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miR-1322在低氧诱导动脉平滑肌细胞增殖中的作用及其机制
被引量：
2
1
作者
周咏梅
王斌
+5 位作者
高瞻
张明周
李瑾
魏征华
游节根
贺斌峰
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第21期1948-1955,共8页
目的研究miR-1322对低氧诱导人肺动脉平滑肌细胞(human pulmonary artery smooth muscle cells,HPASMCs)增殖的调控作用并探讨其机制。方法 HPASMCs在1%O2低氧中分别暴露0、6、12、24、48 h,利用RT-qPCR检测各个时间点miR-1322的表达,We...
目的研究miR-1322对低氧诱导人肺动脉平滑肌细胞(human pulmonary artery smooth muscle cells,HPASMCs)增殖的调控作用并探讨其机制。方法 HPASMCs在1%O2低氧中分别暴露0、6、12、24、48 h,利用RT-qPCR检测各个时间点miR-1322的表达,Western blot检测骨形成蛋白受体2(bone morphogenetic protein receptor 2,BMPR2)、p-smad1/5/9、p21的蛋白表达,CCK-8检测细胞增殖。将miR-1322抑制物(inhibitor)和阴性对照(negative control,NC)转染HPASMCs细胞24 h后再行低氧处理48 h,采用CCK-8检测12、24、48 h时细胞的增殖水平。利用双荧光素酶报告基因检测分析miR-1322是否绑定BMPR2 3’非编码区(untranslated regions,UTR)。采用Western blot检测miR-1322对BMPR2蛋白的调控作用。转染BMPR2过表达质粒24 h后,再进行低氧处理48 h,采用CCK-8检测12、24、48 h时细胞的增殖水平,Western blot检测p-smad1/5/9和p21的蛋白表达。结果 HPASMCs低氧暴露12、24 h和48 h组miR-1322的表达均显著高于0 h组(P <0. 05)。miR-1322 inhibitor组miR-1322表达显著低于NC组(P <0. 05)。miR-1322 inhibitor/低氧组在24、48 h时细胞增殖水平显著低于相同时间点的低氧组(P <0. 05)。荧光素酶报告基因结果显示BMPR2是miR-1322的靶点。上调miR-1322的表达后,BMPR2蛋白表达较NC组有显著的下降(P <0. 05);相反地,抑制miR-1322后,BMPR2蛋白的表达显著高于NC组(P <0. 05)。低氧6、12 h和24 h时,BMPR2和p21的蛋白表达较0 h组显著降低(P <0. 05),而p-smad1/5/9的蛋白表达显著升高。低氧下BMPR2过表达组p-smad1/5/9和p21的蛋白表达较空载体显著升高(P <0. 05); CCK-8检测结果显示过表达BMPR2组的细胞增殖水平显著低于空载体组(P <0. 05)。结论低氧促进miR-1322在HPASMCs中的表达;上调miR-1322通过抑制BMPR2介导p-smad1/5/9-p21通路,促进细胞的增殖。
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关键词
miR-1322
低氧
人肺动脉平滑肌细胞
骨形成蛋白受体2
细胞增殖
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职称材料
Notch信号通路参与卵巢生殖干细胞的调控及卵巢的衰老进程
被引量：
11
2
作者
梁夏
潘泽政
+1 位作者
叶海峰
姚水洪
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期428-435,共8页
卵巢生殖干细胞(ovarian germline stem cells, OGSCs)的发现,打破了生殖医学领域传统的"固定卵泡池"理论。近年来,OGSCs新的研究成果不断涌现,但关于OGSCs体内调控机制的研究仍然较少。Notch通路广泛参与多种成体干细胞不对...
卵巢生殖干细胞(ovarian germline stem cells, OGSCs)的发现,打破了生殖医学领域传统的"固定卵泡池"理论。近年来,OGSCs新的研究成果不断涌现,但关于OGSCs体内调控机制的研究仍然较少。Notch通路广泛参与多种成体干细胞不对称分裂的过程,并与细胞衰老密切相关,但其是否参与OGSCs的体内调控机制及卵巢的衰老进程尚不清楚。本研究以原代培养技术提取OGSCs,通过荧光双标染色发现,OGSCs标志基因MVH、Oct4与Notch信号通路相关分子Notch1、Hes1在OGSCs中存在共表达;抑制Notch信号通路活性后,cck-8检测发现,OGSCs的增殖活性呈下降趋势;而以免疫组化、荧光双标、Western印迹法检测性成熟期(2月龄)、不孕和衰老(20月龄)小鼠卵巢皮层中MVH、Oct4、Notch1和Hes1的表达变化,发现2月龄小鼠卵巢皮层中MVH、Oct4、Notch1和Hes1的表达量较高(P<0.05),而不孕和衰老小鼠卵巢皮层中,MVH、Oct4、Notch1和Hes1的表达量均明显下降。上述结果表明,Notch信号通路在小鼠OGSCs中高表达,并可能参与调控OGSCs的增殖机制及卵巢的衰老进程。
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关键词
NOTCH信号通路
卵巢生殖干细胞
卵巢衰老
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职称材料
题名
miR-1322在低氧诱导动脉平滑肌细胞增殖中的作用及其机制
被引量：
2
1
作者
周咏梅
王斌
高瞻
张明周
李瑾
魏征华
游节根
贺斌峰
机构
南昌大学医学院实验教学部
检验中心
陆军军医
大学
(第三军医
大学
)第二附属医院全军呼吸内科研究所
江西省
医学
科
学院
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第21期1948-1955,共8页
基金
国家科技部重点研发课题(2016YFC1304503)
国家自然科学基金面上项目(81370168
81670047)~~
文摘
目的研究miR-1322对低氧诱导人肺动脉平滑肌细胞(human pulmonary artery smooth muscle cells,HPASMCs)增殖的调控作用并探讨其机制。方法 HPASMCs在1%O2低氧中分别暴露0、6、12、24、48 h,利用RT-qPCR检测各个时间点miR-1322的表达,Western blot检测骨形成蛋白受体2(bone morphogenetic protein receptor 2,BMPR2)、p-smad1/5/9、p21的蛋白表达,CCK-8检测细胞增殖。将miR-1322抑制物(inhibitor)和阴性对照(negative control,NC)转染HPASMCs细胞24 h后再行低氧处理48 h,采用CCK-8检测12、24、48 h时细胞的增殖水平。利用双荧光素酶报告基因检测分析miR-1322是否绑定BMPR2 3’非编码区(untranslated regions,UTR)。采用Western blot检测miR-1322对BMPR2蛋白的调控作用。转染BMPR2过表达质粒24 h后,再进行低氧处理48 h,采用CCK-8检测12、24、48 h时细胞的增殖水平,Western blot检测p-smad1/5/9和p21的蛋白表达。结果 HPASMCs低氧暴露12、24 h和48 h组miR-1322的表达均显著高于0 h组(P <0. 05)。miR-1322 inhibitor组miR-1322表达显著低于NC组(P <0. 05)。miR-1322 inhibitor/低氧组在24、48 h时细胞增殖水平显著低于相同时间点的低氧组(P <0. 05)。荧光素酶报告基因结果显示BMPR2是miR-1322的靶点。上调miR-1322的表达后,BMPR2蛋白表达较NC组有显著的下降(P <0. 05);相反地,抑制miR-1322后,BMPR2蛋白的表达显著高于NC组(P <0. 05)。低氧6、12 h和24 h时,BMPR2和p21的蛋白表达较0 h组显著降低(P <0. 05),而p-smad1/5/9的蛋白表达显著升高。低氧下BMPR2过表达组p-smad1/5/9和p21的蛋白表达较空载体显著升高(P <0. 05); CCK-8检测结果显示过表达BMPR2组的细胞增殖水平显著低于空载体组(P <0. 05)。结论低氧促进miR-1322在HPASMCs中的表达;上调miR-1322通过抑制BMPR2介导p-smad1/5/9-p21通路,促进细胞的增殖。
关键词
miR-1322
低氧
人肺动脉平滑肌细胞
骨形成蛋白受体2
细胞增殖
Keywords
miR-1322
anoxia
human pulmonary artery smooth muscle cells
bone morphogeneticprotein receptor 2
cell proliferation
分类号
R322.121 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R329.28 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
Notch信号通路参与卵巢生殖干细胞的调控及卵巢的衰老进程
被引量：
11
2
作者
梁夏
潘泽政
叶海峰
姚水洪
机构
衢州职业技术
学院
生殖健康研究所
南昌大学
江西
医学院
实验教学
部
创新
实验
室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第4期428-435,共8页
基金
国家自然科学基金(No.81660245)和浙江省衢州市科技计划项目(No.2016Y016)资助~~
文摘
卵巢生殖干细胞(ovarian germline stem cells, OGSCs)的发现,打破了生殖医学领域传统的"固定卵泡池"理论。近年来,OGSCs新的研究成果不断涌现,但关于OGSCs体内调控机制的研究仍然较少。Notch通路广泛参与多种成体干细胞不对称分裂的过程,并与细胞衰老密切相关,但其是否参与OGSCs的体内调控机制及卵巢的衰老进程尚不清楚。本研究以原代培养技术提取OGSCs,通过荧光双标染色发现,OGSCs标志基因MVH、Oct4与Notch信号通路相关分子Notch1、Hes1在OGSCs中存在共表达;抑制Notch信号通路活性后,cck-8检测发现,OGSCs的增殖活性呈下降趋势;而以免疫组化、荧光双标、Western印迹法检测性成熟期(2月龄)、不孕和衰老(20月龄)小鼠卵巢皮层中MVH、Oct4、Notch1和Hes1的表达变化,发现2月龄小鼠卵巢皮层中MVH、Oct4、Notch1和Hes1的表达量较高(P<0.05),而不孕和衰老小鼠卵巢皮层中,MVH、Oct4、Notch1和Hes1的表达量均明显下降。上述结果表明,Notch信号通路在小鼠OGSCs中高表达,并可能参与调控OGSCs的增殖机制及卵巢的衰老进程。
关键词
NOTCH信号通路
卵巢生殖干细胞
卵巢衰老
Keywords
Notch signaling pathway
ovarian germline stem cells(OGSCs)
ovarian aging
分类号
R34 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR-1322在低氧诱导动脉平滑肌细胞增殖中的作用及其机制
周咏梅
王斌
高瞻
张明周
李瑾
魏征华
游节根
贺斌峰
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
Notch信号通路参与卵巢生殖干细胞的调控及卵巢的衰老进程
梁夏
潘泽政
叶海峰
姚水洪
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
11
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