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丹参酮ⅡA通过调节线粒体转位蛋白诱导HepG2细胞凋亡
被引量：
6
1
作者
张谊
欧玉龙
+1 位作者
王惠霞
黄晓佳
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期101-107,共7页
目的探讨丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TanⅡA)通过调节线粒体转位蛋白(translocator protein,TSPO)诱导HepG2细胞凋亡中的作用及可能存在的作用机制。方法采用MTT比色法检测TanⅡA对HepG2细胞增殖的影响,Annexin V-PE/7-氨基-放线菌素D双...
目的探讨丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TanⅡA)通过调节线粒体转位蛋白(translocator protein,TSPO)诱导HepG2细胞凋亡中的作用及可能存在的作用机制。方法采用MTT比色法检测TanⅡA对HepG2细胞增殖的影响,Annexin V-PE/7-氨基-放线菌素D双染色法和Hochest染色法观察细胞凋亡率,荧光素酶发光法检测HepG2细胞中ATP的含量,Clark氧电极法测定细胞耗氧率,JC-1荧光探针法检测细胞线粒体膜电位变化,免疫荧光染色法观察转位蛋白在细胞内的表达及定位,免疫印迹法检测线粒体内细胞色素C、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3以及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-9的表达。结果TanⅡA能够剂量依赖性地抑制肝癌细胞HepG2增殖,诱导细胞凋亡、ATP生成减少、耗氧量降低以及线粒体膜电位的下降。同时,TanⅡA可诱导HepG2细胞TSPO表达上调并聚集于核内。结论TanⅡA可诱导HepG2细胞凋亡,其机制与促进细胞转位蛋白TSPO表达及细胞核转位,进而引起线粒体功能障碍有关。
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关键词
丹参酮ⅡA
HEPG2细胞
细胞凋亡
转位蛋白
线粒体
细胞能量代谢
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职称材料
醋酸铅暴露对PC12细胞凋亡与自噬的影响及可能机制
2
作者
张谊
王立晖
+2 位作者
陈月芳
李永金
柳浦青
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2023年第10期774-780,共7页
目的探讨醋酸铅〔Pb(Ac)_(2)〕暴露对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡与自噬的影响及相关分子机制。方法体外培养的PC12细胞用Pb(Ac)_(2)0(细胞对照),100,200和400μmol·L^(-1)处理24 h后,采用MTT法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(L...
目的探讨醋酸铅〔Pb(Ac)_(2)〕暴露对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡与自噬的影响及相关分子机制。方法体外培养的PC12细胞用Pb(Ac)_(2)0(细胞对照),100,200和400μmol·L^(-1)处理24 h后,采用MTT法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞培养液中LDH含量,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率,单丹磺酰尸胺(MDC)试剂盒检测细胞自噬,免疫荧光法观察Bcl-2相互作用蛋白1(Beclin1)在细胞内的表达,Western印迹法检测细胞内自噬相关蛋白沉默信息调节因子1(Sirt1)、叉头框蛋白转录因子3a(FoxO3a)、叉头蛋白M1(FoxM1),Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)以及P62蛋白表达。结果与细胞对照组相比,Pb(Ac)_(2)100,200和400μmol·L^(-1)处理24 h后,PC12细胞存活率显著降低(P<0.05,P<0.01),细胞外液LDH含量升高(P<0.05,P<0.01)。AO/EB染色结果显示,随着Pb(Ac)_(2)浓度的提高,PC12细胞颜色逐渐加深为橙红色,出现明显的凋亡现象;与细胞对照组相比,PC12细胞凋亡率随Pb(Ac)_(2)浓度的提高而显著增加(P<0.01),PC12细胞内自噬体数量增加(P<0.01)。免疫荧光结果显示,Pb(Ac)_(2)暴露后,PC12细胞胞质内Beclin1呈现大量点状聚集且荧光强度加强,表明细胞发生了自噬。Western印迹法结果显示,与细胞对照组相比,Pb(Ac)_(2)各浓度组Sirt1,FoxO3a和Beclin1蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著增加(P<0.05,P<0.01),FoxM1和P62蛋白表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论Pb(Ac)_(2)暴露可诱导PC12细胞发生凋亡与自噬,其机制可能与Sirt1/FoxO3a信号通路激活有关。
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关键词
醋酸铅
PC12细胞
细胞凋亡
细胞自噬
Sirt1/FoxO3a信号通路
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职称材料
题名
丹参酮ⅡA通过调节线粒体转位蛋白诱导HepG2细胞凋亡
被引量：
6
1
作者
张谊
欧玉龙
王惠霞
黄晓佳
机构
南通大学附属丹阳医院江苏省丹阳市人民医院
常州
大学
生物医学工程与健康科学研究院
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期101-107,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No81300059)
镇江市社会发展指导性项目(NoFZ2019005)
镇江“金山英才”高层次领军人才培养计划(第六期“169工程”)。
文摘
目的探讨丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TanⅡA)通过调节线粒体转位蛋白(translocator protein,TSPO)诱导HepG2细胞凋亡中的作用及可能存在的作用机制。方法采用MTT比色法检测TanⅡA对HepG2细胞增殖的影响,Annexin V-PE/7-氨基-放线菌素D双染色法和Hochest染色法观察细胞凋亡率,荧光素酶发光法检测HepG2细胞中ATP的含量,Clark氧电极法测定细胞耗氧率,JC-1荧光探针法检测细胞线粒体膜电位变化,免疫荧光染色法观察转位蛋白在细胞内的表达及定位,免疫印迹法检测线粒体内细胞色素C、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3以及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-9的表达。结果TanⅡA能够剂量依赖性地抑制肝癌细胞HepG2增殖,诱导细胞凋亡、ATP生成减少、耗氧量降低以及线粒体膜电位的下降。同时,TanⅡA可诱导HepG2细胞TSPO表达上调并聚集于核内。结论TanⅡA可诱导HepG2细胞凋亡,其机制与促进细胞转位蛋白TSPO表达及细胞核转位,进而引起线粒体功能障碍有关。
关键词
丹参酮ⅡA
HEPG2细胞
细胞凋亡
转位蛋白
线粒体
细胞能量代谢
Keywords
tanshinoneⅡA
HepG2 cells
cell apoptosis
translocator protein
mitochondria
cell metabolism
分类号
R284.1 [医药卫生—中药学]
R329.24 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R329.25 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R341 [医药卫生—基础医学]
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
醋酸铅暴露对PC12细胞凋亡与自噬的影响及可能机制
2
作者
张谊
王立晖
陈月芳
李永金
柳浦青
机构
南通
大学
附属
丹阳
医院
江苏
大学
医学院药理学教研室
浙江中医药
大学
附属
第二
医院
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2023年第10期774-780,共7页
基金
国家自然科学基金(31700444)
丹阳市社会发展科技支撑计划(SF201804)
+2 种基金
镇江“金山英才”高层次领军人才培养计划(第六期“169工程”)(2021)
浙江省自然科学基金(LYY22H280001)
浙江省中医药现代化专项(2022ZB161)。
文摘
目的探讨醋酸铅〔Pb(Ac)_(2)〕暴露对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡与自噬的影响及相关分子机制。方法体外培养的PC12细胞用Pb(Ac)_(2)0(细胞对照),100,200和400μmol·L^(-1)处理24 h后,采用MTT法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞培养液中LDH含量,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率,单丹磺酰尸胺(MDC)试剂盒检测细胞自噬,免疫荧光法观察Bcl-2相互作用蛋白1(Beclin1)在细胞内的表达,Western印迹法检测细胞内自噬相关蛋白沉默信息调节因子1(Sirt1)、叉头框蛋白转录因子3a(FoxO3a)、叉头蛋白M1(FoxM1),Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)以及P62蛋白表达。结果与细胞对照组相比,Pb(Ac)_(2)100,200和400μmol·L^(-1)处理24 h后,PC12细胞存活率显著降低(P<0.05,P<0.01),细胞外液LDH含量升高(P<0.05,P<0.01)。AO/EB染色结果显示,随着Pb(Ac)_(2)浓度的提高,PC12细胞颜色逐渐加深为橙红色,出现明显的凋亡现象;与细胞对照组相比,PC12细胞凋亡率随Pb(Ac)_(2)浓度的提高而显著增加(P<0.01),PC12细胞内自噬体数量增加(P<0.01)。免疫荧光结果显示,Pb(Ac)_(2)暴露后,PC12细胞胞质内Beclin1呈现大量点状聚集且荧光强度加强,表明细胞发生了自噬。Western印迹法结果显示,与细胞对照组相比,Pb(Ac)_(2)各浓度组Sirt1,FoxO3a和Beclin1蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著增加(P<0.05,P<0.01),FoxM1和P62蛋白表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论Pb(Ac)_(2)暴露可诱导PC12细胞发生凋亡与自噬,其机制可能与Sirt1/FoxO3a信号通路激活有关。
关键词
醋酸铅
PC12细胞
细胞凋亡
细胞自噬
Sirt1/FoxO3a信号通路
Keywords
lead acetate
PC12 cells
apoptosis
autophagy
Sirt1/FoxO3a signaling pathway
分类号
R99 [医药卫生—毒理学]
R963 [医药卫生—微生物与生化药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
丹参酮ⅡA通过调节线粒体转位蛋白诱导HepG2细胞凋亡
张谊
欧玉龙
王惠霞
黄晓佳
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
醋酸铅暴露对PC12细胞凋亡与自噬的影响及可能机制
张谊
王立晖
陈月芳
李永金
柳浦青
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
北大核心
2023
0
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