目的评价二甲双胍对心肌细胞缺氧复氧(H/R)损伤的作用,及Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体在其中的作用机制。方法选取原代心肌细胞随机分为对照组、H/R组、二甲双胍组、激动剂组(n=6)。对照组不作H/R处理,其他3组建立心肌细胞H/R模型。...目的评价二甲双胍对心肌细胞缺氧复氧(H/R)损伤的作用,及Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体在其中的作用机制。方法选取原代心肌细胞随机分为对照组、H/R组、二甲双胍组、激动剂组(n=6)。对照组不作H/R处理,其他3组建立心肌细胞H/R模型。二甲双胍组和激动剂组在细胞H/R模型构建后分别加入二甲双胍(终浓度为100μmol/L)、二甲双胍联合NLRP3激动剂培养。检测各组心肌细胞活性、细胞凋亡率及乳酸脱氢酶(LDH)水平,用Western blot测定腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸酶1(Caspase-1)、白细胞介素(IL)-1β和IL-18表达水平。结果与对照组比较,其他3组心肌细胞存活率明显降低,LDH水平、细胞凋亡率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与H/R组比较,二甲双胍组细胞存活率、心肌细胞内p-AMPK/AMPK表达明显升高,LDH水平、细胞凋亡率、NLRP3、Caspase-1和IL-1β表达明显降低(P<0.05)。激动剂组心肌细胞内NLRP3、Caspase-1和IL-1β表达明显高于二甲双胍组(3.5±1.1 vs 1.5±0.5,2.5±0.5 vs 1.5±0.2,2.5±0.5 vs 1.5±0.2,P<0.05)。结论AMPK激活剂能通过抑制心肌细胞内NLRP3炎性小体活化,减轻大鼠心肌细胞的H/R损伤。展开更多
文摘目的评价二甲双胍对心肌细胞缺氧复氧(H/R)损伤的作用,及Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体在其中的作用机制。方法选取原代心肌细胞随机分为对照组、H/R组、二甲双胍组、激动剂组(n=6)。对照组不作H/R处理,其他3组建立心肌细胞H/R模型。二甲双胍组和激动剂组在细胞H/R模型构建后分别加入二甲双胍(终浓度为100μmol/L)、二甲双胍联合NLRP3激动剂培养。检测各组心肌细胞活性、细胞凋亡率及乳酸脱氢酶(LDH)水平,用Western blot测定腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸酶1(Caspase-1)、白细胞介素(IL)-1β和IL-18表达水平。结果与对照组比较,其他3组心肌细胞存活率明显降低,LDH水平、细胞凋亡率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与H/R组比较,二甲双胍组细胞存活率、心肌细胞内p-AMPK/AMPK表达明显升高,LDH水平、细胞凋亡率、NLRP3、Caspase-1和IL-1β表达明显降低(P<0.05)。激动剂组心肌细胞内NLRP3、Caspase-1和IL-1β表达明显高于二甲双胍组(3.5±1.1 vs 1.5±0.5,2.5±0.5 vs 1.5±0.2,2.5±0.5 vs 1.5±0.2,P<0.05)。结论AMPK激活剂能通过抑制心肌细胞内NLRP3炎性小体活化,减轻大鼠心肌细胞的H/R损伤。
