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猪肾细胞源三种蛋白质对猪圆环病毒2型复制的调节作用
被引量：
2
1
作者
张辉
唐青海
+2 位作者
黄立平
危艳武
刘长明
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第11期2040-2049,共10页
为了验证猪肾细胞系(PK-15)源3种蛋白质基因(AP2α2、Elf4和ISCU)表达水平对猪圆环病毒2型(PCV2)复制的调节作用,采用RT-PCR扩增这3种蛋白质编码基因,构建真核表达载体;同时设计这3种蛋白质的RNAi片段,分别插入到pGPU6-GFP载体构建shRN...
为了验证猪肾细胞系(PK-15)源3种蛋白质基因(AP2α2、Elf4和ISCU)表达水平对猪圆环病毒2型(PCV2)复制的调节作用,采用RT-PCR扩增这3种蛋白质编码基因,构建真核表达载体;同时设计这3种蛋白质的RNAi片段,分别插入到pGPU6-GFP载体构建shRNA干扰载体。以荧光定量PCR法检测干扰效率,选取干扰效率较高的干扰载体,利用G418筛选转染真核表达载体或干扰载体后的PK-15细胞。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)法检测PCV2LG毒株在这些细胞中的复制效率。结果表明,Elf4蛋白和ISCU蛋白基因过表达能够显著增强PCV2的复制;而AP2α2蛋白基因过表达对PCV2的复制无显著影响。AP2α2、ISCU和Elf4这3种蛋白质基因被干扰表达后均可降低PCV2复制效率,表明这3种宿主细胞蛋白质对该病毒复制具有调节作用。
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关键词
猪圆环病毒2型
复制
AP2α2
Elf4
ISCU
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职称材料
题名
猪肾细胞源三种蛋白质对猪圆环病毒2型复制的调节作用
被引量：
2
1
作者
张辉
唐青海
黄立平
危艳武
刘长明
机构
中国农业科
学院
哈尔滨
兽医
研究
所
兽医
生物
技术
国家重点
实验室
/猪传染病
研究
室
南阳师范学院南阳市兽医生物工程技术研究中心/昆虫生物反应器河南省工程实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第11期2040-2049,共10页
基金
国家自然基金青年基金(31101837)
文摘
为了验证猪肾细胞系(PK-15)源3种蛋白质基因(AP2α2、Elf4和ISCU)表达水平对猪圆环病毒2型(PCV2)复制的调节作用,采用RT-PCR扩增这3种蛋白质编码基因,构建真核表达载体;同时设计这3种蛋白质的RNAi片段,分别插入到pGPU6-GFP载体构建shRNA干扰载体。以荧光定量PCR法检测干扰效率,选取干扰效率较高的干扰载体,利用G418筛选转染真核表达载体或干扰载体后的PK-15细胞。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)法检测PCV2LG毒株在这些细胞中的复制效率。结果表明,Elf4蛋白和ISCU蛋白基因过表达能够显著增强PCV2的复制;而AP2α2蛋白基因过表达对PCV2的复制无显著影响。AP2α2、ISCU和Elf4这3种蛋白质基因被干扰表达后均可降低PCV2复制效率,表明这3种宿主细胞蛋白质对该病毒复制具有调节作用。
关键词
猪圆环病毒2型
复制
AP2α2
Elf4
ISCU
Keywords
porcine circovirus type 2
replication
AP2α2
Elf4
ISCU
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪肾细胞源三种蛋白质对猪圆环病毒2型复制的调节作用
张辉
唐青海
黄立平
危艳武
刘长明
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
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