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pDsRed1-C3/XAPC7真核表达载体的构建及细胞定位
被引量:
2
1
作者
谭家余
罗雅玲
+1 位作者
黄湘
邹浩元
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期507-510,共4页
目的:构建pDsRed1-C3/XAPC7真核表达载体并观察其在786-O、293T和Chang liver细胞株中的定位情况。方法:采用RT-PCR法从HBE135-E6E7细胞株中克隆得到XAPC7cDNA全长序列,将之与pMD18T载体连接、测序后将该片段亚克隆到真核表达载体pDsRed...
目的:构建pDsRed1-C3/XAPC7真核表达载体并观察其在786-O、293T和Chang liver细胞株中的定位情况。方法:采用RT-PCR法从HBE135-E6E7细胞株中克隆得到XAPC7cDNA全长序列,将之与pMD18T载体连接、测序后将该片段亚克隆到真核表达载体pDsRed1-C3中。构建好的pD-sRed1-C3/XAPC7真核表达质粒经酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将该重组质粒转染786-O、293T和Chang liver细胞株中,观察其在真核细胞中的表达。结果:pDsRed1-C3/XAPC7重组子经酶切鉴定及DNA测序证实,目的基因XAPC7的序列完全正确,真核表达载体构建成功,转染该重组子的细胞株均可见红色荧光蛋白的表达,呈颗粒状分布。XAPC7主要定位于786-O细胞的胞质,胞核罕见,在293T细胞中,胞质和胞核均有分布,且两者间无明显差别,在Changliver细胞中,胞质和胞核亦均有分布,但以胞质为主。结论:成功构建pDsRed1-C3/XAPC7融合基因并进行真核表达,发现XAPC7在不同细胞中的细胞定位具有差异,为下一步研究XAPC7的肿瘤相关功能奠定基础。
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关键词
XAPC7
真核表达载体
构建
细胞株
细胞定位
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题名
pDsRed1-C3/XAPC7真核表达载体的构建及细胞定位
被引量:
2
1
作者
谭家余
罗雅玲
黄湘
邹浩元
机构
南方医科大学附属中山市博爱医院重症医学科
南方医科大学
附属
南方
医院
呼吸内科
嘉应学院
医学
院
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期507-510,共4页
基金
广东省科技计划资助项目(2008B030301032)
文摘
目的:构建pDsRed1-C3/XAPC7真核表达载体并观察其在786-O、293T和Chang liver细胞株中的定位情况。方法:采用RT-PCR法从HBE135-E6E7细胞株中克隆得到XAPC7cDNA全长序列,将之与pMD18T载体连接、测序后将该片段亚克隆到真核表达载体pDsRed1-C3中。构建好的pD-sRed1-C3/XAPC7真核表达质粒经酶切和测序鉴定后,采用脂质体法将该重组质粒转染786-O、293T和Chang liver细胞株中,观察其在真核细胞中的表达。结果:pDsRed1-C3/XAPC7重组子经酶切鉴定及DNA测序证实,目的基因XAPC7的序列完全正确,真核表达载体构建成功,转染该重组子的细胞株均可见红色荧光蛋白的表达,呈颗粒状分布。XAPC7主要定位于786-O细胞的胞质,胞核罕见,在293T细胞中,胞质和胞核均有分布,且两者间无明显差别,在Changliver细胞中,胞质和胞核亦均有分布,但以胞质为主。结论:成功构建pDsRed1-C3/XAPC7融合基因并进行真核表达,发现XAPC7在不同细胞中的细胞定位具有差异,为下一步研究XAPC7的肿瘤相关功能奠定基础。
关键词
XAPC7
真核表达载体
构建
细胞株
细胞定位
Keywords
XAPC7
eukaryotic expression plasmid
construction
cell line
cellular localization
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
pDsRed1-C3/XAPC7真核表达载体的构建及细胞定位
谭家余
罗雅玲
黄湘
邹浩元
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
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