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大肠杆菌可溶性表达人鳞状上皮细胞癌抗原的制备及应用
被引量：
2
1
作者
陈春野
刘剑
+7 位作者
朱瑞
李姝璇
叶江辉
王玮
潘德全
徐飞海
程通
夏宁邵
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第9期252-258,共7页
旨在建立基于大肠杆菌表达系统的高效可溶性表达人鳞状上皮细胞癌抗原(SCCAg)方法,获得具有较好活性的重组SCCAg抗原并应用于建立抗原检测方法。基于pGEX-6P-1载体和大肠杆菌E.coliER2566菌株开展重组SCCAg抗原可溶性表达纯化方法研究,...
旨在建立基于大肠杆菌表达系统的高效可溶性表达人鳞状上皮细胞癌抗原(SCCAg)方法,获得具有较好活性的重组SCCAg抗原并应用于建立抗原检测方法。基于pGEX-6P-1载体和大肠杆菌E.coliER2566菌株开展重组SCCAg抗原可溶性表达纯化方法研究,评价纯化抗原活性,筛选特异性单克隆抗体,初步建立并评价SCCAg抗原检测方法。结果显示,pGEX-6P-1载体和E.coliER2566菌株可用于建立较高效的可溶性表达和纯化SCCAg抗原的方法,获得了具有较高纯度和活性的重组SCCAg抗原,筛选获得特异性单克隆抗体并初步建立了SCCAg管式化学发光检测方法。建立了有效的基于大肠杆菌表达系统的可溶性表达和纯化SCCAg的方法。
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关键词
人鳞状上皮细胞癌抗原
大肠杆菌表达系统
可溶性表达
单克隆抗体
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职称材料
以乙肝病毒核心蛋白为载体制备肠道病毒71型非结构蛋白3D单克隆抗体
2
作者
李永超
朱瑞
+6 位作者
徐龙发
巫洋涛
赵欢
吴坤
刘东晓
程通
夏宁邵
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第9期1341-1345,共5页
目的:预测肠道病毒71型(EV71)非结构蛋白3D的表位,以HBc蛋白为载体展示多肽,制备并鉴定抗EV71-3D的特异性单克隆抗体(m Ab)。方法:应用生物信息学方法分析预测出EV71 3D蛋白亲水性和免疫原性指数较高的多肽片段,并运用HBc颗粒型蛋白载...
目的:预测肠道病毒71型(EV71)非结构蛋白3D的表位,以HBc蛋白为载体展示多肽,制备并鉴定抗EV71-3D的特异性单克隆抗体(m Ab)。方法:应用生物信息学方法分析预测出EV71 3D蛋白亲水性和免疫原性指数较高的多肽片段,并运用HBc颗粒型蛋白载体展示肽段,构建多肽融合蛋白,免疫BALB/c雌鼠,通过杂交瘤技术和亲和层析技术制备和纯化抗EV71-3D蛋白的特异性m Ab,用间接ELISA、ELISPOT、IFA和IHC对m Ab的性质进行初步鉴定。结果:构建表达分别嵌合3D蛋白34~43位氨基酸残基、61~76位氨基酸残基、151~164位氨基酸残基的HBc重组蛋白,免疫并经过多轮克隆化筛选,获得抗EV71-3D单克隆抗体3E1,其亚类为Ig G2a;免疫荧光试验、ELISPOT法和免疫组织化学染色结果显示其可与EV71特异性结合。结论:成功制备可特异性识别EV71的单克隆抗体3E1,为病毒的检测及进一步研究3D蛋白的功能奠定了基础,同时还验证了生物信息学技术与HBc颗粒型载体展示多肽技术相结合可快速高效地制备单克隆抗体。
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关键词
乙肝病毒核心蛋白
肠道病毒71型
非结构蛋白3D
单克隆抗体
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职称材料
题名
大肠杆菌可溶性表达人鳞状上皮细胞癌抗原的制备及应用
被引量：
2
1
作者
陈春野
刘剑
朱瑞
李姝璇
叶江辉
王玮
潘德全
徐飞海
程通
夏宁邵
机构
厦门大学公共卫生学院分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心
厦门
万泰凯瑞生物
技术
有限公司
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第9期252-258,共7页
基金
国家高技术研究发展计划("863"计划)(2011AA02A101)
文摘
旨在建立基于大肠杆菌表达系统的高效可溶性表达人鳞状上皮细胞癌抗原(SCCAg)方法,获得具有较好活性的重组SCCAg抗原并应用于建立抗原检测方法。基于pGEX-6P-1载体和大肠杆菌E.coliER2566菌株开展重组SCCAg抗原可溶性表达纯化方法研究,评价纯化抗原活性,筛选特异性单克隆抗体,初步建立并评价SCCAg抗原检测方法。结果显示,pGEX-6P-1载体和E.coliER2566菌株可用于建立较高效的可溶性表达和纯化SCCAg抗原的方法,获得了具有较高纯度和活性的重组SCCAg抗原,筛选获得特异性单克隆抗体并初步建立了SCCAg管式化学发光检测方法。建立了有效的基于大肠杆菌表达系统的可溶性表达和纯化SCCAg的方法。
关键词
人鳞状上皮细胞癌抗原
大肠杆菌表达系统
可溶性表达
单克隆抗体
Keywords
human squamous cell carcinoma antigen
Escherichia coli expression system
soluble expression
monoclonal antibody
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
以乙肝病毒核心蛋白为载体制备肠道病毒71型非结构蛋白3D单克隆抗体
2
作者
李永超
朱瑞
徐龙发
巫洋涛
赵欢
吴坤
刘东晓
程通
夏宁邵
机构
厦门大学
公共
卫生
学院
分子
疫苗
学
与分子
诊断
学
国家
重点
实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第9期1341-1345,共5页
基金
国家自然科学基金项目(No.31670933,No.81371817)资助
文摘
目的:预测肠道病毒71型(EV71)非结构蛋白3D的表位,以HBc蛋白为载体展示多肽,制备并鉴定抗EV71-3D的特异性单克隆抗体(m Ab)。方法:应用生物信息学方法分析预测出EV71 3D蛋白亲水性和免疫原性指数较高的多肽片段,并运用HBc颗粒型蛋白载体展示肽段,构建多肽融合蛋白,免疫BALB/c雌鼠,通过杂交瘤技术和亲和层析技术制备和纯化抗EV71-3D蛋白的特异性m Ab,用间接ELISA、ELISPOT、IFA和IHC对m Ab的性质进行初步鉴定。结果:构建表达分别嵌合3D蛋白34~43位氨基酸残基、61~76位氨基酸残基、151~164位氨基酸残基的HBc重组蛋白,免疫并经过多轮克隆化筛选,获得抗EV71-3D单克隆抗体3E1,其亚类为Ig G2a;免疫荧光试验、ELISPOT法和免疫组织化学染色结果显示其可与EV71特异性结合。结论:成功制备可特异性识别EV71的单克隆抗体3E1,为病毒的检测及进一步研究3D蛋白的功能奠定了基础,同时还验证了生物信息学技术与HBc颗粒型载体展示多肽技术相结合可快速高效地制备单克隆抗体。
关键词
乙肝病毒核心蛋白
肠道病毒71型
非结构蛋白3D
单克隆抗体
Keywords
Hepatitis B virus core protein
Enterovirus 71
Non-structural protein 3D
Monoclonal antibody
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大肠杆菌可溶性表达人鳞状上皮细胞癌抗原的制备及应用
陈春野
刘剑
朱瑞
李姝璇
叶江辉
王玮
潘德全
徐飞海
程通
夏宁邵
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
以乙肝病毒核心蛋白为载体制备肠道病毒71型非结构蛋白3D单克隆抗体
李永超
朱瑞
徐龙发
巫洋涛
赵欢
吴坤
刘东晓
程通
夏宁邵
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
0
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