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大鼠源卡氏肺孢子菌p55抗原基因克隆和序列分析被引量：5: 1; 作者段义农王建新 +1 位作者陈金铃董永生《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期690-692,705,共4页; 目的克隆大鼠源卡氏肺孢子菌55kDa抗原(p55)基因。方法取肺孢子菌病大鼠肺组织制备肺孢子菌DNA,并以此模板扩增p55基因,将PCR产物与pGEM-T载体连接,转化E.coli DH5a,在含氨苄青霉素(Amp)的LB培养基上筛选出重组子,提取质粒进行PCR扩增... 展开更多; 关键词卡氏肺孢子菌 55kDa抗原基因克隆序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

大鼠源肺孢子菌p55基因片段真核表达质粒的构建及表达被引量：3: 2; 作者易亮衡秦永伟 +3 位作者陈金铃朱丹丹何兴新段义农《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期25-28,共4页; 目的构建大鼠源肺孢子菌抗原p55基因片段真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞COS-7中的有效表达。方法以含有p55全长基因的质粒为模板,通过PCR扩增p55基因片段,克隆至pGEM-T载体中,经酶切后再将p55基因重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中... 展开更多; 关键词大鼠源肺孢子菌 p55基因真核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

卡氏肺孢子菌55kDa抗原的原核表达与纯化被引量：2: 3; 作者陈金铃段义农 +2 位作者朱丹丹王建新秦永伟《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期249-252,共4页; 目的体外扩增卡氏肺孢子菌(Pneumocystis carinii,Pc)55kDa抗原(p55)570bp的基因片段,构建原核表达载体pGEX-570,诱导表达并纯化重组蛋白。方法以卡氏肺孢子菌DNA为模板,扩增其基因片段,连接至pGEM-T载体,随后构建pGEX-570重组表达质粒... 展开更多; 关键词卡氏肺孢子菌 p55抗原基因克隆蛋白纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

替硝唑对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎作用的初步观察被引量：1: 4; 作者王建新段义农 +3 位作者陈金铃董永生周全蔡云平《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期896-896,F0003,共2页; 关键词卡氏肺孢子虫肺炎替硝唑治疗大鼠复方磺胺甲基异恶唑抗卡氏肺孢子虫常用药物初步免疫功能受损; 在线阅读下载PDF 职称材料

弱智儿童弓形虫抗体检测的连续观察与分析被引量：1: 5; 作者马济宏李荣 +1 位作者陆锦惠陈志新《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期782-784,共3页; 目的弓形虫感染与弱智儿童等神经系统发育迟钝儿童之间的关系,笔者在对市某社会福利院及本市某小学智力欠佳的儿童进行了弓形虫血清学的检测与分析的基础上,选择部分病例分别在治疗3个月和6个月后,采用乙酰螺旋霉素等药物治疗,用同样的... 展开更多; 关键词弓形虫感染弱智儿童弓形虫特异性Ab 间接红细胞凝集试验(IHA) 酶联免疫吸附试验(ELISA); 在线阅读下载PDF 职称材料

卡氏肺孢子虫P55抗原表位与蛋白特性的分析: 6; 作者段义农王建新陈金铃《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1022-1025,1069,共5页; 目的预测p55抗原表位及蛋白性质。方法运用生物信息学方法推测p55抗原表位及蛋白性质,分析预测结果。结果p55蛋白存在多个潜在的抗原表位,T细胞表位按预测积分高低排列位于141-158,54-68,123-137,349-364,397-414位氨基酸残基;B细胞表位... 展开更多; 关键词 p55蛋白表位卡氏肺孢子虫生物信息学分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大鼠源卡氏肺孢子菌p55抗原基因克隆和序列分析被引量：5: 1; 作者段义农王建新陈金铃董永生; 机构南通大学医学院寄生虫学教研室南通大学附属医院医学检验中心; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期690-692,705,共4页; 文摘目的克隆大鼠源卡氏肺孢子菌55kDa抗原(p55)基因。方法取肺孢子菌病大鼠肺组织制备肺孢子菌DNA,并以此模板扩增p55基因,将PCR产物与pGEM-T载体连接,转化E.coli DH5a,在含氨苄青霉素(Amp)的LB培养基上筛选出重组子,提取质粒进行PCR扩增、酶切鉴定、序列测定及序列比较分析。结果p55基因体外扩增产物长度为1286bp,重组质粒经PCR及酶切鉴定结果表明获得正确重组子,测序结果与文献报道同源性为99.8%。结论成功扩增了p55基因,并插入克隆载体pGEM-T中。p55基因的克隆为进一步建立基因分型、疫苗等研究打下基础。; 关键词卡氏肺孢子菌 55kDa抗原基因克隆序列分析; Keywords Pneumocystis carinii 55kDa antigen gene cloning sequence analysis; 分类号 R382.9 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大鼠源肺孢子菌p55基因片段真核表达质粒的构建及表达被引量：3: 2; 作者易亮衡秦永伟陈金铃朱丹丹何兴新段义农; 机构南通大学医学院寄生虫学教研室湖北省黄石市疾病预防控制中心; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期25-28,共4页; 基金南通大学自然科学基金资助项目(No.08Z044); 文摘目的构建大鼠源肺孢子菌抗原p55基因片段真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞COS-7中的有效表达。方法以含有p55全长基因的质粒为模板,通过PCR扩增p55基因片段,克隆至pGEM-T载体中,经酶切后再将p55基因重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,应用脂质体转染技术转染入COS-7细胞,RT-PCR检测其基因转录情况,SDS-PAGE鉴定其表达相应的目的蛋白质情况。结果成功扩增了p55基因片段,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,RT-PCR和SDS-PAGE方法证实该片段能在COS-7细胞中有效表达目的蛋白质。结论成功构建了大鼠源肺孢子菌p55基因片段的真核表达质粒载体,并在COS-7细胞中表达,为进一步进行核酸疫苗的研究奠定了基础。; 关键词大鼠源肺孢子菌 p55基因真核表达; Keywords Pneumocystis of rats p55 gene fragment eukaryotic expression; 分类号 R382.9 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名卡氏肺孢子菌55kDa抗原的原核表达与纯化被引量：2: 3; 作者陈金铃段义农朱丹丹王建新秦永伟; 机构南通大学医学院寄生虫学教研室南通大学附属医院临床检验中心; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期249-252,共4页; 文摘目的体外扩增卡氏肺孢子菌(Pneumocystis carinii,Pc)55kDa抗原(p55)570bp的基因片段,构建原核表达载体pGEX-570,诱导表达并纯化重组蛋白。方法以卡氏肺孢子菌DNA为模板,扩增其基因片段,连接至pGEM-T载体,随后构建pGEX-570重组表达质粒,经双酶切、PCR及测序鉴定后将其转化入BL21大肠杆菌中,经IPTG诱导表达融合蛋白。采用透析袋电泳法纯化融合蛋白。结果重组表达质粒pGEX-570经酶切,PCR鉴定及测序结果表明构建成功。IPTG诱导表达融合蛋白GST-p55/570,分子量约为47kDa。用透析袋电泳法纯化重组蛋白,经SDS-PAGE确认正确。结论本研究成功构建了pGEX-570原核表达载体,诱导表达并纯化GST-p55/570融合蛋白。为进一步开展肺孢子菌55kDa抗原的研究奠定了基础。; 关键词卡氏肺孢子菌 p55抗原基因克隆蛋白纯化; Keywords Pneumocystis carinii 55kDa antigen gene cloning purification of protein; 分类号 R382.9 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名替硝唑对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎作用的初步观察被引量：1: 4; 作者王建新段义农陈金铃董永生周全蔡云平; 机构南通大学附属医院检验医学中心南通大学基础医学院寄生虫学教研室南通大学基础医学院形态学实验室; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期896-896,F0003,共2页; 基金江苏省社会发展基金(BS2002018) 南通市社会发展基金(S2033)资助; 关键词卡氏肺孢子虫肺炎替硝唑治疗大鼠复方磺胺甲基异恶唑抗卡氏肺孢子虫常用药物初步免疫功能受损; 分类号 R563.1 [医药卫生—呼吸系统]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名弱智儿童弓形虫抗体检测的连续观察与分析被引量：1: 5; 作者马济宏李荣陆锦惠陈志新; 机构南通大学基础医学院寄生虫学教研室南通市社会福利院医务室南通市九圩港小学; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期782-784,共3页; 文摘目的弓形虫感染与弱智儿童等神经系统发育迟钝儿童之间的关系,笔者在对市某社会福利院及本市某小学智力欠佳的儿童进行了弓形虫血清学的检测与分析的基础上,选择部分病例分别在治疗3个月和6个月后,采用乙酰螺旋霉素等药物治疗,用同样的方法检测弓形虫抗体进行对照性观察。方法选择弱智儿童18人在接受用乙酰螺旋霉素治疗后的3个月和6个月采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接红细胞凝集试验(IHA)法进行弓形虫特异性Ab的检测。结果弱智儿童治疗组在治疗3个月和6个月以后的弓形虫抗体平均阳性检出率分别为16.67%,3/18(ELISA);11.11%,2/18(IHA)和5.56%,1/18,(ELISA)/5.56%,1/18,(IHA),低于弱智儿童未治疗组的平均阳性检出率(20.69%,6/29,ELISA;21.14%,7/29,IHA)。但高于正常对照组1.96%,1/51(ELISA);1.96%,1/51(IHA)。弱智儿童治疗6个月治疗组和弱智儿童未治疗组两组差异显著(X2=1.54,ELISA;X2=2.01,IHA。P<0.05)。结论儿童的弓形虫感染与其母亲在孕期或本人与动物的密切接触有关。因弓形虫能损害大脑和神经系统,严重影响儿童神经系统的发育和功能,成为优生优育的一大隐患。因此,防止母子间垂直传播和避免妇女(特别在孕期)与动物接触是预防儿童弓形虫感染的主要关键。提示临床上弱智儿童首先应及时进行弓形虫抗体的检测;其次应及时应用抗弓形虫的药物治疗。有利于弱智儿童智力的尽可能恢复。; 关键词弓形虫感染弱智儿童弓形虫特异性Ab 间接红细胞凝集试验(IHA) 酶联免疫吸附试验(ELISA); Keywords Toxoplasma gondii infection feeble intelligence children distinctive antibody of Toxoplasma-gondiitindirect Hemagglutination Test （IHA） Enzyme Linked Immunosorbent Assay Test （ELISA）; 分类号 R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名卡氏肺孢子虫P55抗原表位与蛋白特性的分析: 6; 作者段义农王建新陈金铃; 机构南通大学医学院寄生虫学教研室南通大学附属医院医学检验中心; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1022-1025,1069,共5页; 文摘目的预测p55抗原表位及蛋白性质。方法运用生物信息学方法推测p55抗原表位及蛋白性质,分析预测结果。结果p55蛋白存在多个潜在的抗原表位,T细胞表位按预测积分高低排列位于141-158,54-68,123-137,349-364,397-414位氨基酸残基;B细胞表位在37-41,74-79,111-119,148-161,199-210,240-250,256-266,295-314,322-360位氨基酸残基等部位。P55重组融合蛋白为可溶性蛋白的概率是92%。结论p55抗原表位可能主要存在于148-161、295-320、337-356氨基酸序列区域内或其附近。该预测p55抗原表位可以有目的地克隆重组基因片段,为研究高效的表位疫苗奠定基础。; 关键词 p55蛋白表位卡氏肺孢子虫生物信息学分析; Keywords p55 protein epitope Pneumocystis carinil bioinformatics analysis; 分类号 R382.3 [医药卫生—医学寄生虫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	大鼠源卡氏肺孢子菌p55抗原基因克隆和序列分析	段义农王建新陈金铃董永生	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	大鼠源肺孢子菌p55基因片段真核表达质粒的构建及表达	易亮衡秦永伟陈金铃朱丹丹何兴新段义农	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	卡氏肺孢子菌55kDa抗原的原核表达与纯化	陈金铃段义农朱丹丹王建新秦永伟	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	替硝唑对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎作用的初步观察	王建新段义农陈金铃董永生周全蔡云平	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	弱智儿童弓形虫抗体检测的连续观察与分析	马济宏李荣陆锦惠陈志新	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	卡氏肺孢子虫P55抗原表位与蛋白特性的分析	段义农王建新陈金铃	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	0	在线阅读下载PDF 职称材料