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循环微囊泡miR-27a参与脑缺血小鼠血脑屏障紧密连接损伤的机制研究被引量：7: 1; 作者吕燕妮付龙生钱贻崧《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期814-819,共6页; 目的研究脑缺血小鼠循环系统中,循环微囊泡miR-27a对血脑屏障紧密连接损伤的作用机制。方法构建小鼠大脑中动脉栓塞模型,离心超滤法分离缺血2 h脑组织上清液中微囊泡,采用透射电镜观察微囊泡形态,并检测微囊泡直径。在脑缺血2 h模... 展开更多; 关键词循环微囊泡 miR-27a TLR4 MCAO 血脑屏障紧密连接; 在线阅读下载PDF 职称材料

脂多糖刺激小胶质细胞产生的微囊泡加重氧糖剥夺条件下大鼠脑血管内皮细胞紧密连接的损伤被引量：3: 2; 作者吕燕妮付龙生 +3 位作者李艳明温金华魏筱华钱贻崧《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期211-217,共7页; 目的研究在氧糖剥夺(OGD)条件下,向脑血管内皮细胞(RBEC)中加入提取自脂多糖(LPS)刺激的大鼠小胶质细胞上清液的循环微囊泡(MV),考察其对RBEC紧密连接功能的损伤及作用机制。方法分离提取1 mg/L LPS刺激24 h的小胶质细胞培养上清液中的M... 展开更多; 关键词微囊泡(MV) miR-27a 氧糖剥夺(OGD) 小胶质细胞脑血管内皮细胞紧密连接; 在线阅读下载PDF 职称材料

青年和老年小鼠脑缺血再灌注心肺损伤的机制被引量：4: 3; 作者吕燕妮付龙生 +4 位作者钱贻崧江明金何礼标欧阳爱军郑宇《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期800-806,共7页; 目的研究小鼠脑缺血再灌注心肺组织损伤情况及机制。方法按5~6月龄和20~21月龄,将C57BL/6J小鼠分为青年和老年组。实验组设立假手术组,模型组为缺血1 h再灌注1、12、24、48 h组。取各灌注时间点的小鼠心肺组织,HE和TUNEL染色观察形态学... 展开更多; 关键词脑卒中后并发症大脑中动脉栓塞模型心肺损伤老年小鼠炎症级联反应; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于生物信息学方法预测hsa-miR-181a在脑卒中发病中的分子调控网络被引量：6: 4; 作者吕燕妮钱贻崧付龙生《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1042-1047,共6页; 目的运用生物信息学方法预测固有免疫信号分子hsa-miR-181a与脑卒中相关的分子调控网络。方法运用UCSC基因组浏览器、人类miRNA疾病数据库、TF-miRNA调控数据库、miRNA靶基因预测验证数据库、Genecards数据库、长链非编码RNA(LncRNA)疾... 展开更多; 关键词生物信息学固有免疫 hsa-miR-181a 脑卒中调控网络; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名循环微囊泡miR-27a参与脑缺血小鼠血脑屏障紧密连接损伤的机制研究被引量：7: 1; 作者吕燕妮付龙生钱贻崧; 机构南昌大学第一附属医院药学部南昌大学转化医学研究院心血管疾病研究中心; 出处《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期814-819,共6页; 基金国家自然科学基金地区科学基金项目(No 81760094 31602111) +2 种基金江西省卫生计生委科技计划项目(No20175081); 文摘目的研究脑缺血小鼠循环系统中,循环微囊泡miR-27a对血脑屏障紧密连接损伤的作用机制。方法构建小鼠大脑中动脉栓塞模型,离心超滤法分离缺血2 h脑组织上清液中微囊泡,采用透射电镜观察微囊泡形态,并检测微囊泡直径。在脑缺血2 h模型基础上,股静脉注射5 mg·kg^(-1)微囊泡,TTC染色观察缺血脑组织梗死体积;HE染色检测紧密连接蛋白occludin和claudin-5变化;Western blot检测occludin、claudin-5、TLR4、NF-κB、p38蛋白表达水平;ELISA法测定IL-1β和TNF-α含量。结果从缺血小鼠脑组织中分离的微囊泡为圆形或近圆形的双层膜结构小囊泡,颗粒平均直径为160 nm,符合微囊泡的形态学特征。与缺血组比较,注射微囊泡miR-27a能够加重缺血小鼠脑组织损伤,进一步增加脑组织梗死体积,降低缺血脑组织中occludin和claudin-5蛋白表达,上调TLR4表达,激活NF-κB、p38蛋白的磷酸化,IL-1β和TNF-α释放增多;而给予阻断剂antagomiR-27a能够减轻小鼠脑组织损伤,抑制TLR4、NF-κB、p38蛋白的活化。结论微囊泡miR-27a可明显增加缺血小鼠脑组织损伤,加重缺血脑组织紧密连接损伤,其机制与上调缺血脑组织中TLR4、NF-κB、p38蛋白的磷酸化,释放IL-1β和TNF-α相关。; 关键词循环微囊泡 miR-27a TLR4 MCAO 血脑屏障紧密连接; Keywords circulating microvesicles miR -21a TLR4 MCAO blood brain barrier tight junction; 分类号 R-332 [医药卫生] R322.81 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脂多糖刺激小胶质细胞产生的微囊泡加重氧糖剥夺条件下大鼠脑血管内皮细胞紧密连接的损伤被引量：3: 2; 作者吕燕妮付龙生李艳明温金华魏筱华钱贻崧; 机构南昌大学第一附属医院药学部南昌大学转化医学研究院心血管疾病研究中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期211-217,共7页; 基金国家自然科学基金(81760094 31602111) +2 种基金江西省卫生厅普通计划(20175081); 文摘目的研究在氧糖剥夺(OGD)条件下,向脑血管内皮细胞(RBEC)中加入提取自脂多糖(LPS)刺激的大鼠小胶质细胞上清液的循环微囊泡(MV),考察其对RBEC紧密连接功能的损伤及作用机制。方法分离提取1 mg/L LPS刺激24 h的小胶质细胞培养上清液中的MV并进行鉴定,实时荧光定量PCR检测MV中微小RNA-27a(miR-27a)水平。RBEC分为正常对照组、正常对照组-MV组、OGD 6 h组、OGD-MV孵育组。免疫荧光细胞化学染色检测RBEC中紧密连接蛋白闭合蛋白(occludin)和密封蛋白5(claudin-5)的表达,Western blot法检测RBEC中occludin、claudin-5、Toll样受体4(TLR4)、核因子κBp65(NF-κBp65)和p38的蛋白磷酸化水平,ELISA测定RBEC中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果 MV形状为近似圆形双层膜结构,平均直径为150 nm,符合MV的形态学特征。与正常小胶质细胞相比,LPS刺激的小胶质细胞培养上清液的MV中miR-27a水平异常升高。与正常对照组相比,加入MV不会对正常细胞产生影响,当在OGD条件下,RBEC中紧密连接受到损害,occludin和claudin-5表达降低,而加入MV后,RBEC紧密连接破坏加重,occludin和claudin-5表达进一步降低,OGD组小胶质细胞occludin和claudin-5蛋白水平降低。与正常对照组相比,OGD组小胶质细胞TLR4及NF-κBp65、p38磷酸化水平增加,而OGD-MV孵育组中,TLR4和NF-κBp65、p38的磷酸化水平进一步升高,且IL-1β和TNF-α水平也明显增加。结论 LPS刺激小胶质细胞上清液MV中miR-27a水平升高,可致OGD条件下RBEC紧密连接损害进一步加重,可能与其上调TLR4表达及NF-κBp65、p38的磷酸化相关。; 关键词微囊泡(MV) miR-27a 氧糖剥夺(OGD) 小胶质细胞脑血管内皮细胞紧密连接; Keywords microvesicles miR-27a oxygen-glucose deprivation （OGD） microglia brain endothelial cells tight junction; 分类号 R392.1 [医药卫生—免疫学] R392-33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名青年和老年小鼠脑缺血再灌注心肺损伤的机制被引量：4: 3; 作者吕燕妮付龙生钱贻崧江明金何礼标欧阳爱军郑宇; 机构南昌大学第一附属医院药学部南昌大学转化医学研究院心血管疾病研究中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期800-806,共7页; 基金江西省卫生计生委科技计划项目(20175081); 文摘目的研究小鼠脑缺血再灌注心肺组织损伤情况及机制。方法按5~6月龄和20~21月龄,将C57BL/6J小鼠分为青年和老年组。实验组设立假手术组,模型组为缺血1 h再灌注1、12、24、48 h组。取各灌注时间点的小鼠心肺组织,HE和TUNEL染色观察形态学改变,化学比色法检测心脏Na^+-K^+-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶变化,称重法计算肺指数,Western blot法分别检测心肺组织中核因子κBp65(NF-κBp65)、磷酸化NF-κBp65(p-NF-κBp65)、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκBα(p-IκBα)水平,ELISA检测白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,比色法测定一氧化氮(NO)水平。结果青年和老年小鼠分别在再灌注24 h和再灌注1 h发生肺部炎症反应,而分别于再灌注24 h和再灌注12 h可见心脏出血,肺对再灌注刺激的反应比心脏组织更早。同时在对Na^+-K^+-ATP酶、Ca^(2+)-ATP酶、肺指数、NF-κB信号通路与炎症因子的测定发现,这些指标在青年和老年小鼠组上的变化与其病理组织变化时程一致。结论老年小鼠脑缺血再灌注后会引起心肺组织的损伤,能量代谢和炎症级联反应为其损伤的主要机制。; 关键词脑卒中后并发症大脑中动脉栓塞模型心肺损伤老年小鼠炎症级联反应; Keywords complications after stroke middle cerebral artery occlusion model heart and lung injury elderly mice inflammation cascade; 分类号 R541.5 [医药卫生—心血管疾病] R743.33 [医药卫生—神经病学与精神病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于生物信息学方法预测hsa-miR-181a在脑卒中发病中的分子调控网络被引量：6: 4; 作者吕燕妮钱贻崧付龙生; 机构南昌大学第一附属医院药学部南昌大学转化医学研究院心血管疾病研究中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1042-1047,共6页; 基金江西省卫计委中医课题(2014A042); 文摘目的运用生物信息学方法预测固有免疫信号分子hsa-miR-181a与脑卒中相关的分子调控网络。方法运用UCSC基因组浏览器、人类miRNA疾病数据库、TF-miRNA调控数据库、miRNA靶基因预测验证数据库、Genecards数据库、长链非编码RNA(LncRNA)疾病数据库、DLANALAB-Lnc Base数据库、转录因子结合谱数据库,研究hsa-miR-181a的上游转录因子,下游靶基因及与其相互作用的LncRNA间的多个调控途径,绘制hsa-miR-181a的核心调控网络图。采用脂多糖(LPS)刺激慢病毒感染的BV2小胶质细胞,采用实时定量PCR检测Toll样受体4(TLR4)、肿瘤蛋白63(p63)、miR-181a和核因子κB p65(NF-κB p65)的水平变化,对hsa-miR-181a调控网络进行验证。结果 UCSC数据库中显示hsa-miR-181a有2个亚型,在多个物种中具有高度保守性。通过疾病分析及文献调研发现hsa-miR-181a与多种疾病密切相关,尤其是缺血性疾病。信息学分析显示hsa-miR-181a受转录因子p63调控的同时,又调控着下游靶基因,脑源性神经营养因子(BDNF)、TLR4等58个基因。此外,Lnc RNA CDKN2B-AS1的转录和其锌指转录因子Snail、n-MYC也可能与hsa-miR-181a存在相互作用。所有基因构成一个以hsa-miR-181a为核心的调控网络,在脑卒中的发生与发展中起着重要作用。在LPS刺激的BV2细胞中,TLR4、p63、miR-181a水平升高,而RNA慢病毒技术干扰小胶质细胞中的p63的表达后,p63表达降低,miR-181a水平也降低,下游NF-κB p65水平被抑制,表明p63是TLR4调节miR-181a表达的关键信号分子。结论生物信息学方法预测并初步验证了hsa-miR-181a分子在脑卒中疾病中的调控网络,为深入研究提供了理论支持。; 关键词生物信息学固有免疫 hsa-miR-181a 脑卒中调控网络; Keywords bioinformatics innate immunity hsa-miR-181a stroke regulating network; 分类号 R811.4 [医药卫生—放射医学] R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	循环微囊泡miR-27a参与脑缺血小鼠血脑屏障紧密连接损伤的机制研究	吕燕妮付龙生钱贻崧	《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心	2018	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	脂多糖刺激小胶质细胞产生的微囊泡加重氧糖剥夺条件下大鼠脑血管内皮细胞紧密连接的损伤	吕燕妮付龙生李艳明温金华魏筱华钱贻崧	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2018	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	青年和老年小鼠脑缺血再灌注心肺损伤的机制	吕燕妮付龙生钱贻崧江明金何礼标欧阳爱军郑宇	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2017	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	基于生物信息学方法预测hsa-miR-181a在脑卒中发病中的分子调控网络	吕燕妮钱贻崧付龙生	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	6	在线阅读下载PDF 职称材料