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题名斜纹夜蛾保幼激素环氧水解酶基因的克隆和原核表达
被引量：5
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作者
张丽丽
武怡琼
杨正飞
郭丽
魏佳平
阚云超
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机构
信阳师范学院生命科学学院/大别山农业生物资源保护与利用研究院
南阳师范学院/河南省伏牛山昆虫生物学实验室
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出处
《河南农业科学》
CSCD
北大核心
2018年第12期84-89,共6页
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基金
河南省科技攻关项目(182102110034)
信阳师范学院大学生科研基金项目(2017-DXS-141)
河南省伏牛山昆虫生物学实验室开放课题(201807)
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文摘
为分析斜纹夜蛾(Spodoptera litura)保幼激素环氧水解酶(Juvenile hormone epoxide hydrolase,JHEH)基因在其生长发育过程中的功能,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增SlJHEH基因的开放阅读框,并进行原核表达。SlJHEH基因开放阅读框为1 389 bp,编码462个氨基酸,预测蛋白质分子质量为52 ku,等电点为8. 68。氨基酸序列存在催化三联体Asp226、Glu402和His429氨基酸残基及阴氧离子洞Tyr297、Tyr372和HGWP花样结构氨基酸残基。系统发育树分析结果表明,Sl JHEH与棉铃虫(Helicoverpa armigera) JHEH亲缘关系最近,氨基酸序列同源性高达78%。将SlJHEH的编码区连接到原核表达载体p ET32a上,成功构建了重组载体pET32aSlJHEH,转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达。对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting检测,结果显示,斜纹夜蛾JHEH基因在大肠杆菌中得到高效且准确的表达。
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关键词
斜纹夜蛾
保幼激素环氧水解酶
克隆
序列分析
原核表达
重组蛋白
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Keywords
Spodoptera litura
Juvenile hormone epoxide hydrolase
Cloning
Sequence analysis
Prokaryotic expression
Recombinant protein
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分类号
S433.4
[农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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