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人乳头瘤病毒假病毒制备方法的优化被引量：5: 1; 作者郑舟周国栋 +6 位作者张雅丽张涛杨炳春邱竹英程通张军夏宁邵《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期269-273,共5页; 人乳头瘤病毒假病毒可广泛应用于中和抗体鉴定和疫苗免疫性评估等研究.本研究对多质粒共转染293FT细胞生产HPV假病毒的方法进行了深入优化,结果显示不同的HPV结构蛋白表达质粒转染比例对于假病毒生产效率有显著的影响,HPV主要结构蛋白L... 展开更多; 关键词人乳头瘤病毒假病毒制备表达质粒; 在线阅读下载PDF 职称材料

梅毒螺旋体47ku抗原的分段表达及抗原表位分析: 2; 作者郭清顺李廷栋 +5 位作者熊君辉周国梁葛胜祥李少伟张军夏宁邵《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期874-878,共5页; 通过大肠杆菌表达系统表达了梅毒螺旋体47 ku膜蛋白及其N端和/或C端缺失的重组蛋白共15个,经亲和层析纯化,并通过免疫印迹和酶联免疫实验检测这组蛋白与梅毒病人血清的反应性.结果发现所有包含D结构域的重组蛋白的免疫反应性显著高于不... 展开更多; 关键词梅毒螺旋体 47 ku膜蛋白免疫反应性表位; 在线阅读下载PDF 职称材料

高特异性人血清白蛋白化学发光免疫分析方法的建立: 3; 作者张雅丽袁伦志 +5 位作者王腾云刘旋吴坤张军程通夏宁邵《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期424-429,共6页; 人血清白蛋白（HSA）是人类肝脏功能的重要生物标志物.本研究旨在发展一种具有高度种属特异性和灵敏度的HSA化学发光免疫分析（HSA CLIA）定量检测方法.通过HSA免疫小鼠,制备了6株HSA鼠单克隆抗体;使用间接化学发光检测（Indirect-CLIA... 展开更多; 关键词人血清白蛋白(HSA) 单克隆抗体种属特异性化学发光免疫分析(CLIA); 在线阅读下载PDF 职称材料

新城疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA的初步建立被引量：3: 4; 作者王明睿钟建平 +2 位作者李睿王国松陈毅歆《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期481-485,512,共6页; 目的制备新城疫病毒(NDV)核蛋白(NP)的单克隆抗体(单抗),并用于建立一种可定量检测NDV病毒含量的双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测方法(NDV NP ELISA)。方法基于NDV病毒株F48E9获得NP基因,经原核表达方式制备出重组抗原rNP;免疫小鼠制备N... 展开更多; 关键词新城疫病毒核蛋白单克隆抗体定量检测酶联免疫吸附测定; 在线阅读下载PDF 职称材料

毕赤酵母分泌表达嵌合HEV表位的HBcAg颗粒: 5; 作者章建楠李少伟 +7 位作者杨坤宇何芳萍唐明顾颖王颖彬杜海莲张军夏宁邵《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期107-112,共6页; 在毕赤酵母分泌表达嵌合有HEV受体相关表位12A10的HBcAg蛋白,经甲醇诱导后的培养液上清通过切向流浓缩、更换缓冲液后,进行疏水层析纯化.CsCl等密度梯度离心测得分泌的重组颗粒的密度为1.32 g/mL.透射电镜观察显示,纯化的重组颗粒为均... 展开更多; 关键词乙肝病毒核心抗原融合蛋白毕赤酵母分泌表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人乳头瘤病毒假病毒制备方法的优化被引量：5: 1; 作者郑舟周国栋张雅丽张涛杨炳春邱竹英程通张军夏宁邵; 机构厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心; 出处《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期269-273,共5页; 基金福建省科技重大专项(2004YZ01) 福建省自然科学基金(C0710041) 厦门市病毒性疾病新药研发平台建设项目(3502Z20041008)资助; 文摘人乳头瘤病毒假病毒可广泛应用于中和抗体鉴定和疫苗免疫性评估等研究.本研究对多质粒共转染293FT细胞生产HPV假病毒的方法进行了深入优化,结果显示不同的HPV结构蛋白表达质粒转染比例对于假病毒生产效率有显著的影响,HPV主要结构蛋白L1的表达水平是影响生产效率的主要因素,L2表达质粒的用量过高或过低均不利于假病毒的生产,而报告质粒的用量对假病毒生产效率的影响相对较小.综合比较显示,在该体系中L1和L2表达质粒和报告质粒以合适比例(如1∶1/10∶1/2)进行共转染可获得更为理想的生产效率.本研究同时也在293FT细胞中对磷酸钙转染方法进行了优化,通过磷酸钙与质粒用量的交叉配比试验获得了较优的转染条件.通过优化,建立了更为高效的HPV假病毒大量制备方法,在HPV16、HPV18、HPV6、HPV11假病毒生产中的应用结果显示较原方法可显著提高生产效率.本研究为HPV假病毒中和实验的规模化应用提供了有利条件.; 关键词人乳头瘤病毒假病毒制备表达质粒; Keywords Human papillomavirus pseudovirion preparation experssion plasmids; 分类号 R373 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名梅毒螺旋体47ku抗原的分段表达及抗原表位分析: 2; 作者郭清顺李廷栋熊君辉周国梁葛胜祥李少伟张军夏宁邵; 机构厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心; 出处《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期874-878,共5页; 基金国家863重点项目(2006AA020905) 福建省科技重大专项(2004YZ01)资助; 文摘通过大肠杆菌表达系统表达了梅毒螺旋体47 ku膜蛋白及其N端和/或C端缺失的重组蛋白共15个,经亲和层析纯化,并通过免疫印迹和酶联免疫实验检测这组蛋白与梅毒病人血清的反应性.结果发现所有包含D结构域的重组蛋白的免疫反应性显著高于不含D结构域的蛋白,提示D结构域中可能包含47 ku膜蛋白上的一个免疫优势表位.; 关键词梅毒螺旋体 47 ku膜蛋白免疫反应性表位; Keywords Treponema pallidurn TP47 immuno-reactivity epitope; 分类号 Q365.1 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名高特异性人血清白蛋白化学发光免疫分析方法的建立: 3; 作者张雅丽袁伦志王腾云刘旋吴坤张军程通夏宁邵; 机构厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院; 出处《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期424-429,共6页; 基金国家重大科技专项(2012ZX10004503-005); 文摘人血清白蛋白（HSA）是人类肝脏功能的重要生物标志物.本研究旨在发展一种具有高度种属特异性和灵敏度的HSA化学发光免疫分析（HSA CLIA）定量检测方法.通过HSA免疫小鼠,制备了6株HSA鼠单克隆抗体;使用间接化学发光检测（Indirect-CLIA）和West blotting检测方法评价单抗对HSA的反应活性;使用免疫组织化学检测（IHC）和West blotting检测方法评价单抗的种属特异性;选择最佳的包被抗体和检测抗体配对;确定HSA-CLIA的定量线性和范围.West bloting和IHC方法中,4F5和5D2抗体反应性最强,且不与小鼠、大鼠、牛、兔、山羊、猴、鸡等常见实验动物血清白蛋白交叉反应.以单抗5D2配合单抗4F5建立的HSA CLIA,线性范围达到122～31 250 pg/mL,可适用于多种样本的HSA定量检测.本研究发展的单克隆抗体和检测方法为HSA的特异性检测提供了重要工具和手段.; 关键词人血清白蛋白(HSA) 单克隆抗体种属特异性化学发光免疫分析(CLIA); Keywords human serum albumin（HSA） monoclonal antibody species-specific chemiluminescence immunoassay（CLIA）; 分类号 Q819 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新城疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA的初步建立被引量：3: 4; 作者王明睿钟建平李睿王国松陈毅歆; 机构厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期481-485,512,共6页; 基金国家自然科学基金(31670934):基于广谱中和单抗的通用型流感疫苗设计及其结构基础研究~~; 文摘目的制备新城疫病毒(NDV)核蛋白(NP)的单克隆抗体(单抗),并用于建立一种可定量检测NDV病毒含量的双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测方法(NDV NP ELISA)。方法基于NDV病毒株F48E9获得NP基因,经原核表达方式制备出重组抗原rNP;免疫小鼠制备NDV NP特异性单抗;单抗经HRP标记和配对筛选,建立NDV NP ELISA,分析其特异性、灵敏度、精密度、准确度和检测线性,并分析本方法定量检测的NP含量与PFU病毒滴度的定量相关性。结果建立基于单抗3C10和4E7的NDV NP ELISA,其定量检测NDV rNP的最佳线性范围为0.015~0.250μg/ml(R2=0.9974),回收率在88.4%~106.01%,变异系数小于3.4%;该方法具有良好特异性;该方法定量检测NDV抗原含量与PFU病毒感染滴度有较好的相关性(R2=0.9209)。结论建立NDV NP ELISA,可准确定量检测NDV病毒中的NP抗原含量,为NDV病毒含量的测定提供一种可靠简便的分析方法。; 关键词新城疫病毒核蛋白单克隆抗体定量检测酶联免疫吸附测定; Keywords Newcastle disease virus NP protein monoclonal antibody quantitative assay enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）; 分类号 R372 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名毕赤酵母分泌表达嵌合HEV表位的HBcAg颗粒: 5; 作者章建楠李少伟杨坤宇何芳萍唐明顾颖王颖彬杜海莲张军夏宁邵; 机构厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心; 出处《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期107-112,共6页; 基金国家863重点项目(2006AA020905) 国家自然科学基金(30600106,30500092) 福建省青年科技人才创新项目(2003J023)资助; 文摘在毕赤酵母分泌表达嵌合有HEV受体相关表位12A10的HBcAg蛋白,经甲醇诱导后的培养液上清通过切向流浓缩、更换缓冲液后,进行疏水层析纯化.CsCl等密度梯度离心测得分泌的重组颗粒的密度为1.32 g/mL.透射电镜观察显示,纯化的重组颗粒为均一的直径30 nm左右的空心颗粒.小鼠免疫实验表明,纯化颗粒免疫8周后鼠血清中的特异性12A10抗体滴度可达到1.6×105,并且重组颗粒较好地呈递了HEV受体相关的非免疫优势表位.本文的结果为毕赤酵母胞外分泌表达其它大尺度的重组蛋白颗粒提供了参考,为研究携带表位多肽的疫苗载体提供了范例.; 关键词乙肝病毒核心抗原融合蛋白毕赤酵母分泌表达; Keywords HBcAg fusion protein Pichia pastoris secretion expression; 分类号 Q813 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人乳头瘤病毒假病毒制备方法的优化	郑舟周国栋张雅丽张涛杨炳春邱竹英程通张军夏宁邵	《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2009	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	梅毒螺旋体47ku抗原的分段表达及抗原表位分析	郭清顺李廷栋熊君辉周国梁葛胜祥李少伟张军夏宁邵	《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	高特异性人血清白蛋白化学发光免疫分析方法的建立	张雅丽袁伦志王腾云刘旋吴坤张军程通夏宁邵	《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2014	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	新城疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA的初步建立	王明睿钟建平李睿王国松陈毅歆	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2017	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	毕赤酵母分泌表达嵌合HEV表位的HBcAg颗粒	章建楠李少伟杨坤宇何芳萍唐明顾颖王颖彬杜海莲张军夏宁邵	《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料