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胸腺肽α_1活性片段和其自旋标记衍生物的合成及免疫活性研究 被引量:6
1
作者 王勤 杨金波 +2 位作者 沈剑敏 文永均 胡晓愚 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第2期214-218,共5页
报道了胸腺肽α_1活性片段Thymosinα_1[Lys(23)](23-27)OH和其自旋标记衍生物的合成及对实验动物免疫功能的影响。其氨基酸序列分别为H_2N-Lys-Glu-Glu-Ala-Glu-OH,用Thyα... 报道了胸腺肽α_1活性片段Thymosinα_1[Lys(23)](23-27)OH和其自旋标记衍生物的合成及对实验动物免疫功能的影响。其氨基酸序列分别为H_2N-Lys-Glu-Glu-Ala-Glu-OH,用Thyα_1[Lys^(23)]表示,修饰物为Glu-OH),用Thyα_1[Lys^(23)]·R表示。HPLC测得该肽的纯度在90%以上,ESR谱测定自旋标记衍生物给出氮氧自由基信号,氨基酸组成与预期值相符。实验小鼠腹腔连续注射剂量为0.1、1、10、100和1000μg/kg的该肽10天后,发现腹腔巨噬细胞吞噬功能、ERFC阳性率及血清溶血素含量明显升高,且最佳剂量在0.1-10μg/kg范围。实验结果表明人工合成胸腺肽α_1活性片段及其自旋标记衍生物具有显著的免疫促进活性。 展开更多
关键词 胸腺肽Α 活性片段 自旋标记 免疫活性 合成
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猪繁殖和呼吸系统综合征病毒的分子生物学研究进展 被引量:5
2
作者 窦永喜 王云 《动物医学进展》 CSCD 2001年第4期21-24,共4页
本文综述近年来有关猪繁殖和呼吸系统综合征病毒分子生物学方面的研究概况 ,内容涉及病毒基因组、蛋白及其变异 。
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 分子生物学 研究进展 病毒基因组 PRRSV
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肺霉形体的微生物学特性研究
3
作者 王保宁 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 1998年第1期13-16,共4页
肺霉形体在37℃,pH7.8的霉形体基础肉汤中,相对温度65±5%,培养72~96h时生长最佳。除基础营养物质外,添加15%以上血清使其生长旺盛,添加兔、马和小牛血清效果差异不显著;1%和0.3%琼脂培养基能观察... 肺霉形体在37℃,pH7.8的霉形体基础肉汤中,相对温度65±5%,培养72~96h时生长最佳。除基础营养物质外,添加15%以上血清使其生长旺盛,添加兔、马和小牛血清效果差异不显著;1%和0.3%琼脂培养基能观察到典型菌落;针头滤膜不能完全去除菌体;56℃作用5min即死,-38℃可存活一年以上;基因组为6.28×108Da;SDS-PAGE蛋白的图谱为15条带,比关节炎霉形体复杂。 展开更多
关键词 肺霉形体 微生物学 特性
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乙型肝炎表面抗原基因DNA介导的体液免疫初步研究 被引量:3
4
作者 沈心亮 李文辉 +1 位作者 蒋琳 应莲芳 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期186-189,共4页
用PCR技术从纯化的乙型肝炎病毒核酸中扩增出preS2-S基因,并将其定向克隆于真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建成带有完整的乙肝表面前S2抗原基因和S基因的重组质粒.重组质粒经酶切及部分序列分析鉴定后,瞬时... 用PCR技术从纯化的乙型肝炎病毒核酸中扩增出preS2-S基因,并将其定向克隆于真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建成带有完整的乙肝表面前S2抗原基因和S基因的重组质粒.重组质粒经酶切及部分序列分析鉴定后,瞬时转染小鼠L细胞,ELISA法检测到培养上清液有HBsAg表达.用纯化的重组质粒静脉、肌肉和皮下注射免疫BALB/c小鼠,首次接种质粒DNA3周后,血清抗体开始出现,再次加强2周后,阳性率明显提高. 展开更多
关键词 DNA免疫 HBSAG 乙肝表面抗原 体液免疫 基因疫苗
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17β-雌二醇诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中信号转导的初步研究 被引量:3
5
作者 王裕 王玮 +3 位作者 闻婕 王超美 胡建成 郑海金 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期92-96,共5页
研究了 17β -雌二醇 ( 17β - E2 )诱导的小鼠细胞凋亡与第二信使分子 Ca2 +/Ca M的关系 .17β - E2 能诱导胸腺细胞凋亡 ,用 EGTA螯合胞外 Ca2 +时 ,17β - E2 所诱导的细胞凋亡则受到抑制 ;17β- E2 能导致胸腺细胞内游离 Ca2 +的浓... 研究了 17β -雌二醇 ( 17β - E2 )诱导的小鼠细胞凋亡与第二信使分子 Ca2 +/Ca M的关系 .17β - E2 能诱导胸腺细胞凋亡 ,用 EGTA螯合胞外 Ca2 +时 ,17β - E2 所诱导的细胞凋亡则受到抑制 ;17β- E2 能导致胸腺细胞内游离 Ca2 +的浓度迅速而持久地升高 ;相对正常对照组而言 ,17β- E2处理组胞内 Ca M含量显著下降 .结果表明 :17β - E2 诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中 ,可能是通过Ca2 +/Ca M这个信号转导途径发挥作用 . 展开更多
关键词 17Β-雌二醇 细胞凋亡 CAM 钙离子 性激素
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ELISA法对神经生长因子在大鼠体内药代动力学的研究 被引量:3
6
作者 谢溱 沈心亮 +2 位作者 辛芳 吴勇杰 杨明巧 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期268-270,共3页
目的研究神经生长因子(NGF)在大鼠体内的药代动力学。方法制备兔抗NGF抗体,用双抗体夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定大鼠血浆NGF浓度。结果大鼠iv32μg·kg-1后血药浓度时间曲线符合二室开放模型... 目的研究神经生长因子(NGF)在大鼠体内的药代动力学。方法制备兔抗NGF抗体,用双抗体夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定大鼠血浆NGF浓度。结果大鼠iv32μg·kg-1后血药浓度时间曲线符合二室开放模型,T1/2α为0330h,T1/2β为15h。大鼠NGFim32μg·kg-1后血药浓度时间曲线符合一室一级吸收,血浆NGF浓度达峰时间为371h,T1/2(Ke)为430h,24h吸收百分率为691%。结论NGF肌注吸收良好,血浆NGF浓度可在较长时间内维持在有效浓度以上。 展开更多
关键词 神经生长因子 药代动力学 ELISA
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艰难梭菌A毒素的抗肿瘤活性研究 被引量:3
7
作者 马雪瑛 郑荣梁 孟筱琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期458-461,共4页
目的 研究艰难梭菌A毒素的抗肿瘤活性。方法 从艰难梭菌VPI 1 0 4 63菌株脑心浸液培养物 ,经甲状腺球蛋白亲和层析和QSepharose层析提纯得到精制A毒素。通过应用苔盼蓝染色测定细胞脱落率 ,四氮噻唑蓝 (MTT)比色测定细胞存活率 ,[3H] ... 目的 研究艰难梭菌A毒素的抗肿瘤活性。方法 从艰难梭菌VPI 1 0 4 63菌株脑心浸液培养物 ,经甲状腺球蛋白亲和层析和QSepharose层析提纯得到精制A毒素。通过应用苔盼蓝染色测定细胞脱落率 ,四氮噻唑蓝 (MTT)比色测定细胞存活率 ,[3H] Uridine(尿嘧啶 )测定细胞膜损伤 ,光学、荧光显微镜观察细胞的形态变化等方法测定比较A毒素对TPC 1细胞 (人甲状腺乳头癌细胞 )和Vero细胞 (非洲绿猴肾细胞 )的作用。结果 在A毒素的作用下 ,TPC 1细胞的增长抑制、凋亡指数、细胞脱落率及细胞膜损伤情况均高于Vero细胞 ,且这种作用具有时间和剂量依赖性。结论 A毒素对TPC 1细胞的杀伤作用远大于对Vero细胞的作用。以上结果对细菌毒素的开发利用。 展开更多
关键词 艰难梭菌 A毒素 抗肿瘤活性
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幽门螺杆菌致人胃病的小鼠模型研究 被引量:2
8
作者 宁磊 王保宁 +2 位作者 赵雅静 陈翠萍 刘德培 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2000年第4期193-197,共5页
目的建立幽门螺杆菌致人胃病的小鼠模型。方法用Ⅰ型幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)对三种SPF级小鼠(BALB/c、NIH、KM)采用循环滴喂攻击等方法处理,从菌体定值、抗体水平、病理变化三个方... 目的建立幽门螺杆菌致人胃病的小鼠模型。方法用Ⅰ型幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)对三种SPF级小鼠(BALB/c、NIH、KM)采用循环滴喂攻击等方法处理,从菌体定值、抗体水平、病理变化三个方面分14、 39、 69、 105 d进行测试。结果 Hp可持续定植于各供试小鼠胃粘膜上,并刺激 Hp抗体(IgG)维持一较高水平, Hp在小鼠上主要引起以胃粘膜变性坏死为主,伴有淋巴细胞浸润的炎症反应,这为Hp致人胃病的症状相似。结论为Hp的致病机理,治疗药物和疫苗研究提供了良好的小动物模型。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 SPF小鼠 胃病模型
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兰州地区实验动物肺支原体感染调查和分离鉴定 被引量:2
9
作者 王保宁 宁磊 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第4期239-241,共3页
目的 了解兰州地区啮齿类实验动物的肺支原体感染情况和感染菌株。方法 用分离培养法对兰州地区 6 40只啮齿类实验动物肺支原体的感染情况分春夏秋冬进行调查 ,并对分离株进行克隆纯化 ,从形态学 ,生化特性和血清学方面进行鉴定。结... 目的 了解兰州地区啮齿类实验动物的肺支原体感染情况和感染菌株。方法 用分离培养法对兰州地区 6 40只啮齿类实验动物肺支原体的感染情况分春夏秋冬进行调查 ,并对分离株进行克隆纯化 ,从形态学 ,生化特性和血清学方面进行鉴定。结果 肺支原体在普通级小鼠中的感染率为 2 3% ,普通级豚鼠、地鼠、大鼠和清洁级小鼠未发现有感染 ,且感染率与季节无明显相关性。 展开更多
关键词 支原体感染 实验动物 调查 小鼠 感染率 兰州地区 普通级 分离株 分离鉴定 夏秋
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ELISA对毒理实验动物血清中神经生长因子抗体动态的研究
10
作者 沈心亮 苏彩霞 +1 位作者 史中信 扈晶 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期158-160,共3页
用 ELISA法对神经生长因子 (NGF)毒理实验动物犬和大鼠血清作了抗 - NGF抗体检测 .结果表明在大鼠血清中没有发现抗 - NGF抗体 ,但犬血清中有相应的抗体产生 ,并随注射剂量增加和注射时间延长而逐渐升高 .另外 ,对 EL ISA间接法和竞争... 用 ELISA法对神经生长因子 (NGF)毒理实验动物犬和大鼠血清作了抗 - NGF抗体检测 .结果表明在大鼠血清中没有发现抗 - NGF抗体 ,但犬血清中有相应的抗体产生 ,并随注射剂量增加和注射时间延长而逐渐升高 .另外 ,对 EL ISA间接法和竞争抑制法进行了比较 ,结果表明 ,竞争抑制法明显优于间接法 ,而且是一种简便、特异的好方法 . 展开更多
关键词 神经生长因子 抗体 ELISA 血清 毒理实验动物
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空泡毒素对小鼠胃损伤的组织病理学研究
11
作者 王保宁 宁磊 +2 位作者 赵雅静 陈翠萍 刘德培 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期83-84,共2页
目的 :了解幽门螺杆菌 (Hp)分泌的空泡毒素 (VacA)对活体鼠胃的致病性。方法 :采用活性和灭活的HpVacA直接灌喂无特定病原菌 (SPF)级小鼠 (B/C ,NIH ,KM) ,分 14d、3 9d、69d和 10 5d进行胃组织病理学检查。结果 :活性VacA可致小鼠胃损... 目的 :了解幽门螺杆菌 (Hp)分泌的空泡毒素 (VacA)对活体鼠胃的致病性。方法 :采用活性和灭活的HpVacA直接灌喂无特定病原菌 (SPF)级小鼠 (B/C ,NIH ,KM) ,分 14d、3 9d、69d和 10 5d进行胃组织病理学检查。结果 :活性VacA可致小鼠胃损伤 ,其中以B/C胃病变最严重。主要表现为胃组织的变性、坏死和胃壁细胞的空泡化 ,而灭活的VacA则无明显此类作用。结论 :活性VacA可能是Hp致小鼠胃损伤的重要毒性因子 ,其对机体的作用与个体品系背景有关 ,在B/C、KM和NIH 3种鼠中 ,以B/C最敏感。 展开更多
关键词 毒素类 小鼠 螺杆菌 幽门
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宿主和病原体间遗传学关系小鼠动物模型研究进展
12
作者 景志忠 宁磊 张永兴 《动物医学进展》 CSCD 2004年第4期45-49,共5页
遗传因子决定着各种病原引起的感染性疾病的最终结果。人类基因的抗性和易感性的分子机制在许多方面还不清楚 ,宿主对某一种病原的反应的影响多基因控制就变得更为复杂。动物模型在宿主与病原之间复杂遗传系统解剖成单一的因素控制方面... 遗传因子决定着各种病原引起的感染性疾病的最终结果。人类基因的抗性和易感性的分子机制在许多方面还不清楚 ,宿主对某一种病原的反应的影响多基因控制就变得更为复杂。动物模型在宿主与病原之间复杂遗传系统解剖成单一的因素控制方面具有巨大的潜力。在克隆和鉴定宿主抗性基因方面 ,小鼠能成为一个无价的实验工具。通过三个途径能够建立人类感染性疾病的小鼠模型。 (1 )目标基因小鼠突变体的培育 ;(2 )在突变小鼠中 ,宿主抗性基因位置克隆 ;(3 )绘制和描述控制宿主与病原之间复杂性的数量特性位点图。文章通过上述三种方法的介绍进一步阐述人的感染性疾病 ,特别对细菌感染性疾病的抗性或易感性的机制研究。 展开更多
关键词 宿主 病原体 遗传因子 小鼠动物模型 感染性疾病 Α-肿瘤坏死因子 Γ-干扰素
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多瘤病毒分离株的研究
13
作者 赵宜为 赵晓琰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期54-55,共2页
关键词 多瘤病毒 分离株 野生型病毒株 遗传学
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葡萄的随机扩增多态性DNA研究 被引量:6
14
作者 刘茜 刘玉冰 +1 位作者 韩德胜 王刚 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期65-68,共4页
采用随机扩增多态性DNA(RAPD)对11个样品进行了研究。这11个品种包含1个欧美杂交种,一个中国野生种(Vitis. piasezkii Var. pagnucii),9个欧亚种(Vitis. vinifera L)。选择了多态性好的7个10碱基寡聚糖核苷酸作为随机扩增的引物,在琼脂... 采用随机扩增多态性DNA(RAPD)对11个样品进行了研究。这11个品种包含1个欧美杂交种,一个中国野生种(Vitis. piasezkii Var. pagnucii),9个欧亚种(Vitis. vinifera L)。选择了多态性好的7个10碱基寡聚糖核苷酸作为随机扩增的引物,在琼脂糖凝胶电泳上产生了76条带,其中63条具有多态性。各引物产生的条带从6到13不等,平均为10.86条/模板,其中9条具有多态性,表明葡萄基因的多态性十分丰富。通过遗传相似性分析表明11个葡萄基因的Nei氏相似性系数分布为0.1027~1.1787,平均相似系数为0.459。通过非加权算术平均数聚类法,获得了11个葡萄品种之间的遗传关系树图,欧亚种群,东亚种群和欧美杂种在遗传关系树图上被成功地聚为3组。本实验发现欧亚种和欧美杂种亲缘关系较近,而和中国野生种亲缘关系远。在欧亚种中,520A和SO_4的遗传距离最近,其次是井川1010和美人指,最大的遗传距离发生在桑无核和其他欧亚种之间。 展开更多
关键词 欧亚种 葡萄 野生种 遗传关系 遗传距离 亲缘关系 引物 随机扩增多态性DNA 琼脂糖凝胶电泳 基因
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沙门氏菌单克隆抗体研究 Ⅰ.杂交瘤细胞系的建立 被引量:2
15
作者 蔡玲民 吴采菲 +7 位作者 赵红 陈翠萍 刘新铭 高鸿瑞 袁皓加 张河战 马越 辜清吾 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1990年第2期22-30,共9页
用沙门氏菌O,H,Vi抗原免疫BALB/c小鼠,采用细胞融合技术,获得分泌抗沙门氏茵0-2,4,7,8,9,3,10,11和H-a,b,c,d,i及Vi抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞系29株。所产生的抗体17株属IgM,7株为IgG3,3株为IgG1,1株为IgG_(2a),1株未测;轻链除3株为... 用沙门氏菌O,H,Vi抗原免疫BALB/c小鼠,采用细胞融合技术,获得分泌抗沙门氏茵0-2,4,7,8,9,3,10,11和H-a,b,c,d,i及Vi抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞系29株。所产生的抗体17株属IgM,7株为IgG3,3株为IgG1,1株为IgG_(2a),1株未测;轻链除3株为λ链外,其余为κ链。将杂交瘤细胞所诱生的腹水,组成一套(11种)沙门氏菌诊断用单克隆抗体试剂,经用沙门氏菌属和其它肠道菌属的代表菌株作鉴定,证明具有良好的特异性和敏感性、可供初步诊断伤寒,副伤寒和鼠伤寒用。与目前常规生产的家兔诊断血清相比,具有简化生产过程,节约家兔与培养基及省时省力等优点,值得在生产上和使用上推广。 展开更多
关键词 沙门氏菌 杂交瘤 单克隆抗体
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肌苷促诱生干扰素的研究 被引量:1
16
作者 王登科 王师真 +2 位作者 李彪 傅炎 张红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第6期334-335,共2页
肌苷促诱生干扰素的研究王登科,王师真,李彪,傅炎,张红(卫生部兰州生物制品研究所兰州730046)人白细胞干扰素是具有抑制病毒复制、抗细胞增殖和调节免疫应答等作用的高活性、多功能的诱生蛋白质。那么提高IFN-α。诱导... 肌苷促诱生干扰素的研究王登科,王师真,李彪,傅炎,张红(卫生部兰州生物制品研究所兰州730046)人白细胞干扰素是具有抑制病毒复制、抗细胞增殖和调节免疫应答等作用的高活性、多功能的诱生蛋白质。那么提高IFN-α。诱导效价对IFN-α的纯化具有重要意义... 展开更多
关键词 肌苷 干扰素 促诱生作用
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沙门氏菌单克隆抗体研究 Ⅱ.诊断用成套沙门氏菌单克隆抗体的鉴定 被引量:1
17
作者 吴采菲 蔡玲民 +5 位作者 陈翠萍 赵红 张河战 辜清吾 刘新铭 马越 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1990年第2期31-36,共6页
应用淋巴细胞杂交瘤技术,制备了与沙门氏菌属诊断血清相对应的成套11种单克隆抗体诊断试剂,包括:抗O-2,4,7,9;抗H-a,b,c,d,i;抗Vi和抗A-F群“O”多价抗体。经711株已知菌种(包括沙门氏菌563株,非沙门氏茵148株)采用玻片凝集试验进行考... 应用淋巴细胞杂交瘤技术,制备了与沙门氏菌属诊断血清相对应的成套11种单克隆抗体诊断试剂,包括:抗O-2,4,7,9;抗H-a,b,c,d,i;抗Vi和抗A-F群“O”多价抗体。经711株已知菌种(包括沙门氏菌563株,非沙门氏茵148株)采用玻片凝集试验进行考核鉴定,结果证明:它们只选择性地与具有相应抗原的菌株出现快速而明显的凝集,而不与其它菌株发生交叉反应,其特异性和敏感性达到并超过目前的沙门氏茵诊断血清制检规程的要求。表明这组单克隆抗体完全可以取代以往用传统方法生产的家兔免疫诊断血清,用于沙门氏菌的初步鉴定。 展开更多
关键词 沙门氏菌 试挤箱 单克隆抗体
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肺霉形体抗原快检法的研究
18
作者 王保宁 潘光炎 吴祥林 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 1998年第2期138-143,共6页
用不同抗体建立快检肺霉形体(以下简称MP)抗原的夹心ELISA方法,并以培养法评价,研制相应的试剂盒。结果表明夹心ELISA检测方法与培养法相符率为100%,检出极限为1000菌/mL,该方法特异性高,与其它相关抗原... 用不同抗体建立快检肺霉形体(以下简称MP)抗原的夹心ELISA方法,并以培养法评价,研制相应的试剂盒。结果表明夹心ELISA检测方法与培养法相符率为100%,检出极限为1000菌/mL,该方法特异性高,与其它相关抗原交叉反应低于33%,试剂盒稳定性较好。 展开更多
关键词 肺霉形体 夹心ELISA 试剂盒 抗原快检法
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土拉活菌苗的试制研究
19
作者 张保安 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1989年第1期2-4,共3页
本文报告了冻干土拉活菌苗的试制研究结果。该苗用F15/B弱毒菌株的白色集落,在无血培养基上培养制成。使用安全,具有良好的免疫原性。豚鼠经免疫后,能耐受我国地方性土拉强毒株(T95)800~2000MLD的攻击,保护率为100%。人体接种2个月后... 本文报告了冻干土拉活菌苗的试制研究结果。该苗用F15/B弱毒菌株的白色集落,在无血培养基上培养制成。使用安全,具有良好的免疫原性。豚鼠经免疫后,能耐受我国地方性土拉强毒株(T95)800~2000MLD的攻击,保护率为100%。人体接种2个月后,血清凝集价为1:160~1:320,对人安全无害。 展开更多
关键词 土拉活菌苗 土拉强毒株 效力
全文增补中
狂犬疫苗免疫后抗体持续性及加强免疫效果观察 被引量:12
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作者 李跃忠 甘耀 +7 位作者 李萍 郑淑花 王尚斌 王德胜 邓杰 王惠兰 任雅萍 周学良 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1993年第3期37-38,共2页
材料和方法 疫苗:卫生部兰州生物制品研究所产品,批号91020,92024。 观察人群:芜湖地区初次被狗咬伤患者91人,其中男61人,女30人。年龄3至68岁,均无狂犬疫苗注射史。 免疫注射及采血:全部患者于咬伤当日注射疫苗,按常觌5针法程序。第一... 材料和方法 疫苗:卫生部兰州生物制品研究所产品,批号91020,92024。 观察人群:芜湖地区初次被狗咬伤患者91人,其中男61人,女30人。年龄3至68岁,均无狂犬疫苗注射史。 免疫注射及采血:全部患者于咬伤当日注射疫苗,按常觌5针法程序。第一针注射前和全程5针后七日各采静脉血一次,分离血清并检测。全程免疫后抗体未达到阳性水平者当即加强2针次再采血检测一次。免疫前后血清于第一次检测后冻存。 展开更多
关键词 狂犬病 疫苗 免疫学 抗体
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