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基于乙型肝炎病毒核心蛋白的颗粒性肽展示载体的构建
被引量：
2
1
作者
杨海杰
陈敏
+5 位作者
何水珍
程通
顾颖
管保全
张军
夏宁邵
《厦门大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期436-440,共5页
为提高HBVpreS1aa21 47的免疫原性,将1～6拷贝的preS1(21 47)片段以串联方式插入HBcAg的aa78和aa82之间,在大肠杆菌中进行表达和纯化.携带1～3拷贝的重组抗原CI、CII和CIII的表达产量约占菌体总蛋白的20%,而携带4～6拷贝的重组抗原则未...
为提高HBVpreS1aa21 47的免疫原性,将1～6拷贝的preS1(21 47)片段以串联方式插入HBcAg的aa78和aa82之间,在大肠杆菌中进行表达和纯化.携带1～3拷贝的重组抗原CI、CII和CIII的表达产量约占菌体总蛋白的20%,而携带4～6拷贝的重组抗原则未见明显表达.电镜检测显示重组抗原CI、CII和CIII可以形成形态与HBcAg类似的类病毒颗粒,颗粒直径在30～34nm之间.ELISA分析显示这3种VLP抗原具有很强的preS1抗原的免疫反应性,而对HBc单克隆抗体则基本失去反应性.提示外源多肽pre(21 47)可被有效地递呈至类HBc颗粒的表面,且外源多肽的插入使HBc主要的免疫优势表位遭到了破坏.这些证据表明利用HBcAg的专一性呈递能力来构建多价抗原可作为免疫原设计时的一种策略.
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关键词
乙型肝炎病毒
核心蛋白
颗粒性肽
展示载体
preSl
免疫原性
类病毒颗粒
原核表达
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职称材料
多样性人源天然噬菌体抗体库的构建及初步应用
被引量：
6
2
作者
王晋
罗文新
+4 位作者
李利峰
陈瑛炜
王明桥
张军
夏宁邵
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期786-789,793,共5页
目的:构建多样性良好的人源天然噬菌体抗体库。方法:从正常人外周血中分离淋巴细胞,以RT-PCR和半巢式PCR扩增重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因,以重叠延伸PCR将VH、VL组装成scFv基因,并将其克隆入噬菌粒载体pCANTAB-5E中。以pCANTAB...
目的:构建多样性良好的人源天然噬菌体抗体库。方法:从正常人外周血中分离淋巴细胞,以RT-PCR和半巢式PCR扩增重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因,以重叠延伸PCR将VH、VL组装成scFv基因,并将其克隆入噬菌粒载体pCANTAB-5E中。以pCANTAB-5E电转化大肠杆菌TG1,构建人源天然噬菌体抗体库,测序分析抗体基因的家族信息和多样性,并用多种抗原对其进行筛选。结果:获得了库容为2×108的人源天然噬菌体抗体库。分别用5种抗原对其进行筛选,均可获得特异性噬菌体抗体的富集。结论:成功地构建了一个多样性良好的人源天然噬菌体抗体库,可用于制备具有应用前景的人源抗体。
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关键词
人源天然噬菌体抗体库
单链抗体
多样性
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职称材料
题名
基于乙型肝炎病毒核心蛋白的颗粒性肽展示载体的构建
被引量：
2
1
作者
杨海杰
陈敏
何水珍
程通
顾颖
管保全
张军
夏宁邵
机构
厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建省医学分子病毒学研究中心
厦门大学
出处
《厦门大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期436-440,共5页
基金
国家重点科技(攻关)计划(96 920 37 09)
文摘
为提高HBVpreS1aa21 47的免疫原性,将1～6拷贝的preS1(21 47)片段以串联方式插入HBcAg的aa78和aa82之间,在大肠杆菌中进行表达和纯化.携带1～3拷贝的重组抗原CI、CII和CIII的表达产量约占菌体总蛋白的20%,而携带4～6拷贝的重组抗原则未见明显表达.电镜检测显示重组抗原CI、CII和CIII可以形成形态与HBcAg类似的类病毒颗粒,颗粒直径在30～34nm之间.ELISA分析显示这3种VLP抗原具有很强的preS1抗原的免疫反应性,而对HBc单克隆抗体则基本失去反应性.提示外源多肽pre(21 47)可被有效地递呈至类HBc颗粒的表面,且外源多肽的插入使HBc主要的免疫优势表位遭到了破坏.这些证据表明利用HBcAg的专一性呈递能力来构建多价抗原可作为免疫原设计时的一种策略.
关键词
乙型肝炎病毒
核心蛋白
颗粒性肽
展示载体
preSl
免疫原性
类病毒颗粒
原核表达
Keywords
preS1
core protein
immunogenicity
virus-like particles
prokaryotic expression
分类号
R373.21 [医药卫生—病原生物学]
Q71 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
多样性人源天然噬菌体抗体库的构建及初步应用
被引量：
6
2
作者
王晋
罗文新
李利峰
陈瑛炜
王明桥
张军
夏宁邵
机构
厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建省医学分子病毒学研究中心
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期786-789,793,共5页
基金
福建省科技重大项目(2002F013)
国家"十五"创新药物博士基金资助项目(2003AA2Z3539)
+1 种基金
福建省自然科学基金资助项目(C031005)
厦门市科技计划项目(3502Z20055002)
文摘
目的:构建多样性良好的人源天然噬菌体抗体库。方法:从正常人外周血中分离淋巴细胞,以RT-PCR和半巢式PCR扩增重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因,以重叠延伸PCR将VH、VL组装成scFv基因,并将其克隆入噬菌粒载体pCANTAB-5E中。以pCANTAB-5E电转化大肠杆菌TG1,构建人源天然噬菌体抗体库,测序分析抗体基因的家族信息和多样性,并用多种抗原对其进行筛选。结果:获得了库容为2×108的人源天然噬菌体抗体库。分别用5种抗原对其进行筛选,均可获得特异性噬菌体抗体的富集。结论:成功地构建了一个多样性良好的人源天然噬菌体抗体库,可用于制备具有应用前景的人源抗体。
关键词
人源天然噬菌体抗体库
单链抗体
多样性
Keywords
human natural phage antibody library
scFv
diversity
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于乙型肝炎病毒核心蛋白的颗粒性肽展示载体的构建
杨海杰
陈敏
何水珍
程通
顾颖
管保全
张军
夏宁邵
《厦门大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2004
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
多样性人源天然噬菌体抗体库的构建及初步应用
王晋
罗文新
李利峰
陈瑛炜
王明桥
张军
夏宁邵
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
6
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职称材料
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