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脐带间充质干细胞外泌体携载miR-4465抑制食管癌细胞的侵袭及迁移
被引量：
2
1
作者
孙峰
谢玮
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2021年第12期1252-1258,共7页
目的间质干细胞分泌的外泌体(MSC-ex)是MSC旁分泌的活性成分,在多种疾病包括肿瘤的治疗中有着重要的应用文章拟探讨人脐带间充质干细胞(MSC)外泌体携载miK-4465抑制食管癌细胞EC109侵袭、迁移的作用及机制方法分离、培养脐带MSCs并提取M...
目的间质干细胞分泌的外泌体(MSC-ex)是MSC旁分泌的活性成分,在多种疾病包括肿瘤的治疗中有着重要的应用文章拟探讨人脐带间充质干细胞(MSC)外泌体携载miK-4465抑制食管癌细胞EC109侵袭、迁移的作用及机制方法分离、培养脐带MSCs并提取MSC-ex,透射电镜、纳米颗粒分析观察外泌体的结构.Western blot检测外泌体标志蛋白CD9和CD81表达。超声法将miRNA mimics NC及miR-4465 mimics导入MSC-ex,获得miRNA mimics NC修饰MSC-ex(NC miR-ex)及miR-4465 mimics修饰MSC-ex(miR-4465-ex)。PBS、MSC-ex、miR-4465-ex分别与ECIO9共培养,采用激光共聚焦显微镜观察MSC-ex在细胞内分布,qRT-PCR检测ECl09的miR-4465水平,Transwell和划痕实验观察miR-4465 mimics转染及miR-4465-ex作用后EC109的迁移及侵袭能力,免疫印迹法检测EC109的上皮-间质化相关蛋白的表达。结果与NC miR-ex组(1.00±0.09)比较,miR-4465-ex 25 nmol/L、miR-4465-ex50nmol/L组EC109细胞中miR-4465表达水平(20_26±2.75、34.71±5.26)显著升高(P<0.01),且具有剂量依赖性。与mimicsNC组(84.67±4.60)相比,miR-4465 mimics25 nmol/L(23.67±4.14)转染组EC109细胞的迁移率明显降低(P<0.01),且miR-4465 mimics50nM(10.27±1.32)转染组EC109细胞的迁移率更加明显(P<0.01):与NC miR-ex组(82.35±4.52)比较,miR-4465-ex组(23.12±2.22)EC109细胞的迁移率明显降低(P<0.01),Westem blot结果表明,与PBS和NC miK-ex组相比,miK-4465-ex作用后EC109细胞M-Cadherin(P<0.05)、p-Smad1/2(P<O.Ol)和Vim-entin(P<0.01)表达下调,E-Cadherin表达上调(P<0.01)。结论MSC-ex作为载体携载高水平miR-4465,可能通过下调TGFp/Smadl/2通路抑制食管癌细胞EC109的侵袭、迁移。
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关键词
人脐带间充质干细胞
外泌体
食管癌细胞
miR-4465
迁移
侵袭
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题名
脐带间充质干细胞外泌体携载miR-4465抑制食管癌细胞的侵袭及迁移
被引量：
2
1
作者
孙峰
谢玮
机构
南通市
肿瘤
医院
(
南通
大学
附属
肿瘤
医院
)
肿瘤
研究所
南通市
第一人民
医院
检验科
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2021年第12期1252-1258,共7页
基金
南通市市级科技计划项目(MSZ18140)。
文摘
目的间质干细胞分泌的外泌体(MSC-ex)是MSC旁分泌的活性成分,在多种疾病包括肿瘤的治疗中有着重要的应用文章拟探讨人脐带间充质干细胞(MSC)外泌体携载miK-4465抑制食管癌细胞EC109侵袭、迁移的作用及机制方法分离、培养脐带MSCs并提取MSC-ex,透射电镜、纳米颗粒分析观察外泌体的结构.Western blot检测外泌体标志蛋白CD9和CD81表达。超声法将miRNA mimics NC及miR-4465 mimics导入MSC-ex,获得miRNA mimics NC修饰MSC-ex(NC miR-ex)及miR-4465 mimics修饰MSC-ex(miR-4465-ex)。PBS、MSC-ex、miR-4465-ex分别与ECIO9共培养,采用激光共聚焦显微镜观察MSC-ex在细胞内分布,qRT-PCR检测ECl09的miR-4465水平,Transwell和划痕实验观察miR-4465 mimics转染及miR-4465-ex作用后EC109的迁移及侵袭能力,免疫印迹法检测EC109的上皮-间质化相关蛋白的表达。结果与NC miR-ex组(1.00±0.09)比较,miR-4465-ex 25 nmol/L、miR-4465-ex50nmol/L组EC109细胞中miR-4465表达水平(20_26±2.75、34.71±5.26)显著升高(P<0.01),且具有剂量依赖性。与mimicsNC组(84.67±4.60)相比,miR-4465 mimics25 nmol/L(23.67±4.14)转染组EC109细胞的迁移率明显降低(P<0.01),且miR-4465 mimics50nM(10.27±1.32)转染组EC109细胞的迁移率更加明显(P<0.01):与NC miR-ex组(82.35±4.52)比较,miR-4465-ex组(23.12±2.22)EC109细胞的迁移率明显降低(P<0.01),Westem blot结果表明,与PBS和NC miK-ex组相比,miK-4465-ex作用后EC109细胞M-Cadherin(P<0.05)、p-Smad1/2(P<O.Ol)和Vim-entin(P<0.01)表达下调,E-Cadherin表达上调(P<0.01)。结论MSC-ex作为载体携载高水平miR-4465,可能通过下调TGFp/Smadl/2通路抑制食管癌细胞EC109的侵袭、迁移。
关键词
人脐带间充质干细胞
外泌体
食管癌细胞
miR-4465
迁移
侵袭
Keywords
mesenchymal stem cell
exosome
esophageal cancer cell
miR-4465
migration
invasion
分类号
R735.1 [医药卫生—肿瘤]
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1
脐带间充质干细胞外泌体携载miR-4465抑制食管癌细胞的侵袭及迁移
孙峰
谢玮
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2021
2
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