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抗人DR4、DR5单克隆抗体诱导神经胶质瘤细胞凋亡的实验研究 被引量:2
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作者 庄国洪 张长弓 +2 位作者 陶惠然 杜柏榕 朱迅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1110-1114,1118,共6页
目的:探讨抗死亡受体DR4、DR5单克隆抗体(mAb)FMU1·4、FMU1·5对3株神经胶质瘤细胞株U343(敏感株)、U138(部分敏感株)、U373(耐受株)的杀伤作用及机制。方法:采用流式细胞术、RT-PCR、免疫细胞化学法、MTT比色法、电泳、DNA倍... 目的:探讨抗死亡受体DR4、DR5单克隆抗体(mAb)FMU1·4、FMU1·5对3株神经胶质瘤细胞株U343(敏感株)、U138(部分敏感株)、U373(耐受株)的杀伤作用及机制。方法:采用流式细胞术、RT-PCR、免疫细胞化学法、MTT比色法、电泳、DNA倍体分析和Westernblot等方法。结果:DR5在U343高表达;DR4在U373低表达,U343对FMU1·5敏感并呈剂量依赖性、对FMU1·4部分敏感;U138对FMU1·5部分敏感,对FMU1·4耐受;U373对两种抗体耐受。结论:FMU1·4、FMU1·5能不同程度地诱导三株细胞凋亡,其机制与DR4、DR5、细胞色素C和FLIP的表达有关。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 死亡受体 凋亡
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纳米ZnO光催化降解溴化乙锭(EB)的初步研究 被引量:2
2
作者 向蓉 黄菊 +1 位作者 刘晔 李东辉 《环境化学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期516-518,共3页
对ZnO光催化降解溴化乙锭(EB)中的光源、反应介质、pH值、光催化剂用量、光照时间及氧化剂的加入等因素进行了考察.结果表明,在日光和紫外光照射下,EB都能得到较好的降解.在EB初始浓度50mg·l-1,pH9的水溶液中,紫外光照射240min,ZnO... 对ZnO光催化降解溴化乙锭(EB)中的光源、反应介质、pH值、光催化剂用量、光照时间及氧化剂的加入等因素进行了考察.结果表明,在日光和紫外光照射下,EB都能得到较好的降解.在EB初始浓度50mg·l-1,pH9的水溶液中,紫外光照射240min,ZnO(80mg)光催化降解EB的降解率可达到92·9%. 展开更多
关键词 溴化乙锭 ZNO 光催化 降解
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用于肿瘤血管靶向治疗的RGD/tTF融合蛋白的表达及活性鉴定 被引量:5
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作者 杨桂旺 庄国洪 +3 位作者 王阶平 李文珠 吴娜 颜江华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期327-330,共4页
目的:制备用于肿瘤血管靶向治疗的重组RGD/tTF融合蛋白,并鉴定其生物学活性。方法:利用PCR技术构建RGD与tTF的融合基因,克隆至表达载体pET22b(+),在E.coliBL21(DE3)中表达,镍亲和层析柱纯化。凝血实验和FⅩ活化实验鉴定融合蛋白中tTF的... 目的:制备用于肿瘤血管靶向治疗的重组RGD/tTF融合蛋白,并鉴定其生物学活性。方法:利用PCR技术构建RGD与tTF的融合基因,克隆至表达载体pET22b(+),在E.coliBL21(DE3)中表达,镍亲和层析柱纯化。凝血实验和FⅩ活化实验鉴定融合蛋白中tTF的活性,间接ELISA分析RGD活性。结果:获得序列正确的RGD/tTF/pET22b(+)重组子,融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中高效表达。纯化后的融合蛋白具有活化FⅩ、引起血液凝固的功能,且能与αvβ3特异性结合。结论:成功构建RGD/tTF/pET22b(+)重组子,RGD/tTF融合蛋白具有TF活性且与αvβ3特异性结合,为进一步研究其体内特异性诱发肿瘤组织血管栓塞功能创造了条件。 展开更多
关键词 TTF RGD 融合蛋白 血管栓塞
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TNFAIP8干扰质粒的构建及最佳干扰效率质粒的筛选 被引量:1
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作者 刘文明 杨晶晶 +5 位作者 胡如意 邱兴烽 石春燕 齐忠权 刘忠臣 庄国洪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期650-654,共5页
目的:构建并筛选出干扰效率最佳的TNFAIP8-shRNA-p SIREN-Retro Q干扰质粒。方法:通过生物软件选择3个TNFAIP8基因干扰位点,构建干扰质粒并测序验证,将干扰质粒及对照质粒分别转染至A549细胞,通过RT-PCR、Western blot检测干扰效率。结... 目的:构建并筛选出干扰效率最佳的TNFAIP8-shRNA-p SIREN-Retro Q干扰质粒。方法:通过生物软件选择3个TNFAIP8基因干扰位点,构建干扰质粒并测序验证,将干扰质粒及对照质粒分别转染至A549细胞,通过RT-PCR、Western blot检测干扰效率。结果:经RT-PCR和Western-Blot证实TNFAIP8-shRNA-p SIREN-Retro Q干扰质粒能有效干扰并抑制细胞内TNFAIP8基因的表达,通过流式检测发现降低TNVAIP8表达可以提高细胞对a DR5Sc Fv诱导凋亡的敏感性。结论:成功构建和设计了对TNFAIP8基因具有显著干扰效率的干扰质粒,为进一步研究TNFAIP8基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 TNFAIP8 RNA干扰 重组质粒 筛选
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大鼠腓肠肌内蛋白激酶B各亚型表达的年龄差异 被引量:1
5
作者 张兵 夏春 陈福 《中国微创外科杂志》 CSCD 2008年第3期273-275,共3页
目的研究大鼠腓肠肌内蛋白激酶B(Akt/PKB)各亚型伴随年龄变化的表达差异。方法用反转录PCR(RT-PCR)、免疫印迹(westernblotting)检测老年组(30月龄)和青年组(6月龄)大鼠腓肠肌内Akt各亚型mRNA和蛋白表达,并统计分析比较。结果(1)30月龄... 目的研究大鼠腓肠肌内蛋白激酶B(Akt/PKB)各亚型伴随年龄变化的表达差异。方法用反转录PCR(RT-PCR)、免疫印迹(westernblotting)检测老年组(30月龄)和青年组(6月龄)大鼠腓肠肌内Akt各亚型mRNA和蛋白表达,并统计分析比较。结果(1)30月龄组大鼠腓肠肌内Akt1与Akt2的mRNA水平均高于6月龄组(t=7.124,P=0.000;t=2.598,P=0.021),Akt3差异无显著性(t=0.460,P=0.653)。(2)两组间Akt1蛋白表达水平无显著变化(t=0.469,P=0.646),30月龄组Akt1的Thr308磷酸化水平低于6月龄组的表达,有显著差异(t=-9.861,P=0.000);30月龄组Akt2的蛋白水平高于6月龄组的表达,有显著差异(t=7.522,P=0.000);Akt3蛋白表达在两组间无差异(t=0.058,P=0.955)。结论大鼠腓肠肌中Akt三种亚型伴随年龄改变表达存在差异,推测Akt各亚型在此过程中可能发挥不同功效。 展开更多
关键词 AKT1 AKT2 Akt3 大鼠 腓肠肌 萎缩
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Anti-DR5 mAb诱导佐剂型关节炎大鼠滑膜细胞凋亡及机理初探
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作者 李文珠 殷平 +4 位作者 张佳锴 邱劲华 胡庆中 陶惠然 庄国洪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期969-972,共4页
目的:探讨Anti-DR5 mAb诱导佐剂型关节炎(Adjuvant Arthritis,AA)大鼠滑膜细胞凋亡作用及其可能机理。方法:注射弗氏完全佐剂建立AA大鼠模型,分离并体外培养大鼠滑膜细胞。MTT检测、DNA倍体分析及流式细胞术分析Anti-DR5 mAb对大鼠滑膜... 目的:探讨Anti-DR5 mAb诱导佐剂型关节炎(Adjuvant Arthritis,AA)大鼠滑膜细胞凋亡作用及其可能机理。方法:注射弗氏完全佐剂建立AA大鼠模型,分离并体外培养大鼠滑膜细胞。MTT检测、DNA倍体分析及流式细胞术分析Anti-DR5 mAb对大鼠滑膜细胞的凋亡作用,Western blot检测大鼠滑膜细胞Caspase-3、Bcl-2蛋白的表达,Caspase抑制剂实验分析Anti-DR5 mAb对大鼠滑膜细胞凋亡作用的机制。结果:MTT实验表明Anti-DR5 mAb能抑制大鼠滑膜细胞的增殖,流式细胞术分析这种作用模式为细胞凋亡。Anti-DR5 mAb处理后的大鼠滑膜细胞中Caspase-3蛋白水平上升,Bcl-2蛋白水平下调。Cas-pase抑制剂实验证明Anti-DR5 mAb诱导大鼠滑膜细胞的凋亡是通过Caspase途径实现的。结论:Anti-DR5 mAb诱导大鼠滑膜细胞的凋亡,这种作用与滑膜细胞表面Caspase-3、Bcl-2蛋白表达相关。 展开更多
关键词 Anti-DR5 MAB 佐剂型关节炎 滑膜细胞 细胞凋亡
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TIPE2过表达质粒转染大鼠佐剂型关节炎滑膜成纤维样细胞及分析 被引量:3
7
作者 石春燕 何琼 +1 位作者 杨晶晶 庄国洪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1240-1243,1253,共5页
目的:通过TIPE2表达质粒转染大鼠佐剂型关节炎(AA)成纤维样滑膜细胞(FLS),体外研究AA的发病中TIPE2对DR5介导细胞凋亡的作用。方法:应用MIGR1/TIPE2+/+表达质粒,经脂质体法导入AA-FLS细胞中,转染72小时后,荧光显微镜检测质粒自带GFP基... 目的:通过TIPE2表达质粒转染大鼠佐剂型关节炎(AA)成纤维样滑膜细胞(FLS),体外研究AA的发病中TIPE2对DR5介导细胞凋亡的作用。方法:应用MIGR1/TIPE2+/+表达质粒,经脂质体法导入AA-FLS细胞中,转染72小时后,荧光显微镜检测质粒自带GFP基因的表达情况确认转染效率,以未作处理的AA-FLS为对照组,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TIPE2 mRNA的表达,用Western blot法检测TIPE2蛋白的表达变化,MTT法以及流式细胞术检测抗DR5功能性单链抗体ZF1对两组细胞生长的影响。结果:成功获得荧光强度90%的TIPE2过表达AA-FLS细胞,TIPE2 mRNA及蛋白表达显著提高。抗DR5单链抗体ZF1对TIPE2+/+的FLS组细胞具有明显生长抑制及凋亡诱导作用,与不作处理的FLS组相比差异显著。结论:TIPE2+/+表达质粒明显提升AA-FLS的TIPE2蛋白表达水平,TIPE2对DR5介导细胞凋亡有重要作用。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 佐剂型关节炎 成纤维样滑膜细胞 DR5 TIPE2
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荧光各向异性法均相检测酸性、中性和碱性介质中的蛋白酶 被引量:2
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作者 田嘉嘉 陈爽 李东辉 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1313-1316,共4页
建立了一种基于荧光各向异性原理均相测定蛋白酶及其抑制剂的方法。具有如下特点:灵敏度高(可测到纳克级的蛋白酶);是一种均相检测方法,可对酶反应体系进行实时跟踪检测:作用底物是蛋白酶的天然底物-蛋白质;适用的pH值范围宽(pH... 建立了一种基于荧光各向异性原理均相测定蛋白酶及其抑制剂的方法。具有如下特点:灵敏度高(可测到纳克级的蛋白酶);是一种均相检测方法,可对酶反应体系进行实时跟踪检测:作用底物是蛋白酶的天然底物-蛋白质;适用的pH值范围宽(pH2.0~10.0),可用于酸性、中性和碱性介质中蛋白酶的测定;所用荧光标记物TMRITC的发射波长(581nm)大于荧光素类(520nm),有利于减少散射光的干扰,提高了荧光各向异性测量的稳定性。还可应用于蛋白酶抑制剂的检测。 展开更多
关键词 荧光各向异性 罗丹明 蛋白酶 胰蛋白酶 胃蛋白酶 菠萝蛋白酶 蛋白酶抑制剂
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猪圆环病毒2型抗体免疫金标检测试纸的研制 被引量:6
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作者 金颜辉 黄印尧 +5 位作者 张长弓 许先明 颜江华 杨得胜 孔繁德 王生育 《福建畜牧兽医》 2007年第1期5-7,共3页
应用酶联免疫原理和胶体金层析技术,采用特殊的生产工艺,在玻璃纤维膜包被胶体金标记PCV-2抗原,在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被PCV-2抗原和兔抗PCV-2抗体,制成猪圆环病毒2型抗体免疫金标检测试纸。当待检样品阳性时,在检测... 应用酶联免疫原理和胶体金层析技术,采用特殊的生产工艺,在玻璃纤维膜包被胶体金标记PCV-2抗原,在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被PCV-2抗原和兔抗PCV-2抗体,制成猪圆环病毒2型抗体免疫金标检测试纸。当待检样品阳性时,在检测线处形成抗原抗体的免疫复合物而凝聚显色;当待检样品阴性时,检测线处不形成抗原抗体免疫复合物不显色。整个试验过程只需15min。试纸与ELISA试剂比较,两者都具有微量、特异、准确的优点,且金标试纸独具操作方便、快速和结果直观、容易判定的优点。 展开更多
关键词 猪圆环病毒 免疫 胶体金试纸
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