细胞毒作用对周期型马来丝虫微丝蚴化学元素含量的影响

1

作者 方政 史玉坤 +2 位作者 黄为群 季莘 李荣 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第2期60-62,共3页

目的　通过观察细胞毒作用对周期型马来丝虫微丝蚴 (mf)化学元素含量的影响 ,进一步探讨宿主体内杀伤虫体的机制。方法　应用原子吸收光谱分析法对细胞毒作用前后的周期型马来丝虫mf7种微量元素和 2种常量元素的含量进行检测分析。结果... 目的　通过观察细胞毒作用对周期型马来丝虫微丝蚴 (mf)化学元素含量的影响 ,进一步探讨宿主体内杀伤虫体的机制。方法　应用原子吸收光谱分析法对细胞毒作用前后的周期型马来丝虫mf7种微量元素和 2种常量元素的含量进行检测分析。结果　所测的周期型马来丝虫mf7种微量元素中铁 (Fe)含量最高 ;镉 (Cd)含量最低。常量元素钙 (Ca)高于镁(Mg)。经细胞毒作用后虫体各微量元素和常量元素含量均有所下降 ,尤其是微量元素中的铁 (Fe)、铜 (Cu)、锰 (Mn)、铬 (Cr)、镉 (Cd)铝 (Al)和常量元素中的镁 (Mg)下降显著 (P <0 0 1 )。结论　经细胞毒作用后虫体内的微量元素和常量元素大量丢失 ,造成其营养代谢和生理功能的障碍 ,可能是宿主体内杀伤丝虫mf。 展开更多

关键词 细胞毒作用 马来丝虫 微丝蚴 化学元素 含量

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不孕症患者弓形虫抗体的临床检测与分析 被引量：17

2

作者 马济宏 郭汉琴 蔡云平 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1996年第5期F003-F003,共1页

不孕症患者弓形虫抗体的临床检测与分析马济宏，郭汉琴，蔡云平由弓形虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉｉ）所引起的弓形虫病，不同国家和地区的感染率（０．６～９４％）差异很大，平均在２５～５０％左右。国外报道自然人群感染率... 不孕症患者弓形虫抗体的临床检测与分析马济宏，郭汉琴，蔡云平由弓形虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉｉ）所引起的弓形虫病，不同国家和地区的感染率（０．６～９４％）差异很大，平均在２５～５０％左右。国外报道自然人群感染率５０～８０％［１］，国内报告为０．... 展开更多

关键词 女性 不孕症 弓形体 抗体

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大鼠源卡氏肺孢子菌p55抗原基因克隆和序列分析 被引量：5

3

作者 段义农 王建新 +1 位作者 陈金铃 董永生 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期690-692,705,共4页

目的克隆大鼠源卡氏肺孢子菌55kDa抗原(p55)基因。方法取肺孢子菌病大鼠肺组织制备肺孢子菌DNA,并以此模板扩增p55基因,将PCR产物与pGEM-T载体连接,转化E.coli DH5a,在含氨苄青霉素(Amp)的LB培养基上筛选出重组子,提取质粒进行PCR扩增... 目的克隆大鼠源卡氏肺孢子菌55kDa抗原(p55)基因。方法取肺孢子菌病大鼠肺组织制备肺孢子菌DNA,并以此模板扩增p55基因,将PCR产物与pGEM-T载体连接,转化E.coli DH5a,在含氨苄青霉素(Amp)的LB培养基上筛选出重组子,提取质粒进行PCR扩增、酶切鉴定、序列测定及序列比较分析。结果p55基因体外扩增产物长度为1286bp,重组质粒经PCR及酶切鉴定结果表明获得正确重组子,测序结果与文献报道同源性为99.8%。结论成功扩增了p55基因,并插入克隆载体pGEM-T中。p55基因的克隆为进一步建立基因分型、疫苗等研究打下基础。 展开更多

关键词 卡氏肺孢子菌 55kDa抗原 基因克隆 序列分析

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弓形虫表膜主要分子抗原的免疫印迹分析 被引量：6

4

作者 沈继龙 夏惠 马济宏 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1993年第4期2-4,共3页

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹(immunoblotting)和A蛋白酶联免疫吸附试验(SPA-ELISA)对弓形虫RH株速殖子表膜进行了免疫化学研究,结果见到,膜组分较其他组分抗原用于血清学诊断具有更高的敏感性。分子量分别为30KD和6... 本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹(immunoblotting)和A蛋白酶联免疫吸附试验(SPA-ELISA)对弓形虫RH株速殖子表膜进行了免疫化学研究,结果见到,膜组分较其他组分抗原用于血清学诊断具有更高的敏感性。分子量分别为30KD和6.5KD的膜蛋白为速殖子表膜主要抗原。它们在膜组分中含量甚微,但具有很强的免疫反应性,其中6.5KD抗原仅见于膜组分而未见于分泌排泄抗原中。 展开更多

关键词 免疫印迹 抗原 弓形体 虫体表膜

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大鼠源肺孢子菌p55基因片段真核表达质粒的构建及表达 被引量：3

5

作者 易亮衡 秦永伟 +3 位作者 陈金铃 朱丹丹 何兴新 段义农 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期25-28,共4页

目的构建大鼠源肺孢子菌抗原p55基因片段真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞COS-7中的有效表达。方法以含有p55全长基因的质粒为模板,通过PCR扩增p55基因片段,克隆至pGEM-T载体中,经酶切后再将p55基因重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中... 目的构建大鼠源肺孢子菌抗原p55基因片段真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞COS-7中的有效表达。方法以含有p55全长基因的质粒为模板,通过PCR扩增p55基因片段,克隆至pGEM-T载体中,经酶切后再将p55基因重组至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,应用脂质体转染技术转染入COS-7细胞,RT-PCR检测其基因转录情况,SDS-PAGE鉴定其表达相应的目的蛋白质情况。结果成功扩增了p55基因片段,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-582,RT-PCR和SDS-PAGE方法证实该片段能在COS-7细胞中有效表达目的蛋白质。结论成功构建了大鼠源肺孢子菌p55基因片段的真核表达质粒载体,并在COS-7细胞中表达,为进一步进行核酸疫苗的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 大鼠源肺孢子菌 p55基因 真核表达

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卡氏肺孢子菌55kDa抗原的原核表达与纯化 被引量：2

6

作者 陈金铃 段义农 +2 位作者 朱丹丹 王建新 秦永伟 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期249-252,共4页

目的体外扩增卡氏肺孢子菌(Pneumocystis carinii,Pc)55kDa抗原(p55)570bp的基因片段,构建原核表达载体pGEX-570,诱导表达并纯化重组蛋白。方法以卡氏肺孢子菌DNA为模板,扩增其基因片段,连接至pGEM-T载体,随后构建pGEX-570重组表达质粒... 目的体外扩增卡氏肺孢子菌(Pneumocystis carinii,Pc)55kDa抗原(p55)570bp的基因片段,构建原核表达载体pGEX-570,诱导表达并纯化重组蛋白。方法以卡氏肺孢子菌DNA为模板,扩增其基因片段,连接至pGEM-T载体,随后构建pGEX-570重组表达质粒,经双酶切、PCR及测序鉴定后将其转化入BL21大肠杆菌中,经IPTG诱导表达融合蛋白。采用透析袋电泳法纯化融合蛋白。结果重组表达质粒pGEX-570经酶切,PCR鉴定及测序结果表明构建成功。IPTG诱导表达融合蛋白GST-p55/570,分子量约为47kDa。用透析袋电泳法纯化重组蛋白,经SDS-PAGE确认正确。结论本研究成功构建了pGEX-570原核表达载体,诱导表达并纯化GST-p55/570融合蛋白。为进一步开展肺孢子菌55kDa抗原的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 卡氏肺孢子菌 p55抗原 基因克隆 蛋白纯化

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恶性疟原虫CSP基因重组蛋白及DNA免疫诱导小鼠体液免疫应答比较 被引量：2

7

作者 方政 刘彦文 +3 位作者 史玉坤 余新炳 黄为群 季莘 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第2期54-56,共3页

本文利用恶性疟原虫FCC1/HN株环子孢子蛋白 (PfCSP)基因DNA质粒通过不同途径、不同剂量免疫小鼠 ,观察其产生的体液免疫应答反应 ,并将其与相应的重组表达蛋白疫苗进行比较。结果显示 :DNA免疫刺激机体产生抗体反应强度的免疫途径依次... 本文利用恶性疟原虫FCC1/HN株环子孢子蛋白 (PfCSP)基因DNA质粒通过不同途径、不同剂量免疫小鼠 ,观察其产生的体液免疫应答反应 ,并将其与相应的重组表达蛋白疫苗进行比较。结果显示 :DNA免疫刺激机体产生抗体反应强度的免疫途径依次为肌肉、静脉和皮下 ;宿主对DNA免疫存在一定的剂量依赖性 ;ELISA和Dot -ELISA检测免疫后 4周和 7周 ,DNA质粒组刺激机体产生抗体的滴度均显著低于相应的重组蛋白组。表明PfCSPDNA疫苗与重组表达蛋白疫苗均可刺激小鼠产生特异性体液免疫应答 。 展开更多

关键词 恶性疟原虫 环子孢子蛋白 DNA免疫 重组表达蛋白 体液免疫应答 寄生虫疫苗

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卫氏并殖吸虫感染犬循环免疫复合物和循环抗原的动态比较 被引量：2

8

作者 段义农 邵义祥 +5 位作者 朱顺星 彭光仁 张耀娟 章子豪 侯敏 吴观陵 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1996年第5期52-53,51,共3页

卫氏并殖吸虫感染犬循环免疫复合物和循环抗原的动态比较段义农，邵义祥，朱顺星，彭光仁，张耀娟，章子豪，侯敏，吴观陵卫氏并殖吸虫病是我国流行较广的寄生虫病之一，病原学诊断较为困难。近年来，以虫源性ＣＡｇ为检测靶标的肺吸虫... 卫氏并殖吸虫感染犬循环免疫复合物和循环抗原的动态比较段义农，邵义祥，朱顺星，彭光仁，张耀娟，章子豪，侯敏，吴观陵卫氏并殖吸虫病是我国流行较广的寄生虫病之一，病原学诊断较为困难。近年来，以虫源性ＣＡｇ为检测靶标的肺吸虫病血清学诊断技术，在早期诊断、指示... 展开更多

关键词 吸虫 卫氏并吸虫 并殖吸虫 免疫复合物 循环抗原

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弓形虫感染与淋病关系初步调查研究 被引量：5

9

作者 马济宏 郭汉琴 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1995年第2期61-62,共2页

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对临床上可疑的淋病双球菌感染者１３７６人以及健康大学生５００人血清标本进行了弓形虫特异性抗体检测，总检出率为１．４４％（２７／１８７６），其中淋病组弓形虫抗体平均检出率（３．３３％，１... 用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对临床上可疑的淋病双球菌感染者１３７６人以及健康大学生５００人血清标本进行了弓形虫特异性抗体检测，总检出率为１．４４％（２７／１８７６），其中淋病组弓形虫抗体平均检出率（３．３３％，１９／５７１）高于非淋病组（０．４９％，４／８０５）和健康组（０．２３％，１／４２６）。差异显著（ｘ２＝１６．２８，Ｐ＜０．０１；ｘ２＝１１．８７，Ｐ＜０．０１）。提示了弓形虫感染与淋病之间似存在一定关系。年龄以２１～２９岁组为主，与男女性别无关。建议久治不愈的淋病患者，特别是有过猫、狗等动物密切接触史者应引起医务工作者对淋病合并弓形虫感染的足够重视，以免造成不良后果。对此类患者可常规检测弓形虫抗体和治疗时加服磺胺或乙酰螺旋霉素等有效抗弓形虫药物。 展开更多

关键词 弓形体 酶联免疫吸附法 淋病双球菌

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大鼠肺微量元素变化与卡氏肺孢子虫感染关系的探讨 被引量：1

10

作者 段义农 李荣 +1 位作者 周全 彭光仁 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第6期81-83,共3页

目的　检测卡氏肺孢子虫感染对大鼠肺组织 6种微量元素 (Ca+ + 、Mg+ + 、Fe+ + 、Cu+ + 、Zn+ + 、Mn+ + )的影响。方法　 30只SD大鼠随机分为实验组和对照组。实验组每只大鼠皮下注射地塞米松 1mg/次 ,每周 2次 ,诱导卡氏肺孢子虫感染... 目的　检测卡氏肺孢子虫感染对大鼠肺组织 6种微量元素 (Ca+ + 、Mg+ + 、Fe+ + 、Cu+ + 、Zn+ + 、Mn+ + )的影响。方法　 30只SD大鼠随机分为实验组和对照组。实验组每只大鼠皮下注射地塞米松 1mg/次 ,每周 2次 ,诱导卡氏肺孢子虫感染。 10周后将大鼠处死 ,取肺组织 ,用原子吸收分光光度计测定其微量元素的变化。结果　与PCP阴性组及对照组相比较 ,感染组肺组织中Zn+ + 的含量明显低于对照组 (P <0 0 5 ) ,Ca+ + 、Mg+ + 的含量明显高于对照组 (P <0 0 1～ 0 0 5 ) ,Fe+ + 、Cu+ + 、Mn+ + 的含量变化不明显。结论　卡氏肺孢子虫感染能引起大鼠肺组织微量元素的变化。 展开更多

关键词 卡氏肺孢子虫 微量元素 肺 卡氏肺孢子虫感染

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恶性疟原虫FCC1/HN株CSP抗原细胞免疫应答IL-2和IFN-γ的体外诱生分析 被引量：1

11

作者 方政 刘彦文 +3 位作者 黄为群 季莘 史玉坤 余新炳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第2期32-34,共3页

本实验利用恶性疟原虫FCC1／HN株CSP抗原基因在真核细胞（HeLa）中高效表达，将纯化的表达蛋白作为候选疫苗免疫小鼠，并通过体外诱生检测小鼠脾细胞白介素2（IL-2）和γ干扰素（IFN-γ）水平。结果显示经疫苗免疫后的BALB／C小鼠脾细... 本实验利用恶性疟原虫FCC1／HN株CSP抗原基因在真核细胞（HeLa）中高效表达，将纯化的表达蛋白作为候选疫苗免疫小鼠，并通过体外诱生检测小鼠脾细胞白介素2（IL-2）和γ干扰素（IFN-γ）水平。结果显示经疫苗免疫后的BALB／C小鼠脾细胞体外经特异性刺激后产生的IL-2和IFN-γ水平有显著提高。与我们前期研究结果比较，表明对该疫苗特异性的IL-2、IFN-γ的产生与淋巴细胞增殖以及NK细胞活性增高有明显的相关性；该疫苗对T细胞有一定的刺激能力，可诱导小鼠产生较强的细胞免疫反应。 展开更多

关键词 恶性疟原子 环子孢子抗原 IL-2 IFN-Γ

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疥宁霜等治疗蠕形螨性外耳道瘙痒症的疗效观察 被引量：1

12

作者 马济宏 沈继龙 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1992年第6期15-16,共2页

本文对南通市不同人群外耳道瘙痒患者822人采用透明胶带法进行毛囊蠕形螨(Demodex folliculorum)和皮脂蠕形螨(D.brevis)病原学检查,并对阳性的188人分别选用疥宁霜、灭滴灵+维生素B_6及4％硼酸酒精治疗,1周后复查173例,蠕形螨阴转率分... 本文对南通市不同人群外耳道瘙痒患者822人采用透明胶带法进行毛囊蠕形螨(Demodex folliculorum)和皮脂蠕形螨(D.brevis)病原学检查,并对阳性的188人分别选用疥宁霜、灭滴灵+维生素B_6及4％硼酸酒精治疗,1周后复查173例,蠕形螨阴转率分别为98.4％、94.4％和70.2％。控制外耳道瘙痒的症状,总有效率分别为88.7％、70.4％和31.60％。疥宁霜和灭滴灵+维生素B_6两治疗组优于4％硼酸酒精治疗组(P<0.01)。提示疥宁霜和灭滴灵+维生素B_6在治疗蠕形螨性外耳道瘙痒症中疗效较佳。 展开更多

关键词 螨 疥宁霜 瘙痒 外耳道 甲硝羟乙唑

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恶性疟原虫FCC1/HN株CSP基因表达产物免疫鼠体内抗原定位研究

13

作者 方政 刘彦文 +2 位作者 鄂群 史玉坤 余新炳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第3期40-42,F002,共4页

目的　用恶性疟原虫FCC1/HN株CSP基因表达产物免疫小鼠 ,观察其在宿主体内各组织的抗原分布情况。方法　提取目的基因PfCSP在HeLa细胞中的表达产物 ,免疫注射BALB/c小鼠。取免疫后 4周及 7周小鼠心脏、肝脏、脑、脾及肌肉 ,通过免疫酶... 目的　用恶性疟原虫FCC1/HN株CSP基因表达产物免疫小鼠 ,观察其在宿主体内各组织的抗原分布情况。方法　提取目的基因PfCSP在HeLa细胞中的表达产物 ,免疫注射BALB/c小鼠。取免疫后 4周及 7周小鼠心脏、肝脏、脑、脾及肌肉 ,通过免疫酶组织化学法及间接免疫荧光法检测组织内的抗原。结果　免疫 7周后的BALB/c小鼠肝脏组织枯否氏细胞内及肝细胞膜上可见棕黄色特异性抗原 -抗体反应 ,而免疫鼠心、脑、肌肉未出现明显的阳性反应。结论　恶性疟原虫FCC1/HN株CSP基因表达蛋白能被肝实质细胞特异性识别 。 展开更多

关键词 恶性疟原虫 环子孢子蛋白 CSP基因 基因表达产物 抗原定位

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卡氏肺孢子虫P55抗原表位与蛋白特性的分析

14

作者 段义农 王建新 陈金铃 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1022-1025,1069,共5页

目的预测p55抗原表位及蛋白性质。方法运用生物信息学方法推测p55抗原表位及蛋白性质,分析预测结果。结果p55蛋白存在多个潜在的抗原表位,T细胞表位按预测积分高低排列位于141-158,54-68,123-137,349-364,397-414位氨基酸残基;B细胞表位... 目的预测p55抗原表位及蛋白性质。方法运用生物信息学方法推测p55抗原表位及蛋白性质,分析预测结果。结果p55蛋白存在多个潜在的抗原表位,T细胞表位按预测积分高低排列位于141-158,54-68,123-137,349-364,397-414位氨基酸残基;B细胞表位在37-41,74-79,111-119,148-161,199-210,240-250,256-266,295-314,322-360位氨基酸残基等部位。P55重组融合蛋白为可溶性蛋白的概率是92%。结论p55抗原表位可能主要存在于148-161、295-320、337-356氨基酸序列区域内或其附近。该预测p55抗原表位可以有目的地克隆重组基因片段,为研究高效的表位疫苗奠定基础。 展开更多

关键词 p55蛋白 表位 卡氏肺孢子虫 生物信息学分析

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细胞毒作用杀伤周期型马来丝虫幼虫的超微结构研究

15

作者 方政 徐亚雄 +1 位作者 张天一 林琳 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1996年第6期20-22,共3页

本文在特异性免疫血清存在下，就嗜中性粒细胞和巨噬细胞对周期型马来丝虫幼虫的细胞毒作用进行了超微结构观察。结果显示，两种效应细胞对虫体都具有强大的杀伤作用。该作用开始于效应细胞伸出伪足包围并粘附于虫体，然后分泌颗粒性物... 本文在特异性免疫血清存在下，就嗜中性粒细胞和巨噬细胞对周期型马来丝虫幼虫的细胞毒作用进行了超微结构观察。结果显示，两种效应细胞对虫体都具有强大的杀伤作用。该作用开始于效应细胞伸出伪足包围并粘附于虫体，然后分泌颗粒性物质、释放各种对虫体有毒性作用的酶和其它生物活性成分于虫体表面。由于微丝蚴鞘膜和角皮层的溶解和脱落，导致了虫体内部组织迅速变性坏死。电镜下可见虫体肿胀变形、核溶解和空泡样坏死以及最终崩解剥落成絮状等连续变化。本试验还发现效应细胞伪足插入脱鞘微丝蚴内部的现象，说明微丝蚴脱鞘后更易受到效应细胞的攻击。扫描电镜观察到被效应细胞粘附的感染期幼虫表面出现裂痕。 展开更多

关键词 马来丝虫 细胞毒 超微结构

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PVC-Fast-Dot-ELISA法检测华支睾吸虫抗体的研究

16

作者 马济宏 李荣 +1 位作者 郭汉琴 杨汉明 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第4期69-70,46,共3页

目的　了解和掌握华支睾吸虫在苏北南通不同人群中的感染情况 ,分析和找出华枝睾吸虫感染与人们的年龄、职业和生活尤其是饮食习惯等因素之间可能存在的联系。方法　应用 PVC- Fast- Dot- EL ISA法检测受检者血清华枝睾吸虫抗体。结果... 目的　了解和掌握华支睾吸虫在苏北南通不同人群中的感染情况 ,分析和找出华枝睾吸虫感染与人们的年龄、职业和生活尤其是饮食习惯等因素之间可能存在的联系。方法　应用 PVC- Fast- Dot- EL ISA法检测受检者血清华枝睾吸虫抗体。结果　华枝睾吸虫抗体总阳性检出率为 3.92 % (17/ 434)。其中厨师、渔民区 2 0岁以上成人及个体户老板华枝睾吸虫抗体阳性检出率分别为 6 .45 % (2 / 31)、5 .5 9% (9/ 16 1)和 4.2 9% (3/ 70 ) ,明显高于正常对照组 (0 .86 % ,1/ 115 ) ,统计学上差异显著。 (x2 值分别是 3.5 2、4.0 1和 2 .2 8,P值均 <0 .0 1)结论　苏北南通华枝睾吸虫人体感染的情况不容忽视。华枝睾吸虫感染与职业以及接触生鱼和吞食半生不熟的鱼虾的机会密切相关。建议有生鱼接触史或经常食用生及半生不熟鱼虾者必须定期检测华枝睾吸虫抗体 。 展开更多

关键词 华枝睾吸虫病 PVC-Fast-Dot-ELISA 血清抗体

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弓形虫在葡萄膜炎等眼疾中致病作用的探讨 被引量：2

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作者 马济宏 郭汉琴 高小伟 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第1期F003-F003,F004,共2页

关键词 弓形体病 葡萄膜炎 致病作用

全文增补中