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新型登革病毒RNA聚合酶小分子抑制剂Z1降低登革病毒复制和感染的研究
被引量：
3
1
作者
郭颂欣
何士俊
+2 位作者
黄翠红
姚新刚
刘叔文
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期790-796,共7页
目的 筛选新型的登革病毒RNA聚合酶抑制剂。方法 大肠杆菌原核表达DENV2 RNA聚合酶蛋白NS5RdRp。SPR高通量筛选小分子化合物库,寻找与NS5 RdRp蛋白结合的小分子化合物;CPE、LDH和空斑实验在细胞水平上验证化合物的抗病毒效果;实时荧...
目的 筛选新型的登革病毒RNA聚合酶抑制剂。方法 大肠杆菌原核表达DENV2 RNA聚合酶蛋白NS5RdRp。SPR高通量筛选小分子化合物库,寻找与NS5 RdRp蛋白结合的小分子化合物;CPE、LDH和空斑实验在细胞水平上验证化合物的抗病毒效果;实时荧光定量PCR法检测化合物对病毒RNA合成的影响;免疫荧光法检测病毒复制中间体dsRNA以及病毒蛋白合成;蛋白免疫印迹法检测化合物对病毒蛋白合成量的影响;时间点处理实验判断抗病毒作用阶段。结果 2,5-二氢-1,2-二苯基-4-环己氨基-5-氧代-1H-吡咯-3-甲酸乙酯(Z1)与NS5 RdRp具有结合活性,在细胞水平上具有抗DENV2活性,半数有效浓度(EC50)为4.75μmol·L-1。Z1抑制DENV2 RNA合成,抑制病毒dsRNA的合成,并抑制病毒蛋白的合成,其抑制作用发生在病毒进入后阶段。结论 Z1是新型的登革病毒NS5 RdRp抑制剂,其明显抑制登革病毒RNA的合成,并进一步抑制病毒蛋白的翻译合成,从而抑制子代病毒的复制和释放,其可作为新型的抗登革病毒先导化合物用于进一步的开发。
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关键词
NS5
RdRp抑制剂
登革病毒RNA聚合酶
2型登革病毒
抗病毒药物
SPR
病毒复制
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职称材料
非包被ELISA可检测寨卡病毒包膜蛋白
被引量：
1
2
作者
柳红妙
周炜烽
+3 位作者
廖晖
胡正阳
邹敏
刘叔文
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期699-704,共6页
目的建立一种基于寨卡病毒包膜蛋白的非包被ELISA方法,检测被感染的细胞内E蛋白的表达情况,用于抗寨卡病毒药物筛选。方法将寨卡病毒感染的贴壁细胞固定在孔板上,加入抗体与之结合,并确定抗体浓度,建立E蛋白的非包被ELISA方法;用该方法...
目的建立一种基于寨卡病毒包膜蛋白的非包被ELISA方法,检测被感染的细胞内E蛋白的表达情况,用于抗寨卡病毒药物筛选。方法将寨卡病毒感染的贴壁细胞固定在孔板上,加入抗体与之结合,并确定抗体浓度,建立E蛋白的非包被ELISA方法;用该方法检测木脂素类化合物C1的抗病毒活性;用实时荧光定量PCR实验(RT-PCR)验证这种非包被ELISA方法的准确性;并排除该方法对登革病毒的交叉反应。结果经过优化,未感染的细胞的背景A450nm降低到0.20左右,采用该方法检测的抗病毒活性结果,与实时荧光定量PCR实验的结果基本一致,且该方法对登革病毒不存在交叉反应。结论建立了一种寨卡病毒E蛋白的非包被ELISA方法,可用于抗寨卡病毒药物筛选。
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关键词
寨卡病毒
酶联免疫吸附实验
包膜蛋白
交叉反应
抗病毒药物
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职称材料
题名
新型登革病毒RNA聚合酶小分子抑制剂Z1降低登革病毒复制和感染的研究
被引量：
3
1
作者
郭颂欣
何士俊
黄翠红
姚新刚
刘叔文
机构
南方医科大学药学院广东省新药筛选重点实验室广州市新发病毒防治药物研究重点实验室
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期790-796,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No 81603118)
广东省医学科学技术研究基金(No A2016119)
+1 种基金
南方医科大学科研助手项目(No C1032242)
国家自然科学基金-广东联合基金重点项目(K1060014)
文摘
目的 筛选新型的登革病毒RNA聚合酶抑制剂。方法 大肠杆菌原核表达DENV2 RNA聚合酶蛋白NS5RdRp。SPR高通量筛选小分子化合物库,寻找与NS5 RdRp蛋白结合的小分子化合物;CPE、LDH和空斑实验在细胞水平上验证化合物的抗病毒效果;实时荧光定量PCR法检测化合物对病毒RNA合成的影响;免疫荧光法检测病毒复制中间体dsRNA以及病毒蛋白合成;蛋白免疫印迹法检测化合物对病毒蛋白合成量的影响;时间点处理实验判断抗病毒作用阶段。结果 2,5-二氢-1,2-二苯基-4-环己氨基-5-氧代-1H-吡咯-3-甲酸乙酯(Z1)与NS5 RdRp具有结合活性,在细胞水平上具有抗DENV2活性,半数有效浓度(EC50)为4.75μmol·L-1。Z1抑制DENV2 RNA合成,抑制病毒dsRNA的合成,并抑制病毒蛋白的合成,其抑制作用发生在病毒进入后阶段。结论 Z1是新型的登革病毒NS5 RdRp抑制剂,其明显抑制登革病毒RNA的合成,并进一步抑制病毒蛋白的翻译合成,从而抑制子代病毒的复制和释放,其可作为新型的抗登革病毒先导化合物用于进一步的开发。
关键词
NS5
RdRp抑制剂
登革病毒RNA聚合酶
2型登革病毒
抗病毒药物
SPR
病毒复制
Keywords
NS5 RdRp inhibitors
DENV RNA poly-merase
DENV2 infection
antiviral drugs
SPR
virus replication
分类号
R373.33 [医药卫生—病原生物学]
R394.2 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
非包被ELISA可检测寨卡病毒包膜蛋白
被引量：
1
2
作者
柳红妙
周炜烽
廖晖
胡正阳
邹敏
刘叔文
机构
南方医科大学药学院广东省新药筛选重点实验室广州市新发病毒防治药物研究重点实验室
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第6期699-704,共6页
基金
国家自然科学基金(81773787)
广东省卫生厅医学科研基金(B2013233)~~
文摘
目的建立一种基于寨卡病毒包膜蛋白的非包被ELISA方法,检测被感染的细胞内E蛋白的表达情况,用于抗寨卡病毒药物筛选。方法将寨卡病毒感染的贴壁细胞固定在孔板上,加入抗体与之结合,并确定抗体浓度,建立E蛋白的非包被ELISA方法;用该方法检测木脂素类化合物C1的抗病毒活性;用实时荧光定量PCR实验(RT-PCR)验证这种非包被ELISA方法的准确性;并排除该方法对登革病毒的交叉反应。结果经过优化,未感染的细胞的背景A450nm降低到0.20左右,采用该方法检测的抗病毒活性结果,与实时荧光定量PCR实验的结果基本一致,且该方法对登革病毒不存在交叉反应。结论建立了一种寨卡病毒E蛋白的非包被ELISA方法,可用于抗寨卡病毒药物筛选。
关键词
寨卡病毒
酶联免疫吸附实验
包膜蛋白
交叉反应
抗病毒药物
Keywords
zika virus
enzyme-linked immunosorbent assay
envelope protein
cross reaction
antivirals
分类号
R91 [医药卫生—药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
新型登革病毒RNA聚合酶小分子抑制剂Z1降低登革病毒复制和感染的研究
郭颂欣
何士俊
黄翠红
姚新刚
刘叔文
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
非包被ELISA可检测寨卡病毒包膜蛋白
柳红妙
周炜烽
廖晖
胡正阳
邹敏
刘叔文
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
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职称材料
已选择
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