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南方科技大学冷冻电镜中心建设与管理
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作者 马晓旻 和思淼 +3 位作者 吴静 高远瞩 许淑嫚 王培毅 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2024年第9期213-218,240,共7页
近十年来,300 kV冷冻电镜已成为生物大分子结构解析、材料形貌及成分分析的有力工具。南方科技大学冷冻电镜中心是国内拥有该类设备最多的科研实验室,而且是国内首家集中化、自动化、可视化管理的冷冻电镜中心。它的建成填补了中国南方... 近十年来,300 kV冷冻电镜已成为生物大分子结构解析、材料形貌及成分分析的有力工具。南方科技大学冷冻电镜中心是国内拥有该类设备最多的科研实验室,而且是国内首家集中化、自动化、可视化管理的冷冻电镜中心。它的建成填补了中国南方地区无高端冷冻电镜的历史空白。结合学校冷冻电镜中心大型仪器设备的状况、开放共享管理系统及运行模式,从管理框架和开放共享等方面探讨了该中心的管理及运行机制,为粤港澳大湾区结构生物学领域发展提供了重要支撑。 展开更多
关键词 大型仪器设备平台 开放共享 冷冻电镜 分级管理
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病毒性心肌炎患者心肌细胞中脂褐素的体电镜研究
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作者 陈泽崧 加苏尔·阿力甫 +7 位作者 郭帅 朱梦云 李海玲 刘伟静 祝建 徐亚伟 车文良 刘铮 《电子显微学报》 北大核心 2025年第1期1-9,共9页
脂褐素又称为“年龄色素”,是一种不可被溶酶体水解酶降解的黑色或褐色脂溶性物质。既往研究发现在炎症等病理情况下会加剧脂褐素的形成,并在心脏早衰症以及心肌肥大的患者心肌细胞中观察到了脂褐素的堆积。本研究首次在长新冠诱发心血... 脂褐素又称为“年龄色素”,是一种不可被溶酶体水解酶降解的黑色或褐色脂溶性物质。既往研究发现在炎症等病理情况下会加剧脂褐素的形成,并在心脏早衰症以及心肌肥大的患者心肌细胞中观察到了脂褐素的堆积。本研究首次在长新冠诱发心血管疾病患者的心肌活检组织中观察到大量堆积的脂褐素,并通过透射电子显微镜与离子束扫描电子显微镜对脂褐素进行了二维平面和三维立体结构上的观察和重构,为研究线粒体与脂褐素形成之间的联系提供一定的参考。 展开更多
关键词 脂褐素 病毒性心肌炎 线粒体结构功能障碍 氧化应激 长新冠 体电镜
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高压冷冻及冷冻替代样品制备方法在体扫描电镜中的应用 被引量:5
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作者 顾嘉敏 许淑嫚 +3 位作者 郭帅 巩志伟 倪兵 刘铮 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期471-480,共10页
高压冷冻及冷冻替代技术是一种利用高压和低温对含水组织样品进行瞬间冷冻固定和低温脱水的电镜样品制备技术,它因可以保存更加真实的细胞超微结构而常应用于透射电镜观察和分析。本文利用模式动物小鼠为材料,将这种技术应用于体扫描电... 高压冷冻及冷冻替代技术是一种利用高压和低温对含水组织样品进行瞬间冷冻固定和低温脱水的电镜样品制备技术,它因可以保存更加真实的细胞超微结构而常应用于透射电镜观察和分析。本文利用模式动物小鼠为材料,将这种技术应用于体扫描电镜的样品制备,并与常规化学固定的样品制备进行比较。结果显示在小鼠心肌组织中,高压冷冻及冷冻替代技术可以有效避免常规制备样品中的细胞器膜结构皱缩、细胞质分布不均匀、细胞核膜收缩形成锯齿状、甚至局部断裂等现象,使细胞超微结构更接近其生活时的状态。 展开更多
关键词 高压冷冻-冷冻替代 心肌组织 超微结构 体扫描电镜成像 三维重构
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AI时代中的电子显微学研究:严峻挑战、无穷机遇与壮阔前景 被引量:2
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作者 刘铮 沈庆涛 隋森芳 《电子显微学报》 北大核心 2025年第1期124-135,共12页
近十年来结构生物学的发展突飞猛进,取得的标志性突破有两个,一是以冷冻电镜为代表的结构解析技术方向上的突破,二是以AlphaFold算法为代表的结构预测模型上的突破。2024年5月Google DeepMind更新了其生物结构预测工具,最新版本的AlphaF... 近十年来结构生物学的发展突飞猛进,取得的标志性突破有两个,一是以冷冻电镜为代表的结构解析技术方向上的突破,二是以AlphaFold算法为代表的结构预测模型上的突破。2024年5月Google DeepMind更新了其生物结构预测工具,最新版本的AlphaFold 3拥有可以预测几乎所有分子类型的蛋白质复合体结构的能力,在药物互作预测方面也实现了很高的准确性。AlphaFold 3的发布为结构生物学研究带来巨大的变革,展现了AI技术的巨大潜力,也点燃了大众对生命科学和医学研究的热情与想象。与此同时,电子显微学的研究并未停下脚步,新技术、新方法层出不穷,在解析全新蛋白结构、超大超复杂复合体结构、动态结构、原位结构,以及更大尺度的细胞、组织、器官样品的研究中,电子显微学依旧有着不可替代的优势。当前有观点认为结构预测模型甚至可以替代以X射线晶体学和电子显微学为代表的传统实验科学,通过计算便能完成生物结构解析,但是这种观点是片面的。事实上,未来的结构生物学研究,必将是一个整合实验科学与AI技术,从单个蛋白或复合体的结构全面拓展到多蛋白复杂体系、细胞内原位、以及超越微观尺度进入到介观和宏观尺度等方面的研究。 展开更多
关键词 电子显微学 高分辨结构 AlphaFold 结构模型预测
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Kir2.1钾通道的内向整流特性在低血钾诱发心肌细胞异常起搏活动中的作用
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作者 向晋贤 吕金花 +6 位作者 姜杨馨 曾锦 刘力 张滢莹 刘铮 王晓斌 左东川 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第6期1207-1211,共5页
目的:探讨Kir2.1钾通道的内向整流特性在低血钾诱发人心肌细胞异常起搏活动中的作用。方法:构建载有人Kir2.1、Kir2.1-E224G突变体以及Kir4.1钾通道基因序列的慢病毒载体。通过病毒转染的方法使人诱导多能干细胞分化来源心肌细胞(hiPSC-... 目的:探讨Kir2.1钾通道的内向整流特性在低血钾诱发人心肌细胞异常起搏活动中的作用。方法:构建载有人Kir2.1、Kir2.1-E224G突变体以及Kir4.1钾通道基因序列的慢病毒载体。通过病毒转染的方法使人诱导多能干细胞分化来源心肌细胞(hiPSC-CMs)过表达Kir2.1、Kir2.1-E224G突变体或Kir4.1钾通道。通过膜片钳监测细胞外低钾(1 mmol/L)对各组hiPSC-CMs静息膜电位以及全细胞电流的影响。结果:在1 mmol/L低钾条件下,电流钳结果显示,过表达Kir2.1钾通道的hiPSC-CMs呈现双静息膜电位(超极化和去极化并存),并且在静息膜电位去极化时发生异常自发起搏活动。而过表达Kir2.1-E224G突变体以及Kir4.1钾通道的hiPSC-CMs静息膜电位呈现超极化且不导致异常自发起搏活动的发生。电压钳结果显示,过表达Kir2.1钾通道的hiPSC-CMs呈现N型跨膜电流;而过表达Kir2.1-E224G突变体以及Kir4.1钾通道的hiPSC-CMs呈现典型的钾通道电流。结论:Kir2.1钾通道的内向整流特性在低血钾导致人心肌细胞异常自发起搏活动的过程中起关键作用。 展开更多
关键词 Kir2.1钾通道 低钾血症 心肌细胞 异常起搏活动
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