法诱导建立人肝癌耐药细胞株Hep G-2/ADM;CCK-8法测定Hep G-2/ADM对多种化疗药物的交叉耐药性;Western-blotting检测MRP-1,P-gp,ERK1,ERK2,ERK5和Bim蛋白水平的表达;荧光定量PCR检测Bim mRNA的表达。结果化疗药物能够体外诱导肿瘤细胞产生耐药性,Hep G-2/ADM对ADM、5-FU和CDDP的耐药指数分别为6.8,4.1和4.5,且高表达MRP-1和P-gp蛋白;与亲本细胞Hep G-2相比,Hep G-2/ADM中ERK1,ERK2和ERK5的表达均升高,ERK1蛋白磷酸化水平无显著变化,ERK2磷酸化水平下降,且p-ERK1/2与ERK1/2的比值下降;Bim的mRNA和蛋白表达均下降。结论细胞外调节蛋白激酶ERKs和Bcl-2家族的促凋亡蛋白Bim的表达与人肝癌多药耐药的发生密切相关。 展开更多

关键词 多药耐药 ERK1 ERK 2 ERK5 EXTRACELLULAR SIGNAL-REGULATED KINASE 1 EXTRACELLULAR SIGNAL-REGULATED KINASE 2 EXTRACELLULAR SIGNAL-REGULATED KINASE 5

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表柔比星-聚乳酸缓释微球局部治疗肝癌 被引量：4

4

作者 周剑寅 王效民 +4 位作者 叶社房 翁建 侯振清 周志敏 张其清 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期690-694,共5页

目的研究表柔比星-聚乳酸缓释微球(EPI-PLA-MS)局部给药治疗肝癌的效果。方法复乳-溶剂挥发法制备EPI-PLA-MS。将40只昆明小鼠随机分为5组,每组8只,分别腹腔注射不同剂量的游离表柔比星(FEPI),计算最大耐受量(MTD)。H22皮下实体瘤肝癌... 目的研究表柔比星-聚乳酸缓释微球(EPI-PLA-MS)局部给药治疗肝癌的效果。方法复乳-溶剂挥发法制备EPI-PLA-MS。将40只昆明小鼠随机分为5组,每组8只,分别腹腔注射不同剂量的游离表柔比星(FEPI),计算最大耐受量(MTD)。H22皮下实体瘤肝癌荷瘤小鼠3组,每组5只,分别用生理盐水(normalsaline,NS)、空白微球和含药微球(含EPI9mg/kg)瘤内注射给药,2周后取瘤称重。H22腹水型肝癌荷瘤小鼠3组,每组5只,分别用NS、空白微球和含药微球(含EPI9mg/kg)腹腔注射给药,计算动物生命延长率。结果FEPI腹腔注射的MTD为9mg/kg。EPI-PLA-MS瘤内给药后含药微球组和空白微球组的抑瘤率分别为40.35%和36.09%。腹腔给药后能显著延长荷瘤鼠的生存时间,含药微球组和空白微球组生命延长率分别为153.49%和142.22%。结论EPI-PLA-MS是一种有效低毒的药物新剂型,在局部治疗肝癌方面具有良好的临床应用前景。 展开更多

关键词 表柔比星 缓释剂 微球 肝肿瘤 局部治疗

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护理人员对临床检验危急值报告制度的认知调查 被引量：35

5

作者 蔡秋妮 张娜 +1 位作者 钟玲娟 陈静 《护理学杂志》 2011年第3期54-56,共3页

目的了解临床检验危急值(下称危急值)报告制度在护理工作中的实施情况及护士对此的知晓情况。方法采用自行设计的问卷对某院150名临床护士进行危急值报告制度相关问题的问卷调查。结果 46.67%的护士所在科室已经设立危急值报告登记本,47... 目的了解临床检验危急值(下称危急值)报告制度在护理工作中的实施情况及护士对此的知晓情况。方法采用自行设计的问卷对某院150名临床护士进行危急值报告制度相关问题的问卷调查。结果 46.67%的护士所在科室已经设立危急值报告登记本,47.33%护士认为危急值报告制度在临床实施中存在困难,32.67%护士认为所在科室能规范留取各种标本,60.00%护士在患者临床症状与危急值报告结果不相符合会复查,但45.34%的护士接到危急值报告不会规范登记,41.33%接到危急值报告不会及时报告医生。仅有60.67%护士掌握危急值报告制度,不同职称及学历护士对急值报告制度知晓率存在统计学差异(P<0.05,P<0.01)。结论目前临床工作中贯彻落实危急值报告制度的情况不容乐观,护理人员总体知晓度不高。医院管理者应组织医护人员共同学习,统一认识;护理管理部门应从多方面着手改善条件,以保证危急值报告制度的实施。 展开更多

关键词 护理人员 临床检验 危急值 报告制度 认知 护理管理

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人肝癌多药耐药细胞中ERK5的表达 被引量：4

6

作者 闫峰 王效民 潘超 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期483-486,共4页

目的检测人肝癌多药耐药细胞(hepG2/ADM和BEL-7402/5-FU)及亲本细胞(hepG和BEL-7402)中ERK5的表达,探讨其对肝癌细胞多药耐药的影响。方法MTT法测定人肝癌多药耐药细胞株多种化疗药物的交叉耐药性,实时荧光定量PCR检测ERK5在人肝癌多药... 目的检测人肝癌多药耐药细胞(hepG2/ADM和BEL-7402/5-FU)及亲本细胞(hepG和BEL-7402)中ERK5的表达,探讨其对肝癌细胞多药耐药的影响。方法MTT法测定人肝癌多药耐药细胞株多种化疗药物的交叉耐药性,实时荧光定量PCR检测ERK5在人肝癌多药耐药细胞及亲本细胞中mRNA水平的表达,western-blotting检测ERK5蛋白水平的表达。结果hepG2/ADM对ADM、5-FU、CDDP的耐药指数分别为12.34、5.74、3.81;BEL-7402/5-FU对5-FU、VCR、OHP、MTX和ADM的耐药指数分别为15.32、10.08、5.85、6.74和3.26。与亲本细胞相比较,在hepG2/ADM细胞中ERK5mRNA和蛋白表达均升高,而在BEL-7402/5-FU细胞中ERK5mRNA表达降低,ERK5蛋白表达升高。结论ERK5的表达与人肝癌多药耐药的发生密切相关,为逆转治疗肝癌细胞多药耐药研究提供了新思路。 展开更多

关键词 肝癌 多药耐药 细胞外信号调节激酶5

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心脏移植受者社会支持和应对方式对其生存质量的影响 被引量：15

7

作者 许丽春 张锦辉 +1 位作者 姜小鹰 廖崇先 《护理学杂志》 2009年第18期18-20,共3页

目的探讨心脏移植受者社会支持和应对方式对其生存质量的影响。方法应用简明健康调查问卷(SF-36)、社会支持评定量表(SSRS)、简易应对方式问卷对35例心脏移植受者进行调查。结果心脏移植受者SF-36各维度得分显著低于常模(均P<0.01);... 目的探讨心脏移植受者社会支持和应对方式对其生存质量的影响。方法应用简明健康调查问卷(SF-36)、社会支持评定量表(SSRS)、简易应对方式问卷对35例心脏移植受者进行调查。结果心脏移植受者SF-36各维度得分显著低于常模(均P<0.01);心脏移植受者的社会支持、积极应对方式与其生存质量呈正相关(P<0.05,P<0.01)。结论心脏移植受者的生存质量水平较低,生存质量与社会支持和应对方式密切相关。医务人员应重视社会支持系统对心脏移植受者生存质量的作用,有效引导其采取积极的应对方式,以提高生存质量。 展开更多

关键词 心脏移植 受者 生存质量 社会支持 应对方式

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单用表阿霉素缓释剂及联合表阿霉素游离剂腹腔化疗治疗肝癌的疗效 被引量：2

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作者 周剑寅 王效民 +1 位作者 张其清 叶社房 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期603-606,共4页

目的观察单用表阿霉素（EPI）聚乳酸（PLA）缓释微球（MS）及联合游离表阿霉素（FEPI）腹腔化疗治疗肝癌的疗效。方法将35只H22腹水型肝癌荷瘤小鼠分为7组,每组5只,分别予空白微球,生理盐水,低、中、高剂量载药微球（分别含EPI 9、18、3... 目的观察单用表阿霉素（EPI）聚乳酸（PLA）缓释微球（MS）及联合游离表阿霉素（FEPI）腹腔化疗治疗肝癌的疗效。方法将35只H22腹水型肝癌荷瘤小鼠分为7组,每组5只,分别予空白微球,生理盐水,低、中、高剂量载药微球（分别含EPI 9、18、36 mg/kg）,FEPI（9 mg/kg）和EPI-PLA-MS＋FEPI（各含EPI 4.5 mg/kg）,经腹腔注射给药,计算动物生命延长率。结果EPI-PLA-MS能有效延长荷瘤鼠的生存时间,并呈量效关系,小鼠最大耐受量约为18-36 mg/kg。联合用药组的平均生存时间、中位生存时间和生命延长率均达到最高值,分别为（40.0±16.9）d、33.5 d和222.58%。结论EPI-PLA-MS缓释剂与游离剂型联合腹腔化疗是一种新型、高效的给药方式,可有效治疗肝癌。 展开更多

关键词 表阿霉素 缓释剂 肝肿瘤 联合用药 腹腔化疗

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PRKCD和ASK1在人髓系白血病U937细胞分化过程中的作用 被引量：2

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作者 闫峰 王效民 +2 位作者 袁思波 马全明 韩慧平 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期17-22,共6页

目的通过检测ASK1和PRKCD在单核细胞分化过程中的表达变化,探索其在门静脉高压症(PH)脾亢脾脏巨噬细胞(MΦ)功能变化中所起的作用。方法采用佛波酯诱导U937分化成为巨噬细胞样细胞,q-PCR检测不同分化阶段ASK1和PRKCD m RNA的表达,Wester... 目的通过检测ASK1和PRKCD在单核细胞分化过程中的表达变化,探索其在门静脉高压症(PH)脾亢脾脏巨噬细胞(MΦ)功能变化中所起的作用。方法采用佛波酯诱导U937分化成为巨噬细胞样细胞,q-PCR检测不同分化阶段ASK1和PRKCD m RNA的表达,Western Blot检测诱导前后ASK1和PRKCD蛋白表达水平变化,ELISA法检测细胞分化过程中与吞噬功能相关的细胞因子IL-10和TNF-α的分泌情况,鸡红细胞吞噬试验鉴定诱导后细胞功能。结果随着PMA诱导U937细胞时间延长,ASK1和PRKCD基因表达水平下降,TNF-α的分泌量逐渐增加,而IL-10在诱导后24 h达到最大分泌量,随后又呈下降趋势;Western Blot结果显示,ASK1及p-ASK1蛋白表达水平较诱导前均显著上升,PRKCD及p-PRKCD蛋白表达水平显著下降;吞噬实验结果显示,诱导后的细胞具有一定的吞噬功能。结论在PMA诱导的U937细胞向单核细胞分化过程中,ASK1蛋白表达上调,PRKCD蛋白表达下调,与脾亢脾Mφ一致,并导致Mφ活性增强。 展开更多

关键词 单核细胞分化 U937 PRKCD ASK1 门静脉高压症脾亢

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基质细胞与肿瘤发生发展之间的关系 被引量：2

10

作者 张磊 王效民 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期788-792,共5页

基质细胞作为肿瘤微环境中的重要组成部分,在肿瘤的发生发展过程中起着重要调节作用。在缺乏肿瘤细胞的情况下,它们可以通过细胞与细胞间相互接触,在各种可溶性因子的媒介作用下,通过改变上皮细胞表型和基因型来介导周围组织的恶性转化... 基质细胞作为肿瘤微环境中的重要组成部分,在肿瘤的发生发展过程中起着重要调节作用。在缺乏肿瘤细胞的情况下,它们可以通过细胞与细胞间相互接触,在各种可溶性因子的媒介作用下,通过改变上皮细胞表型和基因型来介导周围组织的恶性转化。对于肿瘤相关基质细胞进行深入研究有可能进一步阐明肿瘤产生的机制并探索出有效的治疗方法。 展开更多

关键词 肿瘤微环境 基质细胞 金属蛋白酶 肿瘤

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骨髓干细胞移植联合门奇静脉断流术治疗晚期肝硬化的护理 被引量：1

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作者 伍建辉 陈莹 +1 位作者 叶晓靖 尹震宇 《护理学杂志》 2009年第20期33-34,共2页

对2例晚期肝硬化患者实施经门静脉自体骨髓干细胞移植联合门奇静脉断流术。术前对出血行紧急处理，予以心理疏导、术前准备；术后加强基础护理、健康指导及出血、血栓形成、感染、肝昏迷等并发症的观察，出院前予以休息、营养、活动及... 对2例晚期肝硬化患者实施经门静脉自体骨髓干细胞移植联合门奇静脉断流术。术前对出血行紧急处理，予以心理疏导、术前准备；术后加强基础护理、健康指导及出血、血栓形成、感染、肝昏迷等并发症的观察，出院前予以休息、营养、活动及服药指导，告知返院再次行骨髓干细胞移植时间。结果患者首次术后住院12、13d，血常规、肝功能正常出院。随访9～10个月，随访期间2例患者分别于出院后1、4个月返院再行干细胞移植，过程顺利，肝功能、凝血功能正常。提示周密的围术期护理是保证手术成功的关键。 展开更多

关键词 肝硬化 门静脉 自体骨髓干细胞 干细胞移植 门奇静脉断流术 护理

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不同品系大鼠之间肝移植排斥反应的比较研究 被引量：3

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作者 叶志坚 杨中萌 王效民 《器官移植》 CAS CSCD 2014年第5期289-293,共5页

目的比较不同品系大鼠之间肝移植排斥反应特点。方法依据大鼠不同品系分成对照组SD→SD（A组）,实验组Wistar→SD（B组）、Lewis→BN（C组）以及DA→Lewis（D组）4个组,采用Kamada双袖套法建立大鼠原位肝移植模型。比较各组受体大鼠术后... 目的比较不同品系大鼠之间肝移植排斥反应特点。方法依据大鼠不同品系分成对照组SD→SD（A组）,实验组Wistar→SD（B组）、Lewis→BN（C组）以及DA→Lewis（D组）4个组,采用Kamada双袖套法建立大鼠原位肝移植模型。比较各组受体大鼠术后10 d血清肝功能指标[丙氨酸转氨酶（ALT）、总胆红素（TB）和白蛋白（Alb）]、血清白细胞介素（IL）-2和IL-10水平、急性排斥反应组织病理学分级和术后平均生存时间。结果与A、B组比较,C组和D组的血清ALT和TB明显升高,Alb明显降低,差异均有统计学意义（均为P〈0.05）。与C组比较,D组的TB明显升高,Alb明显降低,差异均有统计学意义（均为P〈0.05）。与A组比较,B、C、D组大鼠血清IL-2和IL-10水平均明显升高,C组和D组的IL-2/IL-10亦明显升高,差异有统计学意义（均为P〈0.05）。与B组比较,C组和D组大鼠血清IL-2水平明显升高,D组的IL-2/IL-10亦明显升高,差异有统计学意义（均为P〈0.05）。与C组比较,D组大鼠血清IL-2水平明显升高,D组的IL-2/IL-10亦明显升高,差异有统计学意义（均为P〈0.05）。肝组织病理学检查显示,A组大鼠肝组织未见明显排斥反应,排斥活动性指数（RAI）评分（1.8±0.7）分;B组RAI评分（3.1±1.3）分,属轻度或不明确性排斥反应;C组RAI评分（6.9±0.8）分,属中~重度排斥反应;D组RAI评分（8.8±0.5）分,属重度排斥反应。各组间RAI评分比较以及组间两两比较,差异均有统计学意义（均为P〈0.05）。A组、B组、C组、D组受体大鼠术后平均生存时间分别为（119.3±1.9）d、（116.9±8.3）d、（53.4±6.1）d、（12.1±2.4）d,A组与B组的生存时间比较差异无统计学意义,余各组两两比较差异均有统计学意义（均为P〈0.05）。结论 4种组合中,大鼠DA→Lewis模型排斥反应最剧烈,Lewis→BN次之,而Wistar→SD最轻,接近于免疫耐受。 展开更多

关键词 肝移植 排斥反应 模型 大鼠 白细胞介素

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基于DNA逻辑门的SP-ICP-MS细胞外囊泡分析平台用于肝细胞癌的早期诊断

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作者 吕政贤 杨剑鑫 +2 位作者 刘平果 严晓文 王秋泉 《环境化学》 2025年第10期3576-3587,共12页

细胞外囊泡(EVs)因承载多种疾病相关蛋白而被认为是提升诊断效能的重要标志物.本文提出了一种基于DNA逻辑门的EVs表面多蛋白联合分析策略,通过单颗粒电感耦合等离子体质谱(SP-ICPMS)对EVs的精准定量分析,实现肝细胞癌(HCC)的早期诊断.... 细胞外囊泡(EVs)因承载多种疾病相关蛋白而被认为是提升诊断效能的重要标志物.本文提出了一种基于DNA逻辑门的EVs表面多蛋白联合分析策略,通过单颗粒电感耦合等离子体质谱(SP-ICPMS)对EVs的精准定量分析,实现肝细胞癌(HCC)的早期诊断.本方法设计了可识别EpCAM(上皮细胞黏附分子)、GPC3(硫酸乙酰肝素蛋白聚糖3)和CD63(分化簇63)3种蛋白的适配体-DNA逻辑回路,利用多标志物共定位的方式对EVs进行特异性识别,进而触发滚环扩增反应,生成特征DNA序列并与纳米金探针杂交,实现SP-ICP-MS信号放大检测.该策略显著提升了肿瘤EVs识别的特异性,有效克服了传统方法灵敏度不足及血清基质干扰等难题,检测限可达950 particles·μL^(−1).应用于50例临床样本检测结果显示,EpCAM/GPC3/CD63三阳性表达的EVs亚群可用于区分HCC与肝硬化患者,诊断敏感度为82.4%,特异性为91.3%,优于常规血清甲胎蛋白检测.本研究所提出的SPICP-MS血清EVs分析策略为HCC的早期诊断提供了新思路,同时也推动了SP-ICP-MS技术在精准医学中的进一步应用. 展开更多

关键词 肝细胞癌 细胞外囊泡 DNA 逻辑回路 SP-ICP-MS 早期诊断.

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