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细胞间黏附分子-1在ARDS小鼠肺微血管内皮细胞内的表达变化 被引量:9
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作者 耿申 吴婷 +4 位作者 穆先敏 张晨 刘晨阳 尤强 苏欣 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第4期342-347,共6页
目的细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)在介导中性粒细胞肺部浸润的过程中起到很大作用。在脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导的急性呼吸窘迫综合征小鼠模型中,观察ICAM-1以及丝裂原激活蛋白激酶2(mi... 目的细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)在介导中性粒细胞肺部浸润的过程中起到很大作用。在脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导的急性呼吸窘迫综合征小鼠模型中,观察ICAM-1以及丝裂原激活蛋白激酶2(mitogen-activated protein kinase activated protein kinase 2,MK2)和人抗原R(human antigen R,HuR)在小鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cell,PMVEC)内表达的变化。方法健康清洁型6~8周雄性C57BL/6小鼠,随机数字表法分为对照组和LPS组,每组5只。LPS组腹腔注射LPS 5 mg/kg(溶于100μL的PBS中),对照组腹腔注射PBS(5mg/kg),24 h处死全部小鼠。在LPS诱导的小鼠ARDS模型中,用Real-time PCR方法检测小鼠肺组织分离得到的PMVEC内人抗原R(human antigen R,HuR)、ICAM-1的mRNA表达量,用Western blot法检测总MK2、磷酸化MK2、HuR以及ICAM-1表达量的变化,利用流式细胞仪检测PMVEC表面ICAM-1的表达量及肺部浸润的中性粒细胞数量。结果 LPS组小鼠肺组织W/D较对照组高,差异有统计学意义[(6.16±0.40)vs(3.61±0.28),P〈0.05]。流式细胞术检测LPS组中性粒细胞浸润率较对照组高[(13.92±3.23)%vs(3.24±1.24)%,P〈0.05]。LPS刺激后小鼠肺组织中ICAM-1的mRNA及蛋白表达较对照组明显增加(P〈0.05),PMVEC表面ICAM-1表达较对照组也明显增加(P〈0.05)。MK2总量无明显变化,磷酸化MK2较对照组明显增加,HuR mRNA及蛋白总量无明显变化,但存在核质转移。结论特异性阻断或减少微血管内皮细胞中HuR的表达可使ICAM-1表达减少,从而减少中性粒细胞的浸润,减轻ARDS病理生理改变,可为临床治疗ARDS提供一个新靶点。 展开更多
关键词 小鼠肺微血管内皮细胞 急性呼吸窘迫综合征 丝裂原激活蛋白激酶2 人抗原R 细胞间黏附分子-1
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ATP柠檬酸裂解酶表达下调对前列腺癌细胞生长及凋亡影响的研究 被引量:4
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作者 孔海瑞 耿申 +1 位作者 杨杰 曾方银 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第1期26-30,共5页
目的肿瘤细胞可通过改变代谢模式来支持自身的恶性增殖,前列腺细胞更多地依赖于脂质代谢,而ATP柠檬酸裂解酶(ACLY)在脂质代谢中占有非常重要的位置。文中探讨ACLY表达下调对激素非依赖型人前列腺癌DU145细胞增殖能力及周期分布、凋亡的... 目的肿瘤细胞可通过改变代谢模式来支持自身的恶性增殖,前列腺细胞更多地依赖于脂质代谢,而ATP柠檬酸裂解酶(ACLY)在脂质代谢中占有非常重要的位置。文中探讨ACLY表达下调对激素非依赖型人前列腺癌DU145细胞增殖能力及周期分布、凋亡的影响。方法将DU145细胞分为实验组和对照组,实验组使用小干扰RNA片段选择性敲低ACLY的表达,对照组加入无意义小干扰RNA片段,采用细胞增殖与活性检测技术CCK-8观察ACLY分子表达下调对DU145细胞增殖能力的影响,流式细胞仪分析不同处理组间细胞周期分布及凋亡细胞比例之间的的差异,Western blot法检测胞内Caspase-3蛋白含量的变化。结果 Western blot结果显示ACLY干扰效果良好,与对照组相比,实验组细胞内ACLY蛋白含量下降明显(P<0.05)。与对照组相比,实验组细胞内乙酰辅酶A含量、早期凋亡及晚期凋亡细胞所占的比例明显升高[(0.42±1.99)vs(0.79±2.38),(37.10±3.28)vs(6.20±2.88),P<0.05]。在DU145细胞内选择性敲低ACLY的表达含量,实验组较对照组细胞增殖能力减弱,并且随着时间的推移表现更加明显。在48 h及72 h这两个时间点,2组细胞同一时间点吸光度差异均具有统计学意义(P<0.05)。在DU145细胞内干扰ACLY的表达,实验组与对照组相比,G1期细胞所占比例增高,但差异无统计学意义(P>0.05)。G2期细胞占比降低,S期比例增高,细胞周期阻滞在G0/G1期,两组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。同时实验组细胞内凋亡蛋白Caspase-3的表达明显上调。结论 ACLY对维持前列腺癌细胞恶性增殖具有重要的意义,其表达下调能抑制DU145细胞的分裂增殖并促进细胞的凋亡。 展开更多
关键词 前列腺癌 ATP柠檬酸裂解酶 凋亡 增殖 细胞周期
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