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瑞香素毒理学实验研究 被引量:6
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作者 邹文玮 舒奇 +1 位作者 傅颖媛 夏芝璐 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期908-911,共4页
目的初步探讨金边瑞香活性成分瑞香素安全性并对其评价。方法通过急性毒性试验、鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验(Ames试验)、骨髓细胞微核试验对瑞香素进行安全性评价。结果以超过人体有效剂量175倍剂量100 mg/(kg.体质量),一次... 目的初步探讨金边瑞香活性成分瑞香素安全性并对其评价。方法通过急性毒性试验、鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验(Ames试验)、骨髓细胞微核试验对瑞香素进行安全性评价。结果以超过人体有效剂量175倍剂量100 mg/(kg.体质量),一次性灌胃小鼠,连续观察14 d未见中毒体征,体质量增长正常。瑞香素Ames试验各剂量组回变菌落数均未超过阴性对照组菌落数2倍,亦无剂量反应关系。瑞香素Ames试验为阴性。瑞香素骨髓微核实验各剂量组微核率与阴性对照组比较无显著性差异(P>0.05),而环磷酰胺阳性对照组与阴性对照组及各样品剂量比较统计学有显著性差异(P<0.05)。表明瑞香素对小鼠骨髓细胞无抑制作用和遗传毒性,实验结果为阴性。结论瑞香素在本试验剂量范围内未见明显的毒性作用,无致突变作用,安全性较高。 展开更多
关键词 瑞香素 毒理学 实验研究
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粉尘螨过敏原脂肪酶的表达、纯化及生物信息学分析 被引量:2
2
作者 幸鹏 刘玉琳 +3 位作者 喻海琼 李盟 刘志刚 刘晓宇 《江西师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2015年第1期101-105,共5页
为克隆原核表达并纯化出粉尘螨过敏原脂肪酶蛋白,鉴定其免疫学活性,并分析其分子特征.通过重组合成粉尘螨新过敏原脂肪酶基因,与p ET-28a载体连接后转化大肠埃希菌E.coli Top10,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组新过敏原... 为克隆原核表达并纯化出粉尘螨过敏原脂肪酶蛋白,鉴定其免疫学活性,并分析其分子特征.通过重组合成粉尘螨新过敏原脂肪酶基因,与p ET-28a载体连接后转化大肠埃希菌E.coli Top10,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组新过敏原脂肪酶蛋白;经镍柱亲和层析纯化出粉尘螨重组脂肪酶蛋白,用Western Blot、ELISA方法检测其免疫原性.用生物信息学软件预测其理化性质、二级结构,并构建分子进化树.成功表达纯化出高纯度的粉尘螨重组脂肪酶蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示表达重组产物分子质量约为40 k Da,与理论值一致,纯化后的表达产物经Western blot印迹检测有明显条带显示.信息学分析显示蛋白二级结构由α螺旋(16.38%)、延伸主链(18.93%)、无规则卷曲(64.69%)组成.成功原核表达出粉尘螨过敏原脂肪酶蛋白,并纯化获得较高纯度及较强免疫学活性的重组脂肪酶蛋白,为尘螨过敏性疾病的特异性诊断和免疫治疗奠定理论基础. 展开更多
关键词 粉尘螨 过敏原 重组脂肪酶 生物信息学分析
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T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3与消化道肿瘤的研究进展 被引量:4
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作者 叶雯 王福财 +1 位作者 周南进 谢勇 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第4期435-439,共5页
T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(T cell immunoglobulin domain and mucin domain protein-3,Tim-3)是一种抑制性受体,在消化道肿瘤微环境中高表达。Tim-3促进T细胞衰竭、负调节NK细胞的抗肿瘤免疫以及诱导巨噬细胞向M2的极化,肿瘤细胞可... T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(T cell immunoglobulin domain and mucin domain protein-3,Tim-3)是一种抑制性受体,在消化道肿瘤微环境中高表达。Tim-3促进T细胞衰竭、负调节NK细胞的抗肿瘤免疫以及诱导巨噬细胞向M2的极化,肿瘤细胞可利用Tim-3基因逃避免疫监视,故Tim-3在消化道肿瘤的发展与转化过程中起着重要作用。文中从Tim-3基因多态性、T细胞、NK细胞、单核巨噬细胞等方面就Tim-3在消化道肿瘤的作用做一综述。 展开更多
关键词 T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3 消化道肿瘤 T细胞 NK细胞 单核巨噬细胞
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深圳市耐多药结核分枝杆菌流行株耐药基因序列分析 被引量:8
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作者 崔运勇 王峰 +3 位作者 刘小立 杨慧 桂静 胡思玉 《中国防痨杂志》 CAS 2011年第5期257-262,共6页
目的了解深圳市耐多药结核分枝杆菌(multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-TB)的分子流行病学特征。方法参照WHO/I UATLD标准,使用L-J药敏培养基,采用1%比例法药敏试验筛选出敏感株和异烟肼(isoniazid,INH)、利福平(rifa... 目的了解深圳市耐多药结核分枝杆菌(multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis,MDR-TB)的分子流行病学特征。方法参照WHO/I UATLD标准,使用L-J药敏培养基,采用1%比例法药敏试验筛选出敏感株和异烟肼(isoniazid,INH)、利福平(rifampicin,RFP)双耐药临床分离株,通过DNA测序检测深圳地区153株敏感株与132株MDR-TB的INH耐药基因katG、inhA、oxyR-ahpC基因间区域及RFP耐药基因rpoB碱基排列顺序,运用DNASTAR和blastn进行序列分析。结果 153株敏感株突变率为27.5%(42/153)。132株MDR-TB突变率为98.5%(130/132),其中katG基因突变率为73.5%(97/132),68.9%(91/132)为katG315位突变;inhA基因突变率为18.2%(24/132),11.4%(15/132)为启动子区域突变,未发现inhA94特异突变株;ahpC基因突变率为16.7%(22/132),10.6%(14/132)为启动子区域突变;rpoB基因81 bp核心区域突变率为93.2%(123/132)。结论 katG315、inhA启动子区域、ahpC启动子区域以及rpoB 81 bp核心区域突变为深圳地区耐多药结核分枝杆菌主要突变类型,与其他国家和地区差异无统计学意义;但深圳地区未见inhA94突变株。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 抗药性 多种 细菌 序列分析 DNA 突变 深圳市
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IL-18启动子区基因多态性与江西汉族人群哮喘的关系 被引量:6
5
作者 杨慧 刘宁 +1 位作者 陈小文 刘玉琳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期524-527,共4页
目的:探讨IL-18基因启动子区-607C/A、-137G/C多态性与江西汉族人群支气管哮喘(简称哮喘)及其临床表型的关系。方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)和DNA测序技术对102例哮喘患者(A组)[其中合并过敏性鼻炎40例(A1组),不合并... 目的:探讨IL-18基因启动子区-607C/A、-137G/C多态性与江西汉族人群支气管哮喘(简称哮喘)及其临床表型的关系。方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)和DNA测序技术对102例哮喘患者(A组)[其中合并过敏性鼻炎40例(A1组),不合并过敏性鼻炎62例(A2组)]及100例健康对照者(B组)IL-18基因启动子区1-607C/A、-137G/C基因型多态性进行检测。结果:-607C等位基因频率在A、A1、A2、B组中分别为50.0%、40.0%、56.5%、45.5%,A2和A1两组比较差异有显著性(P<0.05);-137C等位基因频率在A、A1、A2、B组中分别为17.2%、27.5%、10.5%、16.0%,A1和B两组比较差异有显著性(P<0.05),A1和A2比较差异有显著性(P<0.01)。-607C/-137G单倍体基因频率在A、A1、A2、B组中分别为45.1%、33.7%、52.4%、41.5%,A2和A1两组比较差异有显著性(P<0.01);-607A/-137C单倍体基因频率在A、A1、A2、B组中分别为12.3%、21.3%、6.5%、12.0%,A1和A2两组比较差异有显著性(P<0.01)。结论:IL-18-137C等位基因与江西汉族人群哮喘合并过敏性鼻炎有关,IL-18-607C/A、-137G/C基因多态性在哮喘合并过敏性鼻炎和哮喘不合并过敏性鼻炎患者中频率分布不同。提示IL-18可能在哮喘和过敏性鼻炎发病机制中所起的作用不同。 展开更多
关键词 白细胞介素18 基因多态性 哮喘 过敏性鼻炎
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深圳市秋季气传致敏花粉的调查 被引量:5
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作者 肖小军 刘玉琳 +4 位作者 谢雄杰 胡东生 刘晓宇 易海涛 刘志刚 《江西师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2011年第6期587-590,共4页
应用Burkard采样器对深圳市气传花粉浓度进行监测,并对花粉浓度进行统计分析.探讨深圳市秋季气传花粉的种类、数量及季节消长规律,为本地区防治花粉症提供有效资料.本次调查共曝片244张,1.5 m和30 m 2个高度采集点各122张.曝片共识别花... 应用Burkard采样器对深圳市气传花粉浓度进行监测,并对花粉浓度进行统计分析.探讨深圳市秋季气传花粉的种类、数量及季节消长规律,为本地区防治花粉症提供有效资料.本次调查共曝片244张,1.5 m和30 m 2个高度采集点各122张.曝片共识别花粉39种,12 850粒,其中1.5 m高度7881粒,占总数的61.3%;30 m高度4 969粒,占总数的38.7%,曝片所见以草本花粉为主,禾本科、菊科花粉最多.调查结果可以为本地区花粉症防治及绿化品种的选择提供可靠依据. 展开更多
关键词 气传花粉 深圳 飘散 调查
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瑞香素药理作用的研究进展 被引量:7
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作者 郑茂 邹玉 傅颖媛 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期790-794,共5页
瑞香素是金边瑞香、黄瑞香、长白瑞香等瑞香属植物的主要活性成分,是典型的香豆素衍生物。大量研究表明瑞香素具有多种药理活性,包括抗炎、抗氧化、抗病原微生物、抗肿瘤等,具有广泛的应用前景。本文就近5年来瑞香素药理作用的研究进展... 瑞香素是金边瑞香、黄瑞香、长白瑞香等瑞香属植物的主要活性成分,是典型的香豆素衍生物。大量研究表明瑞香素具有多种药理活性,包括抗炎、抗氧化、抗病原微生物、抗肿瘤等,具有广泛的应用前景。本文就近5年来瑞香素药理作用的研究进展作了总结。 展开更多
关键词 瑞香素 香豆素 药理作用
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抗鸡蛋清提取物单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:3
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作者 许静 傅颖媛 +1 位作者 刘志刚 李佳娜 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第10期372-374,共3页
目的:制备和鉴定小鼠抗鸡蛋清提取物单克隆抗体。方法:以纯化后的蛋清提取物为免疫原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通过间接ELISA法筛选可特异性分泌抗蛋清提取物McAb的杂交瘤细胞。采用Ig类与亚类鉴定试... 目的:制备和鉴定小鼠抗鸡蛋清提取物单克隆抗体。方法:以纯化后的蛋清提取物为免疫原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通过间接ELISA法筛选可特异性分泌抗蛋清提取物McAb的杂交瘤细胞。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定McAb的Ig类与亚类;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定McAb的特异性。结果:获得2株可稳定分泌抗蛋清提取物McAb的的杂交瘤细胞,分别命名为5E12和4F1,其分泌的McAb均为IgG1。Western Blotting分析表明,McAb 4F1所识别的靶分子的相对分子质量(Mr)约为44kD。间接ELISA法检测两株McAb5E12、4F1的冻融前后效价分别为1:3000、1:300。结论:成功制备了两株抗蛋清提取物McAb、5E12和4F1,为变应原的提取、纯化及鉴定提供了有效的实验基础。 展开更多
关键词 蛋清提取物 单克隆抗体 特性鉴定
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阿霉素联合致敏树突状细胞对荷宫颈癌小鼠的治疗作用 被引量:1
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作者 曾小平 王红梅 +3 位作者 黄永红 周晓燕 蔡震宇 徐方云 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期734-738,共5页
目的:探讨阿霉素(adriamycin,ADM)联合冻融抗原致敏的树突状细胞(dendritic cells,DCs)对荷宫颈癌小鼠的免疫治疗作用。方法:建立小鼠皮下移植瘤模型;应用反复冻融法处理小鼠宫颈癌U14细胞,并致敏小鼠骨髓来源的DCs,制备DCs疫苗;流式细... 目的:探讨阿霉素(adriamycin,ADM)联合冻融抗原致敏的树突状细胞(dendritic cells,DCs)对荷宫颈癌小鼠的免疫治疗作用。方法:建立小鼠皮下移植瘤模型;应用反复冻融法处理小鼠宫颈癌U14细胞,并致敏小鼠骨髓来源的DCs,制备DCs疫苗;流式细胞术鉴定DCs成熟表型;荷瘤小鼠分为对照组(PBS组)、DCs疫苗组、ADM组和ADM联合DCs疫苗组,进行3个周期的治疗。观察肿瘤大小,第21 d取血,ELISA法检测小鼠血清IL-2、IL-12和IFN-γ含量;处死动物,称肿瘤重量。结果:肿瘤冻融抗原致敏DCs后,可高表达白细胞分化抗原CD11c、CD80和CD86;经3个周期的治疗后,ADM联合DCs疫苗组平均瘤重及平均瘤体积均小于ADM组、DCs疫苗组和对照组(P<0.05),联合治疗组抑瘤率大于其它3组(P<0.05),且血清IL-2、IL-12和IFN-γ水平明显升高(P<0.05)。结论:ADM联合肿瘤抗原致敏的DCs疫苗可增强动物的抗肿瘤免疫应答,能有效抑制荷宫颈癌小鼠肿瘤的生长。 展开更多
关键词 树突状细胞 阿霉素 肿瘤免疫疗法 子宫颈癌
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粉尘螨铁蛋白的克隆、表达及蛋白特征分析
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作者 林建立 詹政科 +3 位作者 刘玉琳 范小琴 耿晓瑞 刘晓宇 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期927-930,937,共5页
目的为了获得粉尘螨铁蛋白(ferritin)蛋白,并对该蛋白特征进行分析。方法根据铁蛋白基因已知序列,设计出相应的引物,提取粉尘螨总RNA,采用RT-PCR方法扩增出铁蛋白基因,PCR产物克隆入pET32a载体,构建的重组质粒pET32a-ferritin,经酶切和... 目的为了获得粉尘螨铁蛋白(ferritin)蛋白,并对该蛋白特征进行分析。方法根据铁蛋白基因已知序列,设计出相应的引物,提取粉尘螨总RNA,采用RT-PCR方法扩增出铁蛋白基因,PCR产物克隆入pET32a载体,构建的重组质粒pET32a-ferritin,经酶切和测序鉴定后,再转化至大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定其表达效果,用Ni+离子亲和层析柱纯化其重组蛋白。用生物信息学方法对粉尘螨铁蛋白的特征进行分析。结果成功克隆粉尘螨铁蛋白基因并构建了pET32a-ferritin重组质粒;粉尘螨铁蛋白基因开放阅读框为543bp,编码179个氨基酸,PI 5.35;SDS-PAGE结果表明铁蛋白基因在大肠杆菌Bl21(DE3)中获得良好的表达,经亲和层析纯化后,表达产物分子质量约为20kD。经生物信息学分析,粉尘螨铁蛋白含有8个丝氨酸激酶、7个苏氨酸激酶、7个酪氨酸激酶、0组氨酸激酶磷酸化位点,亲水区域大于疏水区域,属不稳定蛋白。结论克隆、表达了尘螨铁蛋白,经纯化后获得较高纯度的重组蛋白,并对其三级结构进行分析,为进一步研究尘螨过敏原的结构成分及其理化性质奠定理论基础。 展开更多
关键词 粉尘螨 铁蛋白 蛋白表达 纯化 生物信息学分析
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软叶针葵花粉疫苗治疗小鼠过敏性鼻炎的效果和机制 被引量:7
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作者 蒋聪利 肖小军 +2 位作者 马莉 张昕昕 刘志刚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期113-116,共4页
目的建立小鼠过敏性鼻炎模型,用重组软叶针葵花粉profilin疫苗免疫预防治疗,观察过敏性鼻炎小鼠的病理变化,探讨该疫苗对过敏性鼻炎治疗效果及可能机制。方法用腹腔注射法建立BALB/c小鼠软叶针葵花粉过敏性鼻炎模型,皮下注射过敏原疫苗... 目的建立小鼠过敏性鼻炎模型,用重组软叶针葵花粉profilin疫苗免疫预防治疗,观察过敏性鼻炎小鼠的病理变化,探讨该疫苗对过敏性鼻炎治疗效果及可能机制。方法用腹腔注射法建立BALB/c小鼠软叶针葵花粉过敏性鼻炎模型,皮下注射过敏原疫苗进行预防治疗。通过小鼠无创肺功能仪检测小鼠治疗前后气道高反应性、间接ELISA检测血清中特异性抗体(IgE和IgG2a)、细胞因子,透射电镜观察鼻黏膜组织超微结构变化。结果疫苗特异性免疫治疗后,小鼠鼻部症状和气道高反应性减轻,其血清中特异性IgG2a水平升高、IgE水平降低,培养脾细胞上清中INF-γ、IL-10含量增加,IL-4生成减少。结论重组软叶针葵花粉profilin作为疫苗对花粉过敏性鼻炎有一定的疗效,可能与促使Th2向Th1转换,调节辅助性T细胞的平衡有关。 展开更多
关键词 软叶针葵花粉 过敏性鼻炎 疫苗 超微结构
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基于siRNA经皮给药系统用于皮肤疾病治疗的研究进展 被引量:5
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作者 任会红 张瑜娟 闵卫平 《医药导报》 CAS 北大核心 2021年第9期1232-1236,共5页
小干扰RNA(siRNA)以参与RNA干扰(RNAi)的方式调节基因表达,使靶信使RNA(mRNA)进行特异性降解,近来已被用于多种皮肤疾病的治疗。但由于siRNA具有强亲水性和电负性,易被核酸酶降解及难以突破皮肤角质层屏障作用等缺陷,使其应用受到极大限... 小干扰RNA(siRNA)以参与RNA干扰(RNAi)的方式调节基因表达,使靶信使RNA(mRNA)进行特异性降解,近来已被用于多种皮肤疾病的治疗。但由于siRNA具有强亲水性和电负性,易被核酸酶降解及难以突破皮肤角质层屏障作用等缺陷,使其应用受到极大限制,因此,亟需安全高效的传递系统将siRNA靶向导入细胞。该文对关于应用纳米载体携载siRNA制备经皮给药系统用于皮肤疾病治疗的文献进行综述,以期为皮肤疾病治疗提供更安全、有效、实用的给药方法。 展开更多
关键词 纳米载体 经皮给药系统 小干扰RNA 皮肤疾病
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