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神经再生素对新生大鼠脊髓细胞凋亡的影响 被引量:26
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作者 陈罡 王晓冬 +1 位作者 张沛云 丁斐 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期58-61,共4页
目的 :观察神经再生素对新生大鼠脊髓细胞凋亡的影响。方法 :将新生 SD大鼠一侧坐骨神经切断后 ,用无菌止血海绵包裹断离的神经近侧端 ,海绵内加入神经再生素 ,术后 3、6、1 2 h用 TUNEL法在光镜下检测 L4 -L5脊髓细胞凋亡情况 ,分别以... 目的 :观察神经再生素对新生大鼠脊髓细胞凋亡的影响。方法 :将新生 SD大鼠一侧坐骨神经切断后 ,用无菌止血海绵包裹断离的神经近侧端 ,海绵内加入神经再生素 ,术后 3、6、1 2 h用 TUNEL法在光镜下检测 L4 -L5脊髓细胞凋亡情况 ,分别以神经生长因子和生理盐水作为阳性和阴性对照。结果 :新生大鼠在坐骨神经切断后脊髓细胞出现大量凋亡 ,神经再生素组凋亡细胞数量较生理盐水组显著减少 ( P<0 .0 1 ) ;神经再生素组与神经生长因子组之间凋亡细胞数量的差别无显著性意义 ( P>0 .0 5 )。结论 展开更多
关键词 神经再生素 新生大鼠 坐骨神经 脊髓细胞凋亡
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Tropic1808基因的原核表达及其表达产物的生物活性 被引量:10
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作者 崔学芝 顾晓松 +2 位作者 张沛云 王志刚 姚登兵 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期569-573,共5页
Tropic180 8基因是新近获得的一个鼠源性的cDNA .Tropic180 8基因开放阅读框架片段通过PCR方法从质粒中扩增后 ,重组入表达载体pET 2 1a中 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3 ) .用IPTG诱导目的蛋白的表达 ,SDS PAGE并凝胶图象分析确定目的蛋白表... Tropic180 8基因是新近获得的一个鼠源性的cDNA .Tropic180 8基因开放阅读框架片段通过PCR方法从质粒中扩增后 ,重组入表达载体pET 2 1a中 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3 ) .用IPTG诱导目的蛋白的表达 ,SDS PAGE并凝胶图象分析确定目的蛋白表达水平占细菌总蛋白的 14%以上 .表达蛋白在N端融合有 16个氨基酸 ,将表达蛋白电转移至PVDF膜 .氨基酸序列分析表明 ,其N端第 17~ 2 5位氨基酸序列与Tropic180 8基因编码序列一致 .利用融合部分含T7·Tag ,通过亲和层析纯化表达蛋白 ,经Westernblot检测为目的蛋白 ,加入到无血清培养的新生SD大鼠背根神经节 (DRG)中 ,观察到表达蛋白对DRG具有促进存活和促进突起生长的作用 . 展开更多
关键词 Tropic1808基因 原核表达 氨基酸序列分析 背根神经节 生物活性 神经再生
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银杏内酯对缺氧诱导的大鼠皮层神经元早期凋亡的影响 被引量:9
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作者 袁颖 张沛云 +3 位作者 金淑仪 陈宏山 王晓冬 陈罡 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期465-468,共4页
目的 :观察银杏内酯 (ginkgolide ,Gin)对缺氧诱导的大鼠皮层神经元凋亡的保护作用。方法 :选用胎龄 14~ 16d的SD胎鼠的大脑皮层细胞进行原代培养 ,建立缺氧神经元损伤模型。实验分为药物实验组 (Gin组 )、空白对照组、阳性对照组 (MK ... 目的 :观察银杏内酯 (ginkgolide ,Gin)对缺氧诱导的大鼠皮层神经元凋亡的保护作用。方法 :选用胎龄 14~ 16d的SD胎鼠的大脑皮层细胞进行原代培养 ,建立缺氧神经元损伤模型。实验分为药物实验组 (Gin组 )、空白对照组、阳性对照组 (MK 80 1) ,每组均进行有糖和无糖培养两种处理。应用MTT法分析细胞存活率、AnnexinV PE双标流式细胞仪法定量分析细胞早期凋亡。结果 :MTT结果显示 ,Gin使皮层神经元存活率明显增加 ,且有糖的缺氧组皮层神经元存活率优于无糖组 ;流式细胞仪测定结果显示 ,预先加入Gin(终浓度 37 5 μg/ml)的一组神经元的凋亡峰明显低于空白组 ,而无糖处理组凋亡峰均高于有糖处理组。结论 :银杏内酯 (37 5 μg/ml)对缺氧损伤的皮层神经元具有保护作用 ,可拮抗缺氧条件下体外培养的皮层神经元的早期凋亡。 展开更多
关键词 原代培养 皮层神经元 缺氧复氧 银杏内酯 细胞凋亡
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神经再生素对大鼠大脑皮层细胞的作用 被引量:1
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作者 顾星星 丁斐 +2 位作者 王林芳 王东 顾晓松 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期365-368,共4页
目的 :观察神经再生素 (NRF)作用于离体培养的SD大鼠大脑皮层细胞过程中细胞活性、基因的表达变化 ,探讨NRF促神经生长机制。方法 :SD大鼠大脑皮层细胞分离、培养于含NRFL15培养基 ,采用RT PCR方法检测培养细胞生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3... 目的 :观察神经再生素 (NRF)作用于离体培养的SD大鼠大脑皮层细胞过程中细胞活性、基因的表达变化 ,探讨NRF促神经生长机制。方法 :SD大鼠大脑皮层细胞分离、培养于含NRFL15培养基 ,采用RT PCR方法检测培养细胞生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3)、神经丝蛋白 (NF L)和锌指样蛋白 (DDP2 )基因经NRF作用后基因表达变化 ,MTT法检测细胞活力。结果 :2 μg/mlNRF作用于培养大脑皮层细胞为较佳使用浓度 ;NRF作用 6~ 12h ,GAP 4 3、NF L和DDP2基因表达分别上调至峰值 2 0 0 % ,15 0 % ,135 % ;NRF作用 2 4h后 ,基因表达回复至正常值 ,而细胞活力仍上调 2 3 2 %。结论 :NRF可通过上调神经生长相关基因表达 ,提高细胞活力达到促神经生长。 展开更多
关键词 神经再生素 基因表达 细胞活性 大脑皮层细胞
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生长相关蛋白在损伤坐骨神经中的表达 被引量:2
5
作者 崔学芝 王志刚 顾晓松 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期55-57,共3页
目的 :研究大鼠周围神经损伤与再生过程中生长相关蛋白的表达。方法 :取正常SD大鼠坐骨神经和离断损伤后不同时间近侧端和远侧端神经组织 ,采用Anti GAP 43抗体以WesternBlot方法检测GAP 43的表达变化。结果 :NC膜上 43kDa位置出现阳性... 目的 :研究大鼠周围神经损伤与再生过程中生长相关蛋白的表达。方法 :取正常SD大鼠坐骨神经和离断损伤后不同时间近侧端和远侧端神经组织 ,采用Anti GAP 43抗体以WesternBlot方法检测GAP 43的表达变化。结果 :NC膜上 43kDa位置出现阳性反应条带 ,在正常坐骨神经中反应微弱 ,损伤后明显加强 ,随损伤时间延长 ,神经近侧端的反应无明显改变 ,神经远侧端的反应逐渐加强 ,以第 3周为最强 ,之后逐渐减弱。结论 :GAP 43在正常坐骨神经中低表达 ,损伤后近侧端与远侧端表达均增加 ,远侧端的表达增加以第 3周为高峰。 展开更多
关键词 生长相关蛋白 坐骨神经损伤 WesterBlot 大鼠
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建立新生鼠脊髓细胞凋亡的动物模型
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作者 陈罡 王晓冬 张沛云 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期215-218,T003,共5页
本研究目的在于制作新生鼠脊髓细胞 (神经细胞和神经胶质细胞 )凋亡模型 ,为筛选神经组织的保护物质提供新手段。为此 ,将新生大鼠一侧坐骨神经切断后 ,用无菌止血海绵包裹断离的神经近侧断端 ,海绵内加入无菌生理盐水或 NGF,术后 3、6... 本研究目的在于制作新生鼠脊髓细胞 (神经细胞和神经胶质细胞 )凋亡模型 ,为筛选神经组织的保护物质提供新手段。为此 ,将新生大鼠一侧坐骨神经切断后 ,用无菌止血海绵包裹断离的神经近侧断端 ,海绵内加入无菌生理盐水或 NGF,术后 3、6、12 h用 TU NEL 法检测脊髓细胞凋亡状况。结果表明 ,TUNEL显示生理盐水组在三个时间段均出现大量脊髓细胞凋亡 ,而 NGF组的凋亡细胞数量很少。提示 。 展开更多
关键词 新生鼠 脊髓细胞凋亡 动物模型 坐骨神经 TUNEL法
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