目的观察槲皮素对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞成骨样分化和钙化的作用,并阐明其分子机制。方法采用Ox-LDL处理人血管平滑肌细胞,茜素红染色检测细胞钙化,测定碱性磷酸酶(ALP)活性和q PCR测骨相关蛋白Msx2、BMP2、Os...目的观察槲皮素对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞成骨样分化和钙化的作用,并阐明其分子机制。方法采用Ox-LDL处理人血管平滑肌细胞,茜素红染色检测细胞钙化,测定碱性磷酸酶(ALP)活性和q PCR测骨相关蛋白Msx2、BMP2、Osterix以及收缩蛋白SMA和SM22αm RNA表达水平。观察槲皮素对Ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞钙化,ALP活性,TLR4、Msx2、BMP2、Osterix、SMA和SM22α的m RNA表达水平,ROS含量及SOD活性的影响。采用TLR4 si RNA转染血管平滑肌细胞,观察敲低TLR4对细胞钙化,ALP活性及Msx2、BMP2、Osterix、SMA和SM22αm RNA表达水平的影响。结果 Ox-LDL可促进血管平滑肌细胞钙化和上调TLR4表达水平(P<0.05);槲皮素能明显减轻Ox-LDL诱导的细胞钙化和降低ALP的活性,下调Msx2、BMP2、Osterix m RNA的表达水平,上调血管平滑肌收缩蛋白SMA和SM22αm RNA的表达水平(P<0.05)。此外,槲皮素可明显提高SOD的活性,降低活性氧物质(ROS)的含量,下调TLR4的表达水平(P<0.05);TLR4 si RNA也能减轻Ox-LDL诱导的细胞钙化(P<0.05)。结论槲皮素可明显抑制Ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞钙化,其机制可能与ROS激活的TLR4信号通路有关。展开更多
文摘目的观察槲皮素对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞成骨样分化和钙化的作用,并阐明其分子机制。方法采用Ox-LDL处理人血管平滑肌细胞,茜素红染色检测细胞钙化,测定碱性磷酸酶(ALP)活性和q PCR测骨相关蛋白Msx2、BMP2、Osterix以及收缩蛋白SMA和SM22αm RNA表达水平。观察槲皮素对Ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞钙化,ALP活性,TLR4、Msx2、BMP2、Osterix、SMA和SM22α的m RNA表达水平,ROS含量及SOD活性的影响。采用TLR4 si RNA转染血管平滑肌细胞,观察敲低TLR4对细胞钙化,ALP活性及Msx2、BMP2、Osterix、SMA和SM22αm RNA表达水平的影响。结果 Ox-LDL可促进血管平滑肌细胞钙化和上调TLR4表达水平(P<0.05);槲皮素能明显减轻Ox-LDL诱导的细胞钙化和降低ALP的活性,下调Msx2、BMP2、Osterix m RNA的表达水平,上调血管平滑肌收缩蛋白SMA和SM22αm RNA的表达水平(P<0.05)。此外,槲皮素可明显提高SOD的活性,降低活性氧物质(ROS)的含量,下调TLR4的表达水平(P<0.05);TLR4 si RNA也能减轻Ox-LDL诱导的细胞钙化(P<0.05)。结论槲皮素可明显抑制Ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞钙化,其机制可能与ROS激活的TLR4信号通路有关。
