同源重组法衣原体RNA聚合酶表达载体的构建和应用

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作者 石禹 包小峰 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第2期113-119,共7页

目的利用同源重组法构建衣原体RNA聚合酶(cRNAP)各亚基质粒,转化入大肠埃希菌中表达蛋白并探讨其在衣原体转录调控中的应用。方法根据Gen Bank中的基因序列设计特异性引物,聚合酶链式反应(PCR)扩增cRNAP各亚基的目的基因片段,对PCR产物... 目的利用同源重组法构建衣原体RNA聚合酶(cRNAP)各亚基质粒,转化入大肠埃希菌中表达蛋白并探讨其在衣原体转录调控中的应用。方法根据Gen Bank中的基因序列设计特异性引物,聚合酶链式反应(PCR)扩增cRNAP各亚基的目的基因片段,对PCR产物进行纯化,质粒载体进行质粒抽提、质粒酶切、胶回收等处理。采用同源重组法将基因片段插入到目的载体进行片段融合构建cRNAP各亚基表达质粒,融合产物转化后用特异性引物进行PCR验证和测序。构建好的融合产物转化入大肠埃希菌化学感受态细胞表达蛋白。结果成功构建cRNAP各亚基质粒并成功表达cRNAP各亚基蛋白,研究了衣原体转录调节因子GrgA与cRNAP的直接相互作用是GrgA与cRNAP的α、β′亚基有结合,与β亚基无结合。两者可以作为衣原体感染治疗和预防的药物作用新靶点。结论同源重组法可用于构建cRNAP各亚基质粒并成功表达相应蛋白,并用于研究转录调节因子GrgA与cRNAP各亚基蛋白的结合位点,为衣原体感染治疗和预防药物作用新靶点的研究提供参考信息。 展开更多

关键词 同源重组法 衣原体 cRNAP 亚基 质粒载体 融合蛋白

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茵陈蒿汤方剂配伍对黄疸模型小鼠血清生化指标的影响 被引量：9

2

作者 窦志华 陈敏 +2 位作者 罗琳 孟萍 顾薇 《中国医药导报》 CAS 2016年第13期93-95,共3页

目的研究茵陈蒿汤不同方剂配伍对黄疸模型小鼠的治疗作用。方法将144只ICR小鼠按随机数字表法随机分成正常组、模型组、茵陈蒿汤组、缺茵陈方组、缺栀子方组、缺大黄方组、单味茵陈组、单味栀子组和单味大黄组,每组16只。除正常组外,其... 目的研究茵陈蒿汤不同方剂配伍对黄疸模型小鼠的治疗作用。方法将144只ICR小鼠按随机数字表法随机分成正常组、模型组、茵陈蒿汤组、缺茵陈方组、缺栀子方组、缺大黄方组、单味茵陈组、单味栀子组和单味大黄组,每组16只。除正常组外,其余各组于实验第1、4、7、10天灌胃异硫氰酸-1-萘酯复制黄疸模型。正常组和模型组灌胃生理盐水,其余各组每天1次灌胃茵陈蒿汤及其各缺味方和单味药治疗,连续12 d,第12天给药后1 h取血,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)和总胆汁酸(TBA)。结果与模型组比较,茵陈蒿汤组、单味大黄组、缺栀子方组、缺茵陈方组ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL、TBA明显下降(P<0.01或P<0.05),单味栀子组AST、ALP、TBA明显升高(P<0.05)。结论茵陈蒿汤全方配伍合理,其中大黄在方中发挥主要作用,栀子单用具有一定肝毒性,大黄与栀子配伍及全方配伍可减毒增效。 展开更多

关键词 茵陈蒿汤 方剂配伍 黄疸 转氨酶 胆红素 总胆汁酸 碱性磷酸酶

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二苯乙烯苷对TGF-β1诱导新生大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响及其机制 被引量：5

3

作者 曾翼 赵诚 +2 位作者 王霏 朱秋燕 许晓乐 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期362-367,共6页

探讨二苯乙烯苷（2，3，5，4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡糖苷，TSG）对转化生长因子β（TGF-β1）诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞（CFB）增殖和胶原合成的影响，并研究其相关机制。用消化法培养新生SD大鼠CFB，建立TGF-β1诱导新生大鼠... 探讨二苯乙烯苷（2，3，5，4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡糖苷，TSG）对转化生长因子β（TGF-β1）诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞（CFB）增殖和胶原合成的影响，并研究其相关机制。用消化法培养新生SD大鼠CFB，建立TGF-β1诱导新生大鼠CFB纤维化模型。采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）掺入法检测CFB增殖情况；乳酸脱氢酶（LDH）法检测药物对细胞毒性作用；羟脯氨酸测定检测CFB胶原含量；流式细胞仪测定细胞周期；Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、增殖细胞核抗原（PCNA）、Ⅰ型胶原（COLⅠ）、Ⅲ型胶原（COLⅢ）、p—Smad2、Smad2、p-Smad3、Smad3、p-ERK、ERK、p-P38、P38、p—JNK、JNK的蛋白表达。结果表明，终浓度为0．1—100μmol／L的TSG无明显细胞毒性作用；在一定浓度范围内，TSG可明显抑制TGF—β1诱导的CFB增殖和胶原合成，抑制细胞由G0／G1期向S期的转变，抑制TGF—β1诱导的CFB核内PC—NA的蛋白表达，降低α-SMA、COLI和COLⅢ的过度表达．并抑制TGF—β1诱导的Smad3、ERK和P38的磷酸化。因此推测一定浓度的TSG能抑制TGF—β1诱导的CFB增殖和胶原合成，其机制可能与干预Smad3、ERK和P38信号通路有关。 展开更多

关键词 二苯乙烯苷 心肌成纤维细胞 增殖 胶原合成 转化生长因子β1

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茵陈蒿汤HPLC指纹图谱研究及共有峰归属分析 被引量：5

4

作者 窦志华 罗琳 +4 位作者 候金燕 刘青青 陆群 陈霞 冯艳 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期380-384,共5页

目的建立茵陈蒿汤HPLC指纹图谱,并对其共有峰进行归属分析和指认。方法 Symmetry C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长238nm和440nm。测定10批茵陈蒿汤样品指纹图谱,建立共有模式... 目的建立茵陈蒿汤HPLC指纹图谱,并对其共有峰进行归属分析和指认。方法 Symmetry C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长238nm和440nm。测定10批茵陈蒿汤样品指纹图谱,建立共有模式,并进行相似度评价,通过与各组方药味及对照品保留时间和紫外光谱图比对,对共有峰进行归属分析和指认。结果 238nm和440nm下10批样品指纹图谱与共有模式的相似度分别≥0.931和0.951;238nm下标定共有峰56个,其中24个来源于大黄、27个来源于栀子、4个来源于茵陈、1个为栀子和茵陈共有。来源于大黄的10个成分被指认,另有8个和2个成分分别具有蒽醌类和儿茶素类化合物的紫外吸收特征;来源于栀子中的4个成分被指认,另外10个、1个和3个成分分别具有环烯醚萜类化合物、西红花酸类化合物和绿原酸类似物的紫外吸收特征;来源于茵陈和栀子共有成分被指认为绿原酸;来源于茵陈的2个成分具有绿原酸类似物的紫外吸收特征;440nm下标定共有峰32个,其中16个与238nm下为同一成分,另外16个新成分均来源于栀子,且均具有西红花酸类化合物的紫外吸收特征。结论该法建立的指纹图谱可较全面地对茵陈蒿汤进行成分分析,为该方剂质量控制提供了依据。 展开更多

关键词 茵陈蒿汤 茵陈 栀子 大黄 高效液相色谱 指纹图谱 共有峰归属分析

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新型法尼基硫代水杨酸/羟基肉桂酸偶联物的合成及其抗肿瘤活性 被引量：2

5

作者 王志强 王雪敏 +3 位作者 张伟 王新杨 凌勇 陈莉 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期392-399,共8页

通过偶联法尼基硫代水杨酸(FTS)的羧基与羟基肉桂酸的酚羟基,设计合成了16个新型FTS/羟基肉桂酸偶联物(7a^7p),并对其进行了体外抗肿瘤活性研究。结果表明,大部分化合物对6种人肿瘤细胞具有较强的抗增殖活性,其中,化合物7b表现出最佳的... 通过偶联法尼基硫代水杨酸(FTS)的羧基与羟基肉桂酸的酚羟基,设计合成了16个新型FTS/羟基肉桂酸偶联物(7a^7p),并对其进行了体外抗肿瘤活性研究。结果表明,大部分化合物对6种人肿瘤细胞具有较强的抗增殖活性,其中,化合物7b表现出最佳的肿瘤细胞增殖抑制活性,对所测肿瘤细胞的IC50为5.51~9.25μmol/L,优于FTS和索拉非尼的活性。并且,化合物7b可以选择性地抑制肿瘤细胞的生长,而对正常细胞损伤较小。此外,流式细胞分析显示化合物7b可以浓度依赖性地诱导SMMC-7721细胞凋亡。 展开更多

关键词 法尼基硫代水杨酸 羟基肉桂酸 合成 细胞凋亡 抗肿瘤活性

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具有肿瘤靶向及穿膜效应的壳聚糖胶束的制备 被引量：2

6

作者 刘婉婉 张胜喻 +1 位作者 杨彧 朱红艳 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期561-567,共7页

在壳聚糖(CS)表面修饰疏水基团辛基形成辛基壳聚糖(OC),然后再修饰亲水基团聚乙二醇(PEG)、肿瘤靶向配体氨基葡萄糖(DG)和穿膜肽九聚精氨酸(9R),形成DG和9R共同修饰的、同时具有肿瘤靶向性及穿膜效应的壳聚糖纳米胶束(DG/9R-PEG-OC)。... 在壳聚糖(CS)表面修饰疏水基团辛基形成辛基壳聚糖(OC),然后再修饰亲水基团聚乙二醇(PEG)、肿瘤靶向配体氨基葡萄糖(DG)和穿膜肽九聚精氨酸(9R),形成DG和9R共同修饰的、同时具有肿瘤靶向性及穿膜效应的壳聚糖纳米胶束(DG/9R-PEG-OC)。核磁共振光谱分析及聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果证实了DG/9R-PEG-OC的成功制备;测得壳聚糖纳米胶束的粒径为151.8 nm左右、Zeta电位约为16.5 m V;透射电子显微镜照片显示该壳聚糖纳米胶束为均匀的球形结构;紫外分光光度法测定该载体的荧光素载药量约为28.2%,包封率约为75.0%,释药实验表明壳聚糖胶束具有良好的缓释作用;荧光显微镜观察显示,该DG/9R-PEG-OC胶束对肿瘤细胞尤其是葡萄糖受体高表达的肿瘤细胞Hep G2具有较好的靶向性及细胞穿膜效应。故DG/9R-PEG-OC胶束可作为脂溶性抗肿瘤药物的载体用于肿瘤的靶向化学治疗。 展开更多

关键词 壳聚糖胶束 氨基葡萄糖 聚乙二醇 精氨酸 靶向 穿膜肽 HEP G2

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新型法尼基硫代水杨酰胺衍生物的设计、合成及抗肿瘤活性

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作者 毛春芳 徐辰俊 +4 位作者 王雪敏 李祥华 张伟 王新杨 凌勇 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期162-168,共7页

通过将法尼基硫代水杨酸(FTS)的羧基用各种胺进行胺化设计,合成得到11个法尼基硫代水杨酰胺衍生物(9a^9k),并对它们进行了体外抗肿瘤活性评价。实验表明其中的8个化合物对5种人肿瘤细胞具有较强的抗增殖活性,其中,化合物9k的细胞增殖抑... 通过将法尼基硫代水杨酸(FTS)的羧基用各种胺进行胺化设计,合成得到11个法尼基硫代水杨酰胺衍生物(9a^9k),并对它们进行了体外抗肿瘤活性评价。实验表明其中的8个化合物对5种人肿瘤细胞具有较强的抗增殖活性,其中,化合物9k的细胞增殖抑制活性最强,对5种肿瘤细胞的IC50范围达6.05~8.16μmol/L,优于阳性对照FTS,与索拉非尼相当。此外,化合物9k可下调细胞内凋亡抑制蛋白Bcl-2的水平并上调促凋亡蛋白Bax和caspase-3,提示该化合物具有显著诱导肿瘤细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 法尼基硫代水杨酰胺 衍生物 合成 抗肿瘤活性 细胞凋亡

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广西节庆体育的新浪微博传播研究——以壮族三月三·民族体育炫为例 被引量：3

8

作者 王艳琼 丘文婷 +3 位作者 孙政 王楚裕 谢璟雯 谭周荣 《体育科技》 2022年第2期44-45,48,共3页

以广西壮族三月三·民族体育炫为例,从其传播主体、传播形式、传播内容三个方面出发,了解并剖析其新浪微博的传播现状,发现其中存在的问题主要有:官方传播主体影响力低,传播形式缺乏新颖性,传播内容缺乏深度。进而提出有效的优化策... 以广西壮族三月三·民族体育炫为例,从其传播主体、传播形式、传播内容三个方面出发,了解并剖析其新浪微博的传播现状,发现其中存在的问题主要有:官方传播主体影响力低,传播形式缺乏新颖性,传播内容缺乏深度。进而提出有效的优化策略:提高官方传播主体的影响力,创新传播形式,丰富和挖掘传播内容。以期为提高广西节庆体育的影响力以及广西节庆体育文化的传播提供理论参考。 展开更多

关键词 节庆体育 新浪微博 传播

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浅析药理学实验教学与学生能力的培养 被引量：1

9

作者 许晓乐 曾翼 《教育界（高等教育）》 2016年第1期85-85,共1页

药理学实验教学的有效性是培养、造就一批高水平的医疗药科人才的重点。本文通过对药理学实验教学如何培养学生的理论水平、观察能力、动手操作能力、团队精神、创新能力等方面着手，讨论了提高药理学实验教学效果及学生能力的方法。

关键词 药理学实验教学 学生能力 建议

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紫杉醇温敏脂质体与siRNA金纳米星载药系统的构建与表征 被引量：3

10

作者 程紫婷 姚珂 +2 位作者 刘婉婉 许伯慧 朱红艳 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期445-452,共8页

用种子生长法制备金纳米星(gold nanostar,GNS),构建聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)、氨基葡萄糖(2-amino-2-deoxy-D-glucose,DG)和九聚精氨酸(9-D-arginine,9R)修饰的载COX-2 siRNA(siCOX-2)的GNS复合纳米粒[siCOX-2(9R/DG-GNS)];... 用种子生长法制备金纳米星(gold nanostar,GNS),构建聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)、氨基葡萄糖(2-amino-2-deoxy-D-glucose,DG)和九聚精氨酸(9-D-arginine,9R)修饰的载COX-2 siRNA(siCOX-2)的GNS复合纳米粒[siCOX-2(9R/DG-GNS)];以薄膜分散法制备载紫杉醇温敏脂质体(paclitaxel temperature sensitive liposome,PTX-TSL);最后将siCOX-2(9R/DG-GNS)与PTX-TSL体通过巯基配位得到PTX-TSL与siCOX-2(9R/DG-GNS)共载药系统PTX-TSL-[siCOX-2(9R/DG-GNS)]。采用核磁共振、聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳法验证了siCOX-2(9R/DG-GNS)成功构建,马尔文电位粒度仪测得PTX-TSL-[siCOX-2(9R/DG-GNS)]粒径电位分别为(292±14)nm、-(2.59±0.12)m V,透射电子显微镜结果显示其结构呈包裹磷脂双分子层的星型,808 nm激光照射下表现出良好的光热转换效率。差示扫描量热法测试PTX-TSL相变温度约为42.6℃,透析法测得其载药量为7.5%,包封率为95.4%,具有良好的温敏释药性能。因此,本复合物纳米载药系统可作为PTX与siCOX-2的共载药体系,用以抗肿瘤耐药治疗。 展开更多

关键词 紫杉醇 温敏脂质体 氨基葡萄糖 金纳米星 siCOX-2

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水热法合成过渡金属氧化物纳米材料及其在食品安全检测传感器中的应用进展 被引量：5

11

作者 傅慧君 董秀秀 +2 位作者 陈子键 杨池 徐振林 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期905-912,共8页

以Fe,Co,Mn,Zn等过渡金属制备的氧化物纳米材料具有制备简单、形貌可控以及电化学活性高等特点,且可以固定在电极表面,在电化学传感器的应用中显示了广阔前景。该文重点介绍了过渡金属氧化物水热合成方法的研究进展,并简要阐述了基于过... 以Fe,Co,Mn,Zn等过渡金属制备的氧化物纳米材料具有制备简单、形貌可控以及电化学活性高等特点,且可以固定在电极表面,在电化学传感器的应用中显示了广阔前景。该文重点介绍了过渡金属氧化物水热合成方法的研究进展,并简要阐述了基于过渡金属氧化物纳米材料的新型电化学传感器在食品安全快速检测领域的应用进展。 展开更多

关键词 电化学传感器 纳米材料 水热法 过渡金属氧化物 食品安全

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基于“肠-肾”轴理论的肠道微生态影响慢性肾病发生发展的机制及干预治疗 被引量：3

12

作者 朱金惠 王玲 +4 位作者 陶金华 马振祥 段金廒 刘培 江曙 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1054-1062,共9页

慢性肾脏疾病(Chronic kidney disease,CKD)是指由各种原因引起的慢性肾脏结构和功能障碍,包括各种原发的、继发的肾小球肾炎、肾小管损伤和肾血管病变等。复杂的发病机制与特异性治疗方案的缺乏使慢性肾病成为威胁人类生命健康的重大... 慢性肾脏疾病(Chronic kidney disease,CKD)是指由各种原因引起的慢性肾脏结构和功能障碍,包括各种原发的、继发的肾小球肾炎、肾小管损伤和肾血管病变等。复杂的发病机制与特异性治疗方案的缺乏使慢性肾病成为威胁人类生命健康的重大疾病。基于“肠-肾”轴理论,肠道菌群研究的病因学说为慢性肾病发病机制提供了一个全新的视角。概述了肠道微生态在慢性肾病发生发展过程中所发挥的作用,以及阐述以肠道菌群为靶点,中医药或益生菌益生元作为干预途径治疗慢性肾病的研究现状。这些研究将为探索针对肠道微生态的慢性肾病临床治疗新策略,提供重要的理论依据。 展开更多

关键词 慢性肾病 肠道菌群 尿毒素 中医药 益生元(菌)

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黄芩苷对辐射诱导的小鼠急性肺损伤保护作用机制研究 被引量：5

13

作者 葛永亮 陶金华 吴木军 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期613-617,共5页

目的探讨黄芩苷对辐射诱导小鼠的急性肺损伤保护作用。方法 X-线复制小鼠的急性肺损动物模型。将50只ICR小鼠随机分为空白对照组、X-线组、X-线组+地塞米松组(5mg/kg)、X-线组+黄芩苷组(20、40mg/kg)。观察各组肺组织病理学改变,测量肺... 目的探讨黄芩苷对辐射诱导小鼠的急性肺损伤保护作用。方法 X-线复制小鼠的急性肺损动物模型。将50只ICR小鼠随机分为空白对照组、X-线组、X-线组+地塞米松组(5mg/kg)、X-线组+黄芩苷组(20、40mg/kg)。观察各组肺组织病理学改变,测量肺湿/干质量比,支气管肺泡灌洗液中性粒细胞百分比、肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量及肺组织中p-NFκBp65、p-IκBα蛋白表达。结果黄芩苷组(20、40mg/kg)可有效减轻辐射所致肺组织病理学变化,能降低肺泡灌洗液中炎症细胞的数目,能显著降低肺湿/干质量比重,能提高SOD水平,并能降低MDA水平,降低p-NFκBP65和p-IκBα蛋白的表达。结论黄芩苷可减轻辐射所致急性肺组织损伤,对辐射诱导的急性肺损伤有保护作用。 展开更多

关键词 黄芩苷 辐射 急性肺损伤 NF-ΚBP65

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浅谈不同专业的外科学实验教学改革与设定 被引量：2

14

作者 朱赟嵩 黄金华 《中国卫生产业》 2017年第15期65-66,共2页

外科学是整个医学科学的重要组成部分,是实践性非常强的一门学科,是学生从基础课到临床课并成为临床医生的重要过渡。外科学是联系临床医学和基础医学的重要桥梁课程,是培养医学生实际工作能力的重要环节。一方面实践需要理论指导,另一... 外科学是整个医学科学的重要组成部分,是实践性非常强的一门学科,是学生从基础课到临床课并成为临床医生的重要过渡。外科学是联系临床医学和基础医学的重要桥梁课程,是培养医学生实际工作能力的重要环节。一方面实践需要理论指导,另一方面理论又必须在实践中理解巩固和提高;这一理论与实践相结合的过程必须通过试验实习等环节来实现;外科学总论的传统的实验教学法是不论什么专业的学生,都采用相同的教学大纲,无非是包括灭菌法抗菌法进行,如实验外科无菌技术:洗手、泡手、穿脱无菌衣、戴无菌手套、消毒铺单等练习;学生被动地接受任务,学习没有针对性。近些年,招生规模不断扩大,实验材料价格上涨,学生人数逐年增加等因素,教学经费没有得到相应的增加,又由于不断压缩实验学时,间接减少了学生的操作机会,降低学生的学习兴趣,影响到教学质量。采用不同的教学课程设置和实验项目的设定,配合各专业理论教学达到了较好的教学效果。 展开更多

关键词 外科学 不同专业 实验教学 改革

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跨学科主题教学的探索--以一节“新冠疫情”主题课为例

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作者 张弛 王亚玲 《江苏教育》 2020年第91期61-64,共4页

立足化学学科,着眼学生科学素养的培育,围绕“新冠疫情”,从病毒、消毒、医疗等方面设计了具有跨学科性质和育人功能的主题式教学活动。引导学生探析和挖掘关于病毒和疫情的学科知识,提高学生联系生活实际的能力和解决实际问题的能力。

关键词 主题式教学活动 科学素养 高中化学

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