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肌间隙入路腰椎间盘退变模型的构建
被引量：
12
1
作者
崔运能
周荣平
+5 位作者
麦奇光
陆明
徐颂
王亮
李绍林
金大地
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期404-408,共5页
目的探讨背最长肌与腹外斜肌间隙入路纤维环穿刺法构建兔腰椎间盘退变模型的可行性。方法新西兰大白兔6只,从兔子背最长肌与腹外斜肌间隙入路暴露椎体和椎间盘,L2/3为对照组,不暴露也不穿刺椎间盘;L3/4为假手术组,剪断L4右侧横突后暴露...
目的探讨背最长肌与腹外斜肌间隙入路纤维环穿刺法构建兔腰椎间盘退变模型的可行性。方法新西兰大白兔6只,从兔子背最长肌与腹外斜肌间隙入路暴露椎体和椎间盘,L2/3为对照组,不暴露也不穿刺椎间盘;L3/4为假手术组,剪断L4右侧横突后暴露椎间盘,但不进行穿刺;L4/5、L5/6为穿刺组,剪断L5、L6右侧横突后暴露椎间盘并用18G针穿刺构建模型。分别在术前及术后4周对实验动物进行X线和磁共振(MRI)检查,4周后处死实验动物,取材后行组织学及免疫组织化学检查。结果术后4周,X线检查显示模型组L4/5、L5/6椎间盘高度明显降低、骨赘形成、终板硬化,MRI T2加权像亦见椎间盘高度下降,其椎间盘髓核信号明显减弱;大体观察见该组椎间盘髓核组织较少并组织松脆,呈淡黄色改变;组织学观察髓核脊索细胞数量减少,免疫组织化学观察到髓核Ⅱ型胶原表达比对照组和假手术组明显减少。结论本研究为椎间盘退变的研究提供了一种较为理想的、相对可靠的动物模型。
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关键词
椎间盘退变
穿刺模型
髓核
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职称材料
蛋白激酶D1在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用
被引量：
4
2
作者
牛晓璐
许万福
+4 位作者
李松玉
柯志勇
曾方银
罗深秋
邓凡
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期351-355,共5页
目的研究蛋白激酶D1(PKD1)在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用,为进一步探讨PKD1在烟曲霉感染引起的肺曲霉病中的作用及其机制奠定基础。方法首先将GFP、GFP-PKD1表达质粒分别转染人肺腺癌细胞A549和HEK293细胞中,分...
目的研究蛋白激酶D1(PKD1)在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用,为进一步探讨PKD1在烟曲霉感染引起的肺曲霉病中的作用及其机制奠定基础。方法首先将GFP、GFP-PKD1表达质粒分别转染人肺腺癌细胞A549和HEK293细胞中,分别将灭活的烟曲霉分生孢子(1×105CFU/ml)于不同时间处理上述两组细胞,Western blotting证实PKD1的过表达,并检测PKD1的磷酸化活性;其次在A549细胞中分别转染GFP-PKD1、siRNA-PKD1并以灭活的烟曲霉分生孢子处理细胞30 min,分别检测下游NF-κB通路相关信号分子的磷酸化活性;最后,将NF-κB-luc荧光素酶报告基因及内参照报告质粒海肾荧光素酶(pRL-SV40)共转染入表达GFP、GFP-PKD1的A549细胞中,两组细胞在有无烟曲霉分生孢子的作用下处理24 h,收集细胞裂解液,进行双色荧光素酶活性检测。结果 Western blotting证实PKD1的过表达时间依赖性地增强烟曲霉刺激的A549细胞和HEK293细胞中PKD1的磷酸化活性及NF-κB通路中IКB和p65(pS276)的磷酸化活性,反之,敲低PKD1的表达则抑制烟曲霉介导的NF-κB通路中IКB和p65(pS276)的磷酸化活性。过表达PKD1明显增加NF-κB-luc荧光素酶的转录激活活性。结论 PKD1可能在烟曲霉刺激的NF-κB通路的激活及转录活性中起重要作用。
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关键词
蛋白激酶D1
烟曲霉分生孢子
NF-ΚB
转录激活
磷酸化
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职称材料
题名
肌间隙入路腰椎间盘退变模型的构建
被引量：
12
1
作者
崔运能
周荣平
麦奇光
陆明
徐颂
王亮
李绍林
金大地
机构
南方医科大学
第三附属医院影像中心
南方医科大学
第三附属医院
骨科
中心
南方医科大学骨科研究所
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期404-408,共5页
基金
广东省自然科学基金(8151051501000024)
文摘
目的探讨背最长肌与腹外斜肌间隙入路纤维环穿刺法构建兔腰椎间盘退变模型的可行性。方法新西兰大白兔6只,从兔子背最长肌与腹外斜肌间隙入路暴露椎体和椎间盘,L2/3为对照组,不暴露也不穿刺椎间盘;L3/4为假手术组,剪断L4右侧横突后暴露椎间盘,但不进行穿刺;L4/5、L5/6为穿刺组,剪断L5、L6右侧横突后暴露椎间盘并用18G针穿刺构建模型。分别在术前及术后4周对实验动物进行X线和磁共振(MRI)检查,4周后处死实验动物,取材后行组织学及免疫组织化学检查。结果术后4周,X线检查显示模型组L4/5、L5/6椎间盘高度明显降低、骨赘形成、终板硬化,MRI T2加权像亦见椎间盘高度下降,其椎间盘髓核信号明显减弱;大体观察见该组椎间盘髓核组织较少并组织松脆,呈淡黄色改变;组织学观察髓核脊索细胞数量减少,免疫组织化学观察到髓核Ⅱ型胶原表达比对照组和假手术组明显减少。结论本研究为椎间盘退变的研究提供了一种较为理想的、相对可靠的动物模型。
关键词
椎间盘退变
穿刺模型
髓核
Keywords
intervertebral disc degeneration
puncture model
nucleus pulposus
分类号
R681.53 [医药卫生—骨科学]
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职称材料
题名
蛋白激酶D1在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用
被引量：
4
2
作者
牛晓璐
许万福
李松玉
柯志勇
曾方银
罗深秋
邓凡
机构
南方医科大学
基础医学院细胞生物学教研室
南方医科大学骨科研究所
南方医科大学
南方
医院检验科
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期351-355,共5页
基金
国家自然科学基金(30973014
81272852)
+1 种基金
广东省自然科学基金(10151051501000040)
广东省自然科学基金博士启动基金(9451051501003704)~~
文摘
目的研究蛋白激酶D1(PKD1)在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用,为进一步探讨PKD1在烟曲霉感染引起的肺曲霉病中的作用及其机制奠定基础。方法首先将GFP、GFP-PKD1表达质粒分别转染人肺腺癌细胞A549和HEK293细胞中,分别将灭活的烟曲霉分生孢子(1×105CFU/ml)于不同时间处理上述两组细胞,Western blotting证实PKD1的过表达,并检测PKD1的磷酸化活性;其次在A549细胞中分别转染GFP-PKD1、siRNA-PKD1并以灭活的烟曲霉分生孢子处理细胞30 min,分别检测下游NF-κB通路相关信号分子的磷酸化活性;最后,将NF-κB-luc荧光素酶报告基因及内参照报告质粒海肾荧光素酶(pRL-SV40)共转染入表达GFP、GFP-PKD1的A549细胞中,两组细胞在有无烟曲霉分生孢子的作用下处理24 h,收集细胞裂解液,进行双色荧光素酶活性检测。结果 Western blotting证实PKD1的过表达时间依赖性地增强烟曲霉刺激的A549细胞和HEK293细胞中PKD1的磷酸化活性及NF-κB通路中IКB和p65(pS276)的磷酸化活性,反之,敲低PKD1的表达则抑制烟曲霉介导的NF-κB通路中IКB和p65(pS276)的磷酸化活性。过表达PKD1明显增加NF-κB-luc荧光素酶的转录激活活性。结论 PKD1可能在烟曲霉刺激的NF-κB通路的激活及转录活性中起重要作用。
关键词
蛋白激酶D1
烟曲霉分生孢子
NF-ΚB
转录激活
磷酸化
Keywords
protein kinase D1
Aspergillusfumigatus conidia
nuclear factor-κB
transcriptional activity
phosphorylation
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肌间隙入路腰椎间盘退变模型的构建
崔运能
周荣平
麦奇光
陆明
徐颂
王亮
李绍林
金大地
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
12
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
蛋白激酶D1在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用
牛晓璐
许万福
李松玉
柯志勇
曾方银
罗深秋
邓凡
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
4
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