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泛素特异性蛋白酶18在肝癌细胞中的表达及其对生物学活性的影响研究
被引量：
2
1
作者
颜伟
刘安文
+5 位作者
蔡婧
汪弋汀
曾小莉
陈雅洁
熊乐
国畅阔
《中国全科医学》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第33期4077-4083,共7页
目的检测泛素特异性蛋白酶18(USP18)在肝癌细胞中的表达及其对生物学活性(细胞增殖、细胞克隆、细胞周期、细胞凋亡)的影响。方法 2013年7月—2014年7月选取5种肝癌细胞株(Hep G2、Hep G2.2.15、Hep 3B、Huh-7、SMMC-7721),采用实时荧...
目的检测泛素特异性蛋白酶18(USP18)在肝癌细胞中的表达及其对生物学活性(细胞增殖、细胞克隆、细胞周期、细胞凋亡)的影响。方法 2013年7月—2014年7月选取5种肝癌细胞株(Hep G2、Hep G2.2.15、Hep 3B、Huh-7、SMMC-7721),采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blotting法分别检测USP18 mRNA和USP18表达水平,选择表达活性最强的细胞株进行小干扰RNA(siRNA)转染。利用LipofectamineTM2000法将USP18siRNA转染肝癌细胞,分为正常组、阴性对照组、siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组。采用RT-PCR和Western blotting法检测干扰效率,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线,平板克隆形成实验检测克隆形成率,流式细胞术检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 5种肝癌细胞株中USP18 mRNA和USP18表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中Hep 3B肝癌细胞株中USP18 mRNA和USP18表达水平高于其他4种肝癌细胞株(P<0.05),故选取Hep 3B肝癌细胞株进行后续实验。Hep 3B肝癌细胞株转染USP18 siRNA后48 h,转染效率达(91.00±5.67)%。5组干扰效率比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组干扰效率高于正常组和阴性对照组(P<0.05)。转染后1、2、3 d,siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组吸光度低于正常组和阴性对照组(P<0.05)。siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组克隆形成率低于正常组和阴性对照组,细胞凋亡率高于正常组和阴性对照组(P<0.05)。5组细胞周期分布比较,差异有统计学意义(P<0.05)。正常组与阴性对照组吸光度、克隆形成率、细胞周期分布、细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 USP18在Hep 3B肝癌细胞株中的表达较高,USP18基因敲减可以抑制肝癌细胞增殖、减少细胞克隆、阻滞细胞周期进程,增加细胞凋亡。
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关键词
肝肿瘤
泛素特异性蛋白酶
细胞增殖
细胞凋亡
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职称材料
PI3K抑制剂LY294002对胶质瘤U87细胞的放射增敏作用
被引量：
2
2
作者
彭玲珍
曾治民
+2 位作者
何静
廖琴
刘安文
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2011年第23期4191-4193,共3页
目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号转导通路抑制剂LY294002对人恶性胶质瘤细胞的放射增敏作用。方法:以人胶质瘤细胞株U87细胞为研究对象,MTT法观察LY294002对U87细胞的增殖抑制;克隆形成法分析细胞放射敏感性...
目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号转导通路抑制剂LY294002对人恶性胶质瘤细胞的放射增敏作用。方法:以人胶质瘤细胞株U87细胞为研究对象,MTT法观察LY294002对U87细胞的增殖抑制;克隆形成法分析细胞放射敏感性,计算放射增敏比(SER);流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分布变化。结果:LY294002对U87细胞的生长有抑制作用,且呈剂量依赖性;在较低浓度时(25μmol/L)可降低U87细胞照射后的克隆形成率,其SER为1.01;流式细胞仪分析显示:LY294002联合放射组的周期分布及凋亡率与LY294002组,单纯放射组比较均有差异(P<0.05),表现为G0/G1期细胞增加,S期细胞减少,凋亡率增加。结论:LY294002可增强U87细胞的放射敏感性,抑制PI3K/Akt信号转导通路可提高胶质瘤的放射治疗效果。
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关键词
胶质瘤
LY294002
PI3K/Akt
辐射耐受性
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职称材料
题名
泛素特异性蛋白酶18在肝癌细胞中的表达及其对生物学活性的影响研究
被引量：
2
1
作者
颜伟
刘安文
蔡婧
汪弋汀
曾小莉
陈雅洁
熊乐
国畅阔
机构
江西省
肿瘤
医院
内六科
南昌大学第二附属医院肿瘤内科
出处
《中国全科医学》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第33期4077-4083,共7页
基金
江西省自然科学基金资助项目(20132BAB215019)
文摘
目的检测泛素特异性蛋白酶18(USP18)在肝癌细胞中的表达及其对生物学活性(细胞增殖、细胞克隆、细胞周期、细胞凋亡)的影响。方法 2013年7月—2014年7月选取5种肝癌细胞株(Hep G2、Hep G2.2.15、Hep 3B、Huh-7、SMMC-7721),采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blotting法分别检测USP18 mRNA和USP18表达水平,选择表达活性最强的细胞株进行小干扰RNA(siRNA)转染。利用LipofectamineTM2000法将USP18siRNA转染肝癌细胞,分为正常组、阴性对照组、siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组。采用RT-PCR和Western blotting法检测干扰效率,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线,平板克隆形成实验检测克隆形成率,流式细胞术检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 5种肝癌细胞株中USP18 mRNA和USP18表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中Hep 3B肝癌细胞株中USP18 mRNA和USP18表达水平高于其他4种肝癌细胞株(P<0.05),故选取Hep 3B肝癌细胞株进行后续实验。Hep 3B肝癌细胞株转染USP18 siRNA后48 h,转染效率达(91.00±5.67)%。5组干扰效率比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组干扰效率高于正常组和阴性对照组(P<0.05)。转染后1、2、3 d,siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组吸光度低于正常组和阴性对照组(P<0.05)。siRNA1组、siRNA2组、siRNA3组克隆形成率低于正常组和阴性对照组,细胞凋亡率高于正常组和阴性对照组(P<0.05)。5组细胞周期分布比较,差异有统计学意义(P<0.05)。正常组与阴性对照组吸光度、克隆形成率、细胞周期分布、细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 USP18在Hep 3B肝癌细胞株中的表达较高,USP18基因敲减可以抑制肝癌细胞增殖、减少细胞克隆、阻滞细胞周期进程,增加细胞凋亡。
关键词
肝肿瘤
泛素特异性蛋白酶
细胞增殖
细胞凋亡
Keywords
Liver neoplasms
Ubiquitin specific peptidase
Cell proliferation
Apoptosis
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
PI3K抑制剂LY294002对胶质瘤U87细胞的放射增敏作用
被引量：
2
2
作者
彭玲珍
曾治民
何静
廖琴
刘安文
机构
南昌大学第二附属医院肿瘤内科
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2011年第23期4191-4193,共3页
文摘
目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号转导通路抑制剂LY294002对人恶性胶质瘤细胞的放射增敏作用。方法:以人胶质瘤细胞株U87细胞为研究对象,MTT法观察LY294002对U87细胞的增殖抑制;克隆形成法分析细胞放射敏感性,计算放射增敏比(SER);流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分布变化。结果:LY294002对U87细胞的生长有抑制作用,且呈剂量依赖性;在较低浓度时(25μmol/L)可降低U87细胞照射后的克隆形成率,其SER为1.01;流式细胞仪分析显示:LY294002联合放射组的周期分布及凋亡率与LY294002组,单纯放射组比较均有差异(P<0.05),表现为G0/G1期细胞增加,S期细胞减少,凋亡率增加。结论:LY294002可增强U87细胞的放射敏感性,抑制PI3K/Akt信号转导通路可提高胶质瘤的放射治疗效果。
关键词
胶质瘤
LY294002
PI3K/Akt
辐射耐受性
分类号
R739.4 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
泛素特异性蛋白酶18在肝癌细胞中的表达及其对生物学活性的影响研究
颜伟
刘安文
蔡婧
汪弋汀
曾小莉
陈雅洁
熊乐
国畅阔
《中国全科医学》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
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职称材料
2
PI3K抑制剂LY294002对胶质瘤U87细胞的放射增敏作用
彭玲珍
曾治民
何静
廖琴
刘安文
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2011
2
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职称材料
已选择
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引证文献
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