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肝癌特异性AFP亚型分离检测法的建立
被引量：
6
1
作者
肖明兵
倪润洲
+2 位作者
金飞
黄介飞
孟宪镛
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期247-250,共4页
目的建立聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)结合蛋白印迹(WB)技术分离检测肝癌特异性甲胎蛋白亚型(HS-AFP)方法。方法以自然阶段梯度PAGE分离血清甲胎蛋白(AFP),WB技术检测AFP亚型,摸索研究AFP分离、转膜、呈色检测的实验条件。对82例肝癌、95...
目的建立聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)结合蛋白印迹(WB)技术分离检测肝癌特异性甲胎蛋白亚型(HS-AFP)方法。方法以自然阶段梯度PAGE分离血清甲胎蛋白(AFP),WB技术检测AFP亚型,摸索研究AFP分离、转膜、呈色检测的实验条件。对82例肝癌、95例良性肝病患者及44例健康献血员的血清AFP亚型进行分离检测,分析肝癌与良性肝病AFP亚型谱型的差别。结果成功建立了血清AFP亚型分离检测法,分离检测出HS-AFP。肝癌患者HS-AFP阳性率为74.4%,显著高于良性肝病组。结论建立的HS-AFP分离检测法有助于肝癌诊断。
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关键词
肝癌特异性
检测法
聚丙烯酰胺凝胶电泳
血清AFP
分离检测
血清甲胎蛋白
良性肝病
健康献血员
蛋白亚型
蛋白印迹
PAGE
技术检测
实验条件
肝病患者
肝癌患者
肝癌诊断
HS
阳性率
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职称材料
血清glypican 3 ELISA检测法的建立及初步应用
被引量：
8
2
作者
江枫
肖明兵
+3 位作者
倪润洲
赵敏星
朱净
周嘉伟
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期244-246,共3页
目的建立血清中磷酯酰肌醇蛋白聚糖3(glypican 3,GPC3)的双抗体夹心ELISA检测法,并探讨其应用价值。方法以本室自制抗GPC3单克隆抗体为包被抗体,以兔抗人GPC3抗体为检测抗体,建立检测GPC3的双抗体夹心ELISA法。对建立的方法进行线性范...
目的建立血清中磷酯酰肌醇蛋白聚糖3(glypican 3,GPC3)的双抗体夹心ELISA检测法,并探讨其应用价值。方法以本室自制抗GPC3单克隆抗体为包被抗体,以兔抗人GPC3抗体为检测抗体,建立检测GPC3的双抗体夹心ELISA法。对建立的方法进行线性范围、灵敏度、精密度、回收率等方法学评价,并用于测定原发性肝癌、肝炎后肝硬化、慢性肝炎患者及体检健康者血清标本。结果该法线性范围为0.2～12.5μg/L,灵敏度为0.101μg/L,批内CV≤5.99%,批间CV≤6.96%,平均回收率为99.9%。原发性肝癌患者血清GPC3浓度5.43(2.28～8.62)μg/L明显高于肝炎后肝硬化、慢性肝炎患者及健康对照组(P均<0.05)。以3.19μg/L为临界值时,诊断肝癌的敏感性和特异性分别为85.4%及98.9%。结论该法灵敏、特异和准确,可用于原发性肝癌的诊断。
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关键词
磷脂酰肌醇蛋白聚糖3
ELISA法
原发性肝癌
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职称材料
GST-Glypican 3 N端融合蛋白表达载体构建及表达纯化
被引量：
3
3
作者
肖明兵
赵敏星
+2 位作者
倪润洲
江枫
周嘉伟
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期212-214,共3页
目的构建人磷酯酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican3,GPC3)N端蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达及纯化。方法以重组质粒pcDNA3.1-GPC3N为模板,扩增GPC3 N端基因,产物经纯化回收后与载体PGEX-4T-1连接并转化大...
目的构建人磷酯酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican3,GPC3)N端蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达及纯化。方法以重组质粒pcDNA3.1-GPC3N为模板,扩增GPC3 N端基因,产物经纯化回收后与载体PGEX-4T-1连接并转化大肠埃希菌Rosetta,酶切鉴定序列完全正确者诱导表达GST-GPC3 N端融合蛋白,并以谷胱甘肽琼脂糖小珠亲和纯化。结果Glypican 3 N端基因片段成功插入载体PGEX-4T-1,插入位点及碱基序列完全正确,转化Rosetta后,经IPGT诱导成功表达分子质量为64 000的GST-GPC3 N端融合蛋白。结论成功建立了重组GST-GPC3 N端融合蛋白的原核表达载体、表达菌株及诱导表达和纯化的方法,为GPC3 N端融合蛋白的进一步应用打下基础。
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关键词
磷酯酰肌醇蛋白聚糖3
载体
克隆
表达
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职称材料
题名
肝癌特异性AFP亚型分离检测法的建立
被引量：
6
1
作者
肖明兵
倪润洲
金飞
黄介飞
孟宪镛
机构
南通大学附属医院消化病研究室
出处
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期247-250,共4页
基金
江苏省社会发展科技项目(BS2004528)。
文摘
目的建立聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)结合蛋白印迹(WB)技术分离检测肝癌特异性甲胎蛋白亚型(HS-AFP)方法。方法以自然阶段梯度PAGE分离血清甲胎蛋白(AFP),WB技术检测AFP亚型,摸索研究AFP分离、转膜、呈色检测的实验条件。对82例肝癌、95例良性肝病患者及44例健康献血员的血清AFP亚型进行分离检测,分析肝癌与良性肝病AFP亚型谱型的差别。结果成功建立了血清AFP亚型分离检测法,分离检测出HS-AFP。肝癌患者HS-AFP阳性率为74.4%,显著高于良性肝病组。结论建立的HS-AFP分离检测法有助于肝癌诊断。
关键词
肝癌特异性
检测法
聚丙烯酰胺凝胶电泳
血清AFP
分离检测
血清甲胎蛋白
良性肝病
健康献血员
蛋白亚型
蛋白印迹
PAGE
技术检测
实验条件
肝病患者
肝癌患者
肝癌诊断
HS
阳性率
Keywords
alpha-fetoprotein (AFP)
isoform
primary hepatocellular carcinoma(HCC)
polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE)
Western blot
分类号
R575 [医药卫生—消化系统]
R446.62 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
血清glypican 3 ELISA检测法的建立及初步应用
被引量：
8
2
作者
江枫
肖明兵
倪润洲
赵敏星
朱净
周嘉伟
机构
南通大学附属医院消化病研究室
中国科学院上海神经科学
研究
所
出处
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第4期244-246,共3页
基金
南通市社会发展计划项目(S7943)
文摘
目的建立血清中磷酯酰肌醇蛋白聚糖3(glypican 3,GPC3)的双抗体夹心ELISA检测法,并探讨其应用价值。方法以本室自制抗GPC3单克隆抗体为包被抗体,以兔抗人GPC3抗体为检测抗体,建立检测GPC3的双抗体夹心ELISA法。对建立的方法进行线性范围、灵敏度、精密度、回收率等方法学评价,并用于测定原发性肝癌、肝炎后肝硬化、慢性肝炎患者及体检健康者血清标本。结果该法线性范围为0.2～12.5μg/L,灵敏度为0.101μg/L,批内CV≤5.99%,批间CV≤6.96%,平均回收率为99.9%。原发性肝癌患者血清GPC3浓度5.43(2.28～8.62)μg/L明显高于肝炎后肝硬化、慢性肝炎患者及健康对照组(P均<0.05)。以3.19μg/L为临界值时,诊断肝癌的敏感性和特异性分别为85.4%及98.9%。结论该法灵敏、特异和准确,可用于原发性肝癌的诊断。
关键词
磷脂酰肌醇蛋白聚糖3
ELISA法
原发性肝癌
Keywords
glypican 3
enzyme-linked immunosorbent assay
primary hepatocarcinoma
分类号
R446.6 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
GST-Glypican 3 N端融合蛋白表达载体构建及表达纯化
被引量：
3
3
作者
肖明兵
赵敏星
倪润洲
江枫
周嘉伟
机构
南通大学附属医院消化病研究室
中国科学院上海神经科学
研究
所
出处
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第3期212-214,共3页
基金
南通市社会发展计划项目(S7943)
文摘
目的构建人磷酯酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican3,GPC3)N端蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达及纯化。方法以重组质粒pcDNA3.1-GPC3N为模板,扩增GPC3 N端基因,产物经纯化回收后与载体PGEX-4T-1连接并转化大肠埃希菌Rosetta,酶切鉴定序列完全正确者诱导表达GST-GPC3 N端融合蛋白,并以谷胱甘肽琼脂糖小珠亲和纯化。结果Glypican 3 N端基因片段成功插入载体PGEX-4T-1,插入位点及碱基序列完全正确,转化Rosetta后,经IPGT诱导成功表达分子质量为64 000的GST-GPC3 N端融合蛋白。结论成功建立了重组GST-GPC3 N端融合蛋白的原核表达载体、表达菌株及诱导表达和纯化的方法,为GPC3 N端融合蛋白的进一步应用打下基础。
关键词
磷酯酰肌醇蛋白聚糖3
载体
克隆
表达
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肝癌特异性AFP亚型分离检测法的建立
肖明兵
倪润洲
金飞
黄介飞
孟宪镛
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2005
6
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职称材料
2
血清glypican 3 ELISA检测法的建立及初步应用
江枫
肖明兵
倪润洲
赵敏星
朱净
周嘉伟
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
8
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职称材料
3
GST-Glypican 3 N端融合蛋白表达载体构建及表达纯化
肖明兵
赵敏星
倪润洲
江枫
周嘉伟
《临床检验杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
3
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