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miRNA-222调控CDKN1b和CDKN1c表达促进乳腺癌细胞增殖和迁移的机制研究
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作者 殷嘉 何树燕 +2 位作者 陈洁 潘洁 邵芳 《常熟理工学院学报》 2023年第2期78-85,共8页
通过检测乳腺癌样本和正常组织样本中miR-222表达量,转染miR-222模拟物(mimics)和抑制物(inhibitors),用CCK-8和Transwell检测miR-222对乳腺癌细胞增殖能力和迁移能力的影响.进一步预测miRNA-222的靶基因,构建其过表达载体和预测靶基因... 通过检测乳腺癌样本和正常组织样本中miR-222表达量,转染miR-222模拟物(mimics)和抑制物(inhibitors),用CCK-8和Transwell检测miR-222对乳腺癌细胞增殖能力和迁移能力的影响.进一步预测miRNA-222的靶基因,构建其过表达载体和预测靶基因的荧光素酶报告载体.通过双荧光素酶检测系统鉴定靶基因,点突变实验验证与靶基因的结合位点.RT-PCR检测miRNA-222过表达或抑制后对靶基因表达的影响.分析CDKN1b和CDKN1c高、低表达水平与乳腺癌患者生存率的关系.结果表明与正常乳腺组织比较,肿瘤组织中miR-222表达显著上升(P<0.0001),miR-222的表达与淋巴结转移呈正相关.miR-222过表达后能促进乳腺癌细胞的增殖和迁移,反之则会抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移.双荧光素酶报告系统显示miRNA-222过表达能显著抑制CDKN1b和CDKN1c的荧光素酶活性,点突变实验证实miR-222通过“种子区”与CDKN1b、CDKN1c的靶位点结合,从而负向调控CDKN1b和CDKN1c的表达.过表达miRNA-222后CDKN1b和CDKN1c mRNA的表达量显著降低(P<0.01).相反,抑制miRNA-222表达后CDKN1b和CDKN1c mRNA的表达量上升(P<0.05).CDKN1b和CDKN1c高表达患者的总体生存率显著高于低表达患者(P<0.05).本研究表明miRNA-222通过负向调控CDKN1b和CDKN1c基因表达,进而影响乳腺癌细胞的增殖和迁移. 展开更多
关键词 MIR-222 乳腺癌细胞 CDKN1b CDKN1c 增殖 迁移
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