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卡氏肺孢子菌55kDa抗原的原核表达与纯化
被引量：
2
1
作者
陈金铃
段义农
+2 位作者
朱丹丹
王建新
秦永伟
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期249-252,共4页
目的体外扩增卡氏肺孢子菌(Pneumocystis carinii,Pc)55kDa抗原(p55)570bp的基因片段,构建原核表达载体pGEX-570,诱导表达并纯化重组蛋白。方法以卡氏肺孢子菌DNA为模板,扩增其基因片段,连接至pGEM-T载体,随后构建pGEX-570重组表达质粒...
目的体外扩增卡氏肺孢子菌(Pneumocystis carinii,Pc)55kDa抗原(p55)570bp的基因片段,构建原核表达载体pGEX-570,诱导表达并纯化重组蛋白。方法以卡氏肺孢子菌DNA为模板,扩增其基因片段,连接至pGEM-T载体,随后构建pGEX-570重组表达质粒,经双酶切、PCR及测序鉴定后将其转化入BL21大肠杆菌中,经IPTG诱导表达融合蛋白。采用透析袋电泳法纯化融合蛋白。结果重组表达质粒pGEX-570经酶切,PCR鉴定及测序结果表明构建成功。IPTG诱导表达融合蛋白GST-p55/570,分子量约为47kDa。用透析袋电泳法纯化重组蛋白,经SDS-PAGE确认正确。结论本研究成功构建了pGEX-570原核表达载体,诱导表达并纯化GST-p55/570融合蛋白。为进一步开展肺孢子菌55kDa抗原的研究奠定了基础。
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关键词
卡氏肺孢子菌
p55抗原
基因克隆
蛋白纯化
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题名
卡氏肺孢子菌55kDa抗原的原核表达与纯化
被引量：
2
1
作者
陈金铃
段义农
朱丹丹
王建新
秦永伟
机构
南通
大学
医学院寄生虫学教研室
南通大学附属医院临床检验中心
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期249-252,共4页
文摘
目的体外扩增卡氏肺孢子菌(Pneumocystis carinii,Pc)55kDa抗原(p55)570bp的基因片段,构建原核表达载体pGEX-570,诱导表达并纯化重组蛋白。方法以卡氏肺孢子菌DNA为模板,扩增其基因片段,连接至pGEM-T载体,随后构建pGEX-570重组表达质粒,经双酶切、PCR及测序鉴定后将其转化入BL21大肠杆菌中,经IPTG诱导表达融合蛋白。采用透析袋电泳法纯化融合蛋白。结果重组表达质粒pGEX-570经酶切,PCR鉴定及测序结果表明构建成功。IPTG诱导表达融合蛋白GST-p55/570,分子量约为47kDa。用透析袋电泳法纯化重组蛋白,经SDS-PAGE确认正确。结论本研究成功构建了pGEX-570原核表达载体,诱导表达并纯化GST-p55/570融合蛋白。为进一步开展肺孢子菌55kDa抗原的研究奠定了基础。
关键词
卡氏肺孢子菌
p55抗原
基因克隆
蛋白纯化
Keywords
Pneumocystis carinii
55kDa antigen
gene cloning
purification of protein
分类号
R382.9 [医药卫生—医学寄生虫学]
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出处
发文年
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1
卡氏肺孢子菌55kDa抗原的原核表达与纯化
陈金铃
段义农
朱丹丹
王建新
秦永伟
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
2
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