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沉默CIT基因可抑制前列腺癌细胞的增殖和转移（英文）
被引量：
2
1
作者
陈海平
向玘
+1 位作者
刘大伟
魏强
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期257-263,共7页
目的探究Citron Rho-interacting serine/threonine kinase(CIT)基因在前列腺癌中的表达特点,并探讨CIT基因对PC-3细胞增殖、迁移和侵袭能力的调控作用及其可能的分子机制。方法利用TCGA和MSKCC数据库分析CIT在前列腺癌组织的表达水平...
目的探究Citron Rho-interacting serine/threonine kinase(CIT)基因在前列腺癌中的表达特点,并探讨CIT基因对PC-3细胞增殖、迁移和侵袭能力的调控作用及其可能的分子机制。方法利用TCGA和MSKCC数据库分析CIT在前列腺癌组织的表达水平和临床相关性。采用siRNA干扰CIT的表达,采用CCK-8、划痕实验和Transwell实验检测CIT对前列腺癌PC-3细胞系的增殖、迁移和侵袭特性的影响。采用Western blotting检测CIT对上皮-间质转化和Hippo-YAP通路的调控作用。结果 TCGA数据库分析表明,CIT在前列腺癌组织中表达显著上调(P<0.05);MSKCC数据库分析表明,CIT表达水平与N分期(P<0.05)、M分期(P<0.001)、Gleason评分(P=0.010)和PSA水平(P=0.004)成正相关关系。PC-3细胞中沉默CIT表达可显著抑制细胞的增殖、迁移和侵袭,逆转上皮-间质转化进程,并抑制Hippo-YAP通路的激活。结论 CIT基因可能是前列腺癌的致病基因,其分子机制可能与Hippo-YAP通路的激活有关。
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关键词
丝/苏氨酸激酶
前列腺癌
转移
上皮-间质转化
Hippo-YAP通路
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职称材料
TDP-43对氧糖剥夺诱导的小鼠HL-1心房肌细胞凋亡的影响及其机制
2
作者
岳娇
龚美婷
+4 位作者
徐伍
王鹏
袁木
谭言飞
裴海峰
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期1305-1313,共9页
目的探讨TARDNA结合蛋白43(TDP-43)对氧糖剥夺(OGD)诱导小鼠HL-1心房肌细胞凋亡的影响及其机制。方法将体外培养的小鼠HL-1心房肌细胞分为:(1)对照组及不同OGD处理时间(2、4、8、16h)组,采用CCK-8法检测细胞活力,Westernblotting检测TDP...
目的探讨TARDNA结合蛋白43(TDP-43)对氧糖剥夺(OGD)诱导小鼠HL-1心房肌细胞凋亡的影响及其机制。方法将体外培养的小鼠HL-1心房肌细胞分为:(1)对照组及不同OGD处理时间(2、4、8、16h)组,采用CCK-8法检测细胞活力,Westernblotting检测TDP-43蛋白表达水平,以此确定OGD诱导时间点用于后续研究;(2)对照组与OGD组,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,JC-1染色法检测线粒体膜电位,化学发光法检测三磷酸腺苷(ATP)相对含量,微板法检测丙二醛(MDA)含量,WST-1法检测超氧化物歧化酶(SOD)含量。将转染慢病毒的小鼠HL-1心房肌细胞分为:(1)阴性对照慢病毒干预组(NC-shRNA)、TDP-43敲低慢病毒干预组(TDP-43-shRNA1、TDP-43-shRNA2、TDP-43-shRNA3),Westernblotting检测TDP-43蛋白表达水平,选择慢病毒敲低效率最高的TDP-43-shRNA用于后续试验;(2)NC-shRNA组、TDP-43-shRNA组、OGD+NC-shRNA组、OGD+TDP-43-shRNA组,在常氧条件和OGD条件下,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,MitoTracker染色法检测线粒体形态,JC-1染色法检测线粒体膜电位,化学发光法检测ATP含量,流式细胞术检测活性氧(ROS)荧光强度,微板法检测MDA含量,WST-1法检测SOD含量。结果CCK-8法检测结果显示,随OGD时间的延长,小鼠HL-1心房肌细胞的活力逐渐下降;Westernblotting检测结果显示,TDP-43蛋白表达水平逐渐升高,两者均呈现较强的时间依赖性。与对照组比较,在OGD16h时小鼠HL-1心房肌细胞活力最低(P<0.05)、TDP-43蛋白表达量最高(P<0.05),据此后续实验选择OGD16h为诱导时间点。与对照组比较,OGD组细胞凋亡率、线粒体膜电位荧光强度比值、MDA含量升高,ATP相对含量、SOD含量降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。Westernblotting检测结果显示,与NC-shRNA组比较,TDP-43-shRNA2组TDP-43蛋白表达水平降低最为明显(P<0.05),敲低效率最高,因此选择TDP-43-shRNA2进行后续实验。流式细胞术检测结果显示,在常氧条件下,与NC-shRNA组比较,TDP-43-shRNA组细胞凋亡率无明显变化(P>0.05);在OGD条件下,与OGD+NC-shRNA组比较,OGD+TDP-43-shRNA组细胞凋亡率降低(P<0.05)。MitoTracker染色结果显示,与NC-shRNA组比较,TDP-43-shRNA组线粒体形态完整,无明显变化;OGD+NC-shRNA组线粒体数量增多,多数为碎片状,分布散乱;与OGD+NC-shRNA组比较,OGD+TDP-43-shRNA组线粒体形态有所恢复。在常氧条件下,与NC-shRNA组比较,TDP-43-shRNA组线粒体膜电位荧光强度比值、ATP相对含量、ROS荧光强度、MDA含量、SOD含量均无明显变化(P>0.05);但在OGD条件下,与OGD+NC-shRNA组比较,OGD+TDP-43-shRNA组细胞线粒体膜电位荧光强度比值、ROS荧光强度、MDA含量降低,ATP相对含量、SOD含量升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论TDP-43通过调控心肌细胞凋亡加重OGD诱导的线粒体功能障碍,因此,敲低TDP-43的表达有望成为缺血性心肌病的潜在治疗策略。
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关键词
TARDNA结合蛋白43
氧糖剥夺
细胞凋亡
氧化应激
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职称材料
题名
沉默CIT基因可抑制前列腺癌细胞的增殖和转移（英文）
被引量：
2
1
作者
陈海平
向玘
刘大伟
魏强
机构
南方医科大学
南方
医院
泌
尿
外科
南方医科大学第五附属医院泌尿外科
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期257-263,共7页
基金
Supported by Science and Technology Planning Project of Guangdong Province(2016A020215122)~~
文摘
目的探究Citron Rho-interacting serine/threonine kinase(CIT)基因在前列腺癌中的表达特点,并探讨CIT基因对PC-3细胞增殖、迁移和侵袭能力的调控作用及其可能的分子机制。方法利用TCGA和MSKCC数据库分析CIT在前列腺癌组织的表达水平和临床相关性。采用siRNA干扰CIT的表达,采用CCK-8、划痕实验和Transwell实验检测CIT对前列腺癌PC-3细胞系的增殖、迁移和侵袭特性的影响。采用Western blotting检测CIT对上皮-间质转化和Hippo-YAP通路的调控作用。结果 TCGA数据库分析表明,CIT在前列腺癌组织中表达显著上调(P<0.05);MSKCC数据库分析表明,CIT表达水平与N分期(P<0.05)、M分期(P<0.001)、Gleason评分(P=0.010)和PSA水平(P=0.004)成正相关关系。PC-3细胞中沉默CIT表达可显著抑制细胞的增殖、迁移和侵袭,逆转上皮-间质转化进程,并抑制Hippo-YAP通路的激活。结论 CIT基因可能是前列腺癌的致病基因,其分子机制可能与Hippo-YAP通路的激活有关。
关键词
丝/苏氨酸激酶
前列腺癌
转移
上皮-间质转化
Hippo-YAP通路
Keywords
Citron Rho-interacting serine/threonine kinase
prostate cancer
invasion
migration
Hippo-YAP pathway
分类号
R737.25 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
TDP-43对氧糖剥夺诱导的小鼠HL-1心房肌细胞凋亡的影响及其机制
2
作者
岳娇
龚美婷
徐伍
王鹏
袁木
谭言飞
裴海峰
机构
西南交通
大学
医学院
解放军西部战区总
医院
心内科
南方医科大学第五附属医院泌尿外科
解放军西部战区总
医院
卫勤训练中心
四川
大学
国家生物医学工程研究中心
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期1305-1313,共9页
基金
国家自然科学基金(81970241)
西部战区总医院院管重点项目(2021-XZYG-A03)。
文摘
目的探讨TARDNA结合蛋白43(TDP-43)对氧糖剥夺(OGD)诱导小鼠HL-1心房肌细胞凋亡的影响及其机制。方法将体外培养的小鼠HL-1心房肌细胞分为:(1)对照组及不同OGD处理时间(2、4、8、16h)组,采用CCK-8法检测细胞活力,Westernblotting检测TDP-43蛋白表达水平,以此确定OGD诱导时间点用于后续研究;(2)对照组与OGD组,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,JC-1染色法检测线粒体膜电位,化学发光法检测三磷酸腺苷(ATP)相对含量,微板法检测丙二醛(MDA)含量,WST-1法检测超氧化物歧化酶(SOD)含量。将转染慢病毒的小鼠HL-1心房肌细胞分为:(1)阴性对照慢病毒干预组(NC-shRNA)、TDP-43敲低慢病毒干预组(TDP-43-shRNA1、TDP-43-shRNA2、TDP-43-shRNA3),Westernblotting检测TDP-43蛋白表达水平,选择慢病毒敲低效率最高的TDP-43-shRNA用于后续试验;(2)NC-shRNA组、TDP-43-shRNA组、OGD+NC-shRNA组、OGD+TDP-43-shRNA组,在常氧条件和OGD条件下,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,MitoTracker染色法检测线粒体形态,JC-1染色法检测线粒体膜电位,化学发光法检测ATP含量,流式细胞术检测活性氧(ROS)荧光强度,微板法检测MDA含量,WST-1法检测SOD含量。结果CCK-8法检测结果显示,随OGD时间的延长,小鼠HL-1心房肌细胞的活力逐渐下降;Westernblotting检测结果显示,TDP-43蛋白表达水平逐渐升高,两者均呈现较强的时间依赖性。与对照组比较,在OGD16h时小鼠HL-1心房肌细胞活力最低(P<0.05)、TDP-43蛋白表达量最高(P<0.05),据此后续实验选择OGD16h为诱导时间点。与对照组比较,OGD组细胞凋亡率、线粒体膜电位荧光强度比值、MDA含量升高,ATP相对含量、SOD含量降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。Westernblotting检测结果显示,与NC-shRNA组比较,TDP-43-shRNA2组TDP-43蛋白表达水平降低最为明显(P<0.05),敲低效率最高,因此选择TDP-43-shRNA2进行后续实验。流式细胞术检测结果显示,在常氧条件下,与NC-shRNA组比较,TDP-43-shRNA组细胞凋亡率无明显变化(P>0.05);在OGD条件下,与OGD+NC-shRNA组比较,OGD+TDP-43-shRNA组细胞凋亡率降低(P<0.05)。MitoTracker染色结果显示,与NC-shRNA组比较,TDP-43-shRNA组线粒体形态完整,无明显变化;OGD+NC-shRNA组线粒体数量增多,多数为碎片状,分布散乱;与OGD+NC-shRNA组比较,OGD+TDP-43-shRNA组线粒体形态有所恢复。在常氧条件下,与NC-shRNA组比较,TDP-43-shRNA组线粒体膜电位荧光强度比值、ATP相对含量、ROS荧光强度、MDA含量、SOD含量均无明显变化(P>0.05);但在OGD条件下,与OGD+NC-shRNA组比较,OGD+TDP-43-shRNA组细胞线粒体膜电位荧光强度比值、ROS荧光强度、MDA含量降低,ATP相对含量、SOD含量升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论TDP-43通过调控心肌细胞凋亡加重OGD诱导的线粒体功能障碍,因此,敲低TDP-43的表达有望成为缺血性心肌病的潜在治疗策略。
关键词
TARDNA结合蛋白43
氧糖剥夺
细胞凋亡
氧化应激
Keywords
TAR DNA-binding protein 43
oxygen-glucose deprivation
apoptosis
oxidative stress
分类号
R542.2 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
作者
出处
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被引量
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沉默CIT基因可抑制前列腺癌细胞的增殖和转移（英文）
陈海平
向玘
刘大伟
魏强
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
2
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职称材料
2
TDP-43对氧糖剥夺诱导的小鼠HL-1心房肌细胞凋亡的影响及其机制
岳娇
龚美婷
徐伍
王鹏
袁木
谭言飞
裴海峰
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
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