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条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠构建及鉴定 被引量：3
1
作者 赖舒畅 邱鸿 +5 位作者 王肖 潘道延 王桢钰 李凯 白晓春 沈洁 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期552-555,共4页
目的构建并鉴定条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠,为研究DEPTOR基因在糖尿病发生机制的研究提供动物模型。方法将引进的条件性胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶小鼠与DEPTOR^(loxp/loxp)小鼠进行杂交繁殖,并对子代进行基因型鉴定,获得... 目的构建并鉴定条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠,为研究DEPTOR基因在糖尿病发生机制的研究提供动物模型。方法将引进的条件性胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶小鼠与DEPTOR^(loxp/loxp)小鼠进行杂交繁殖,并对子代进行基因型鉴定,获得基因型为DEPTOR^(loxp/-)Cre^(+/-)的小鼠;再让DEPTOR^(loxp/-)Cre^(+/-)的小鼠与DEPTOR^(loxp/loxp)小鼠杂交获得DEPTOR^(loxp/loxp)Cre^(+/-)小鼠;基因型为DEPTOR^(loxp/loxp)Cre^(+/-)的小鼠即为本实验所需要构建模型小鼠。3周龄时通过PCR法鉴定小鼠的基因型;8周龄时腹腔注射他莫昔芬诱导Cre重组酶表达后,免疫荧光验证DEPTOR基因敲除效果。结果从引进这两种小鼠开始繁殖10个月,共获得基因型为DEPTOR^(loxp/loxp)Cre^(+/-)的小鼠10只,PCR结果证实小鼠的基因型符合DEPTOR^(loxp/loxp)Cre^(+/-)。免疫荧光结果提示敲除效果明显。结论利用Cre/loxp系统,本研究成功构建并鉴定了条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠,为在动物水平研究DEPTOR基因在糖尿病发病机制中的作用提供研究平台。 展开更多
关键词 DEPTOR CRE/LOXP系统 胰岛Β细胞
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