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成人骨髓来源的多系分化持续应激细胞的培养及鉴定 被引量:1
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作者 牛学英 马萌 +2 位作者 张亚平 王晓冬 陈雪 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期529-529,共4页
目的:建立一套简便可靠的多系分化持续应激细胞(Muse)体外分离、培养和鉴定体系.方法:利用密度梯度离心法从健康成人骨髓中分离出人骨髓基质干细胞(hBMSCs),流式细胞仪对其进行鉴定;应用长时间胰酶应激法从hBMSCs中分离出Muse细胞;免疫... 目的:建立一套简便可靠的多系分化持续应激细胞(Muse)体外分离、培养和鉴定体系.方法:利用密度梯度离心法从健康成人骨髓中分离出人骨髓基质干细胞(hBMSCs),流式细胞仪对其进行鉴定;应用长时间胰酶应激法从hBMSCs中分离出Muse细胞;免疫荧光细胞化学法对其进行鉴定,并检测其多能干细胞特性及向三胚层分化的能力.结果:hBMSCs呈CD45-/CD11b-/CD90+;长时间胰酶应激法成功分离出Muse细胞,悬浮呈球状生长;Muse细胞表达SSEA3+/CD105+,Nanog、Oct4、Sox2等多能干细胞标记物表达阳性,贴壁分化后表达三胚层标记物α-SMA、AFP和NF-M.结论:从成人骨髓中成功分离Muse细胞,Muse细胞具有多能干细胞特性及向三胚层分化的能力. 展开更多
关键词 多系分化持续应激细胞 骨髓基质干细胞 骨髓 长时间胰酶应激 多能干细胞
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考尔-爱克斯诺小体在卵泡发育中的分布
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作者 徐邦生 夏平 +3 位作者 朱昌来 高银峰 王喜艳 刘军 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期675-677,共3页
考尔一爱克斯诺小体(cail-Exner body)存在于一定物种范围的卵巢卵泡中,包括人和兔,牛的腔前卵泡和小腔卵泡中也有类似结构。研究显示考尔-爱克斯诺小体出现于卵泡正常发育的早期阶段,卵泡发育越晚,考尔-爱克斯诺小体越多。其也... 考尔一爱克斯诺小体(cail-Exner body)存在于一定物种范围的卵巢卵泡中,包括人和兔,牛的腔前卵泡和小腔卵泡中也有类似结构。研究显示考尔-爱克斯诺小体出现于卵泡正常发育的早期阶段,卵泡发育越晚,考尔-爱克斯诺小体越多。其也存在于人的卵巢肿瘤中.认为卵巢颗粒细胞肿瘤与考尔-爱克斯诺小体的分化有关,同时,考尔-爱克斯诺小体也是检测颗粒细胞肿瘤的发展,估汁预后的因素之一。狗的颗粒细胞肿瘤中也可见考尔-爱克斯诺小体。小鼠腔前卵泡常被用作体外成熟的模型,但在其发育过程中对考尔-爱克斯诺小体的观察较少,扫描电镜观察未见报道。 展开更多
关键词 卵泡发育 小体 卵巢颗粒细胞肿瘤 扫描电镜观察 腔前卵泡 正常发育 卵巢肿瘤 体外成熟
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人Muse细胞体外诱导为神经前体细胞的研究 被引量:1
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作者 王学成 马萌 +4 位作者 吴煜琪 牛学英 张亚平 王晓冬 陈雪 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期218-224,共7页
探讨成人骨髓来源的Muse细胞体外诱导为神经前体细胞的技术方法。从健康成人骨髓中分离出骨髓基质细胞(h BMSCs),利用流式细胞分选技术从中筛选出Muse细胞,采取免疫荧光细胞化学染色和q PCR技术鉴定Muse细胞的多能干细胞特性;通过神经... 探讨成人骨髓来源的Muse细胞体外诱导为神经前体细胞的技术方法。从健康成人骨髓中分离出骨髓基质细胞(h BMSCs),利用流式细胞分选技术从中筛选出Muse细胞,采取免疫荧光细胞化学染色和q PCR技术鉴定Muse细胞的多能干细胞特性;通过神经诱导培养基体外诱导Muse细胞分化为神经前体细胞(Muse-NPCs),采用免疫荧光细胞化学染色和q PCR技术鉴定其神经干细胞标志物表达情况。从h BMSCs中分选出约0.58%的Muse细胞,Muse细胞表达多能干细胞标志物SSEA-3、Nanog和Oct4,其mRNA表达水平均高于h BMSCs(P<0.01);诱导后的Muse-NPCs表达神经干细胞标志物Nestin、βIII-tubulin,其mRNA表达水平均高于h BMSCs及Muse细胞(P<0.01)。从成人骨髓中成功分离出具有多能干细胞特性的Muse细胞,用体外诱导形成Muse-NPCs,可为今后细胞治疗修复神经损伤提供新的种子细胞。 展开更多
关键词 Muse细胞 神经前体细胞 流式细胞仪分选术 骨髓
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骨形态发生蛋白-6对小鼠腔前卵泡体外成熟的影响 被引量:1
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作者 王喜艳 徐邦生 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1030-1034,共5页
目的:观察骨形态发生蛋白(BMP-6)在小鼠体内和体外卯泡的定量表达,探讨外源性BMP-6对小鼠腔前卵泡体外成熟的影响及其可能的作用机制。方法:采用免疫印迹观察BMP-6蛋白在不同年龄小鼠体内,以及体外培养不同时间的卵泡中定量表达... 目的:观察骨形态发生蛋白(BMP-6)在小鼠体内和体外卯泡的定量表达,探讨外源性BMP-6对小鼠腔前卵泡体外成熟的影响及其可能的作用机制。方法:采用免疫印迹观察BMP-6蛋白在不同年龄小鼠体内,以及体外培养不同时间的卵泡中定量表达情况;采用腔前卵泡体外培养方法,将不同浓度的rhBMP-6添加至培养液中持续到培养8d或11d,观察腔前卵泡的生长、成熟情况;应用ELISA法测定和比较添加BMP-6不同剂量组在培养6、10、11d的培养液中雌二醇和孕酮的含量。结果:免疫印迹结果显示,在体内和体外培养的卵泡中均检测到BMP-6蛋白的表达,体外表达量明显低于体内。体外培养中,相对于对照组,50ng/mlBMP-6添加至培养8d显著增加腔前卵泡的成熟率,而添加至培养11d显著降低腔前卯泡的成熟率;100ng/mlBMP-6添加至培养8d和11d对腔前卵泡的成熟率无影响;50和100ng/mlBMP-6对于腔前卵泡的生长,形态上并无明显变化。ELISA结果显示,50ng/mlBMP-6添加至培养11d组中,6、10、11d培养液中雌二醇和孕酮含量低于对照组,而添加至培养8d组中,10、11d培养液中雌二醇和孕酮显著升高;100ng/mlBMP-6添加至培养8d和11d,培养液中孕酮含量明显低于其他组,但雌二醇却明显高于其他组。结论_夕h源性BMP-6能够促进腔前卵泡的体外成熟,这种作用可能是通过影响类固醇激素的合成和(或)分泌而产生的。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白-6 腔前卵泡 体外成熟 雌二醇 孕酮
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