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聚合酶链反应快速诊断棘阿米巴角膜炎的研究
被引量:
2
1
作者
施健
陆宏
《国际眼科杂志》
CAS
2011年第1期19-21,共3页
目的:探讨聚合酶链反应(PCR)技术快速诊断棘阿米巴角膜炎的价值。方法:建立棘阿米巴标准虫株的PCR检测方法,并应用于临床检测24例角膜刮片标本,结果与原虫培养及100g/L氢氧化钾湿封片镜检做比较。结果:PCR5h可检测出标本中微量棘阿米巴...
目的:探讨聚合酶链反应(PCR)技术快速诊断棘阿米巴角膜炎的价值。方法:建立棘阿米巴标准虫株的PCR检测方法,并应用于临床检测24例角膜刮片标本,结果与原虫培养及100g/L氢氧化钾湿封片镜检做比较。结果:PCR5h可检测出标本中微量棘阿米巴原虫,对照细菌、真菌、I型单纯疱疹病毒、正常人角膜均为阴性。临床标本PCR敏感性为46%,明显高于原虫培养与100g/L氢氧化钾湿封片镜检(P<0.05)。结论:PCR速度快、敏感性和特异性高,有助于棘阿米巴角膜炎的快速明确诊断。
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关键词
棘阿米巴角膜炎
快速诊断
聚合酶链反应
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职称材料
系统性红斑狼疮患者B细胞激活因子mRNA定量测定及其意义
被引量:
5
2
作者
张冬雷
施健
+3 位作者
王惠民
鞠少卿
崔之础
倪红兵
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期186-188,共3页
目的建立实时荧光定量PCR(RFQ PCR)检测人B细胞激活因子(BLyS)mRNA含量的方法,初步探讨BLyS表达水平与系统性红斑狼疮(SLE)的相关性。方法在BLyS基因保守区设计特异性的引物和荧光探针,RT PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,以...
目的建立实时荧光定量PCR(RFQ PCR)检测人B细胞激活因子(BLyS)mRNA含量的方法,初步探讨BLyS表达水平与系统性红斑狼疮(SLE)的相关性。方法在BLyS基因保守区设计特异性的引物和荧光探针,RT PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,以标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中BLySmRNA含量,并以BLySmRNA和内参β2M mRNA含量的比值作为评价BLyS表达水平的指标。结果本法检测BLySmRNA含量的线性范围为109pg/ml~101pg/ml,批内和批间变异系数(CV)分别为2.4%~7.4%和4.3%~12.3%。SLE患者BLySmRNA表达水平(1.45±0.33)显著高于健康献血员(0.88±0.13),P<0.01,而且与血清IgG水平和抗ds DNA抗体滴度有显著相关性。结论建立RFQ PCR检测BLySmRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;BLyS在SLE的发生、发展及预后等方面可能具有重要作用。
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关键词
系统性红斑狼疮
B细胞激活因子
基因表达
荧光定量检查
MRNA
实验室检查
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职称材料
SYBR greenⅠ结合熔解曲线分析快速检测GSTM1基因多态性
被引量:
1
3
作者
王小飞
王惠民
+2 位作者
王跃国
施英娟
张冬雷
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期100-102,共3页
目的建立一种快速检测人类谷胱甘肽S转移酶(GST)基因多态性的方法并初步应用。方法反应体系中加入新型荧光染料SYBR greenⅠ,应用多重PCR同时扩增GSTM1基因及内参照CYP1A1基因。PCR反应结束后,以0.1℃/s的速度从65℃到95℃检测并记录反...
目的建立一种快速检测人类谷胱甘肽S转移酶(GST)基因多态性的方法并初步应用。方法反应体系中加入新型荧光染料SYBR greenⅠ,应用多重PCR同时扩增GSTM1基因及内参照CYP1A1基因。PCR反应结束后,以0.1℃/s的速度从65℃到95℃检测并记录反应管荧光的变化,根据得到的熔解曲线分析GSTM1基因型。结果GSTM1基因携带型(GSTM1+)熔解曲线出现两个峰带,GSTM1基因空白型(GSTM1-)只出现一个峰带,两峰峰尖所对应的温度值与预期值相同,琼脂糖凝胶电泳显示PCR产物分子量与预期分子量一致。DNA抽提后整个检测在L ightCyc ler扩增仪上1 h内完成。结论SYBR greenⅠ结合熔解曲线分析是一种简单、快速、准确的分析GSTM1基因多态性的方法。
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关键词
SYBR
green
Ⅰ
熔解曲线分析
基因
多态性
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职称材料
题名
聚合酶链反应快速诊断棘阿米巴角膜炎的研究
被引量:
2
1
作者
施健
陆宏
机构
南通大学附属医院酶学研究室
南通
大学
附属
医院
眼科
出处
《国际眼科杂志》
CAS
2011年第1期19-21,共3页
文摘
目的:探讨聚合酶链反应(PCR)技术快速诊断棘阿米巴角膜炎的价值。方法:建立棘阿米巴标准虫株的PCR检测方法,并应用于临床检测24例角膜刮片标本,结果与原虫培养及100g/L氢氧化钾湿封片镜检做比较。结果:PCR5h可检测出标本中微量棘阿米巴原虫,对照细菌、真菌、I型单纯疱疹病毒、正常人角膜均为阴性。临床标本PCR敏感性为46%,明显高于原虫培养与100g/L氢氧化钾湿封片镜检(P<0.05)。结论:PCR速度快、敏感性和特异性高,有助于棘阿米巴角膜炎的快速明确诊断。
关键词
棘阿米巴角膜炎
快速诊断
聚合酶链反应
Keywords
acanthamoeba keratitis
rapid diagnosis
polymerase chain reaction
分类号
R772.21 [医药卫生—眼科]
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职称材料
题名
系统性红斑狼疮患者B细胞激活因子mRNA定量测定及其意义
被引量:
5
2
作者
张冬雷
施健
王惠民
鞠少卿
崔之础
倪红兵
机构
南通大学附属医院酶学研究室
南通
大学
附属
医院
检验医
学
中心
出处
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期186-188,共3页
文摘
目的建立实时荧光定量PCR(RFQ PCR)检测人B细胞激活因子(BLyS)mRNA含量的方法,初步探讨BLyS表达水平与系统性红斑狼疮(SLE)的相关性。方法在BLyS基因保守区设计特异性的引物和荧光探针,RT PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,以标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中BLySmRNA含量,并以BLySmRNA和内参β2M mRNA含量的比值作为评价BLyS表达水平的指标。结果本法检测BLySmRNA含量的线性范围为109pg/ml~101pg/ml,批内和批间变异系数(CV)分别为2.4%~7.4%和4.3%~12.3%。SLE患者BLySmRNA表达水平(1.45±0.33)显著高于健康献血员(0.88±0.13),P<0.01,而且与血清IgG水平和抗ds DNA抗体滴度有显著相关性。结论建立RFQ PCR检测BLySmRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;BLyS在SLE的发生、发展及预后等方面可能具有重要作用。
关键词
系统性红斑狼疮
B细胞激活因子
基因表达
荧光定量检查
MRNA
实验室检查
Keywords
Systemic lupus erythematosus,B lymphocyte stimulator,gene expression real-time fluorescence quantitation
分类号
R593.241 [医药卫生—内科学]
R446 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
SYBR greenⅠ结合熔解曲线分析快速检测GSTM1基因多态性
被引量:
1
3
作者
王小飞
王惠民
王跃国
施英娟
张冬雷
机构
南通
大学
附属
医院
基因诊断实验室
南通大学附属医院酶学研究室
出处
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期100-102,共3页
文摘
目的建立一种快速检测人类谷胱甘肽S转移酶(GST)基因多态性的方法并初步应用。方法反应体系中加入新型荧光染料SYBR greenⅠ,应用多重PCR同时扩增GSTM1基因及内参照CYP1A1基因。PCR反应结束后,以0.1℃/s的速度从65℃到95℃检测并记录反应管荧光的变化,根据得到的熔解曲线分析GSTM1基因型。结果GSTM1基因携带型(GSTM1+)熔解曲线出现两个峰带,GSTM1基因空白型(GSTM1-)只出现一个峰带,两峰峰尖所对应的温度值与预期值相同,琼脂糖凝胶电泳显示PCR产物分子量与预期分子量一致。DNA抽提后整个检测在L ightCyc ler扩增仪上1 h内完成。结论SYBR greenⅠ结合熔解曲线分析是一种简单、快速、准确的分析GSTM1基因多态性的方法。
关键词
SYBR
green
Ⅰ
熔解曲线分析
基因
多态性
Keywords
SYBR green Ⅰ
melting curve analysis
gene
polymorphisms
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
聚合酶链反应快速诊断棘阿米巴角膜炎的研究
施健
陆宏
《国际眼科杂志》
CAS
2011
2
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职称材料
2
系统性红斑狼疮患者B细胞激活因子mRNA定量测定及其意义
张冬雷
施健
王惠民
鞠少卿
崔之础
倪红兵
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
SYBR greenⅠ结合熔解曲线分析快速检测GSTM1基因多态性
王小飞
王惠民
王跃国
施英娟
张冬雷
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
1
在线阅读
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职称材料
已选择
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引证文献
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