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快速检测细菌并革兰分型的半巢式聚合酶链反应及其初步应用 被引量:4
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作者 汤伟 汪晓莺 +1 位作者 马国光 褚少鹏 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第2期164-168,共5页
目的以半巢式聚合酶链反应(PCR)检测细菌及作革兰阴、阳性分型,并与细菌培养法比较。方法以细菌16SrRNA基因为靶序列,采用一对通用引物(pm1,pm3)和一条革兰阴性型特异性引物(pm2),以半巢式PCR方法扩增实验室保留菌株的DNA并作出革兰染... 目的以半巢式聚合酶链反应(PCR)检测细菌及作革兰阴、阳性分型,并与细菌培养法比较。方法以细菌16SrRNA基因为靶序列,采用一对通用引物(pm1,pm3)和一条革兰阴性型特异性引物(pm2),以半巢式PCR方法扩增实验室保留菌株的DNA并作出革兰染色分型;以人类外周血白细胞基因组DNA、HBVDNA阳性血清以及白假丝酵母菌为对照,检测此方法的特异性;采用倍比稀释菌液作敏感性实验;与细菌培养法比较,验证此方法检测临床标本的敏感性。结果对17个实验室保留菌株进行检测,以通用引物对作第1次PCR均得到371bp长度的DNA片段;再以革兰阴性菌特异引物对(pm2,pm3)作第2次PCR,9种阴性菌均得到353bp的DNA片段,而8种阳性菌未被扩增。特异性实验表明,此通用引物与人类基因组DNA、真菌及病毒无交叉反应。敏感性实验表明,采用半巢式PCR可检测出3个CFU的细菌。对120份临床标本检测,半巢式PCR检测阳性率(29.2%)显著高于细菌培养法检测阳性率(17.5%)。结论此半巢式PCR检测细菌方法,具有特异、敏感、快速的特点,并能对细菌进行革兰阴性、阳性分型,可用于临床感染性疾病的初步诊断。 展开更多
关键词 半巢式聚合酶链反应 16SRRNA基因 细菌培养
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狂犬病疫联合干扰素的应用研究 被引量:4
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作者 钱绩虎 丁昌慧 +3 位作者 严建国 汤权 朱金阳 曹树梅 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第2期59-61,34,共4页
目的研究IFN+2-2-1程序和2-2-1程序应用的可行性,探讨IFN的免疫调节作用。方法IFN+2-2-1程序:于0、7、14天分别注射5.0、5.0、2.5IUPHKCV,于0天同时加注20万IUα-IFN;2-2-1程序:于0、7、14天分别注射5.0、50、2.5IUPHKCV;... 目的研究IFN+2-2-1程序和2-2-1程序应用的可行性,探讨IFN的免疫调节作用。方法IFN+2-2-1程序:于0、7、14天分别注射5.0、5.0、2.5IUPHKCV,于0天同时加注20万IUα-IFN;2-2-1程序:于0、7、14天分别注射5.0、50、2.5IUPHKCV;对照:应用WHO推荐的常规程序。结果①3种程序免疫后的GWT:7天时分别为1.71、1.57、1.21(P<0.05);14天时分别为62.77、58.79、28.36(P<0.01);45天时分别为76.64、72.90、62.77。②各组的阳转率:7天时分别为55.00%、33.3%、20.00%(P<0.05);14天时全部达到100%。③各组的各种副反应发生率(在0~55%之间)均无显著性差别。结论小剂量的IFN有增强免疫应答的作用;首次免疫时用双倍剂量的疫苗有显著的高免疫应答效应;IFN+2-2-1程序优于2-2-1程序,后者又优于常规程序。 展开更多
关键词 狂犬病 狂犬病疫苗 干扰素 免疫程序 免疫调节
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