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肌细胞增强因子2A CAG重复序列的改变与其细胞学定位功能的相关性研究
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作者 戴大鹏 周晓阳 +2 位作者 郑君德 张铁梅 蔡剑平 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2009年第3期194-197,共4页
目的构建肌细胞增强因子2A(MEF2A)/绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体,检测其在Hela和293T细胞中的表达,探讨MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其细胞学定位功能的相关性。方法用PCR法扩增野生型MEF2A基因全长cDNA序列,以及... 目的构建肌细胞增强因子2A(MEF2A)/绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体,检测其在Hela和293T细胞中的表达,探讨MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其细胞学定位功能的相关性。方法用PCR法扩增野生型MEF2A基因全长cDNA序列,以及其他含4~15个CAG三联核苷酸重复序列的变异型MEF2A全长cDNA序列;将上述12种MEF2A全长cDNA序列分别克隆入带有GFP报告基因的真核表达载体pEGFP-Cl,构建MEF2A野生型融合表达质粒pEGFP-MEF2A、变异型融合表达质粒pEGFP-MEF2A-CAGr;通过脂质体介导的方法将以上质粒转染到Hela和293T细胞,荧光显微镜检测GFP蛋白的表达。结果构建成功与GFP融合的野生型及变异型MEF2A蛋白表达质粒共12种用于细胞学定位功能研究,体外实验结果显示,上述12种MEF2A蛋白均定位于细胞核内。结论 MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变不会影响其细胞内的定位功能。 展开更多
关键词 突变 肌细胞 细胞学 质粒 转染 绿色荧光蛋白质类
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线粒体突变和心血管疾病等的关系研究进展 被引量:3
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作者 于君 杨泽 高政南 《中国心血管杂志》 2008年第1期69-71,共3页
线粒体是使细胞能量生成的场所,线粒体基因组(mitochondrial DNA,mtDNA)编码参与线粒体呼吸链的13个蛋白亚基,2个rRNA和22个tRNA。mtDNA突变是引起多因素疾病和部分遗传疾病的重要原因之一,本文介绍线粒体基因组学、mtDNA疾病模型,mtDN... 线粒体是使细胞能量生成的场所,线粒体基因组(mitochondrial DNA,mtDNA)编码参与线粒体呼吸链的13个蛋白亚基,2个rRNA和22个tRNA。mtDNA突变是引起多因素疾病和部分遗传疾病的重要原因之一,本文介绍线粒体基因组学、mtDNA疾病模型,mtDNA突变导致心血管疾病等的临床特征及其治疗和预防的研究进展。 展开更多
关键词 线粒体 突变 心血管疾病
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聚乙二醇-过氧化氢酶在小鼠心肌肥厚和损伤中的保护作用 被引量:3
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作者 沈涛 阮杨 +3 位作者 丁铃 朱玉萍 满永 王抒 《中国心血管杂志》 2013年第2期111-115,共5页
目的观察聚乙二醇-过氧化氢酶在异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚和损伤中的保护作用。方法以异丙肾上腺素建立C57BL/6小鼠心肌肥厚和心肌损伤的模型,通过二氢乙啶染色、蛋白质印迹法、实时定量逆转录聚合酶链反应、Masson Trichrome染色... 目的观察聚乙二醇-过氧化氢酶在异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚和损伤中的保护作用。方法以异丙肾上腺素建立C57BL/6小鼠心肌肥厚和心肌损伤的模型,通过二氢乙啶染色、蛋白质印迹法、实时定量逆转录聚合酶链反应、Masson Trichrome染色等实验,检测聚乙二醇-过氧化氢酶在异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚和损伤模型中对氧自由基生成、细胞凋亡、心肌纤维化、超氧化物歧化酶1(SOD-1)表达的影响。结果小鼠异丙肾上腺素皮下注射后,发生心肌肥厚和缺血损伤,心肌组织氧自由基生成明显升高,SOD-1的表达明显降低,心肌细胞凋亡增加,发生心肌纤维化,与对照组对比差异有统计学意义(均为P<0.01);与异丙肾上腺素处理组比较,聚乙二醇-过氧化氢酶(30 000 U.kg-1.d-1)预处理组心肌肥厚改善,氧自由基生成明显降低,SOD-1水平明显提高,细胞凋亡减少,心肌纤维化降低,差异有统计学意义(均为P<0.05)。结论抗氧化剂聚乙二醇-过氧化氢酶可以有效进入心肌组织,抑制氧自由基生成、减少心肌细胞凋亡和心肌纤维化,对异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌肥厚和损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 心肌病 肥厚性 聚乙二醇-过氧化氢酶 异丙肾上腺素 氧自由基
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长期温和的能量限制改善C57BL/6小鼠高脂喂养后的脂代谢紊乱 被引量:1
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作者 李国平 唐蔚青 +3 位作者 李红霞 满永 黎健 陈保生 《中国心血管杂志》 2012年第2期124-127,共4页
目的探讨温和的能量限制对小鼠脂代谢的影响。方法给予3周龄C57BL/6小鼠高脂饮食12周后,按随机数字表法分组,对照组不限制饮食,实验组小鼠喂食对照组小鼠摄食量的85%,喂养12周后,收集小鼠血浆并冻存肝脏。抽提肝脏脂质并用酶法检测脂质... 目的探讨温和的能量限制对小鼠脂代谢的影响。方法给予3周龄C57BL/6小鼠高脂饮食12周后,按随机数字表法分组,对照组不限制饮食,实验组小鼠喂食对照组小鼠摄食量的85%,喂养12周后,收集小鼠血浆并冻存肝脏。抽提肝脏脂质并用酶法检测脂质含量,油红O染色观察肝脏的脂质沉积;用实时定量聚合酶链反应法检测肝脏脂肪代谢相关基因的表达;并测定LDL、TG分泌速率和小鼠原代肝细胞脂肪酸氧化速率。结果实验组小鼠与对照组小鼠相比,在限食12周后:(1)体质量:(32.8±1.3)g比(38.9±3.5)g(P=0.007);(2)血浆TG水平:(0.26±0.01)mmol/L比(0.41±0.02)mmol/L(P=0.02),肝脏内TG含量:(435.7±26.3)μg/mg蛋白质比(812.4±38.2)μg/mg蛋白质(P=0.001);(3)实时定量聚合酶链反应结果显示,肝脏内长链脂肪酸和胆固醇合成相关基因mRNA表达水平无变化,但脂肪酸氧化基因mRNA表达水平显著增加(P=0.03)。肝脏原代细胞内脂肪酸的氧化速度增加了53.1%±7.2%(P=0.01),血浆游离脂肪酸水平:(0.41±0.04)mmol/L比(0.62±0.02)mmol/L(P=0.04);(4)肝脏中胆固醇:(85.2±9.8)μg/mg蛋白质比(169.3±13.5)μg/mg蛋白质(P=0.001),但血浆TC水平无显著改变。结论长期温和的能量限制可以有效缓解高脂饮食引起的小鼠肝脏的脂肪变性,这与肝脏中游离脂肪酸的氧化速度升高及摄取量降低密切相关;同时降低了小鼠血浆TG的水平,但没有改变血浆TC水平。 展开更多
关键词 能量限制 脂代谢 脂肪酸氧化速率
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血清可替宁水平与冠心病的关系 被引量:1
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作者 杨睿悦 刘君萌 +5 位作者 何青 国汉邦 李红霞 王抒 董军 陈文祥 《中国心血管杂志》 2012年第3期167-171,共5页
目的研究血清可替宁水平与冠心病的关系,探讨其在冠心病中的临床应用价值。方法按冠状动脉造影结果将149例研究对象分为冠心病组(97例)和非冠心病对照组(52例),进行病例对照研究,同位素稀释串联质谱法(isotope dilution tandem mass spe... 目的研究血清可替宁水平与冠心病的关系,探讨其在冠心病中的临床应用价值。方法按冠状动脉造影结果将149例研究对象分为冠心病组(97例)和非冠心病对照组(52例),进行病例对照研究,同位素稀释串联质谱法(isotope dilution tandem mass spectrometry,ID-LC/MS/MS)测定血清可替宁浓度,分析可替宁与冠心病及其他危险因素的关系。结果 149例行冠状动脉造影患者血清可替宁浓度呈偏态和尖态分布(偏度2.90,峰度7.96),吸烟者的可替宁浓度为12.64(0.91~99.61)μg/L,显著高于非吸烟者[0.22(0.12~0.51)μg/L,P<0.001]。高可替宁水平组(>10.00μg/L)患冠心病的风险显著高于低可替宁水平组(<1.00μg/L)(OR=2.94,95%CI:1.11~7.78,P<0.05);且随着血清可替宁水平的升高,OR值增大呈量效关系(均为P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,糖尿病、血脂异常及可替宁为最显著的危险因素(均为P<0.05)。血清可替宁与吸烟(r=0.656,P<0.001)和白细胞计数(WBC,r=0.257,P=0.010)呈显著正相关,与HDL-C(r=-0.184,P=0.025)和HDL2-C(r=-0.217,P=0.008)呈显著负相关。结论血清可替宁水平能够有效地反映吸烟的暴露水平,其水平升高能够增加患冠心病的危险。 展开更多
关键词 冠状动脉心脏病 吸烟 可替宁
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