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副干酪乳酪杆菌E6通过其代谢物改善长春瑞滨诱导的斑马鱼免疫抑制
1
作者 许欣筑 郭丽娜 +6 位作者 郑康帝 马燕 林淑娴 何盈犀 盛雯 许素哗 邱峰 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第2期331-339,共9页
目的通过斑马鱼模式生物探究副干酪乳酪杆菌E6改善长春瑞滨诱导免疫抑制的作用机制。方法用异硫氰酸荧光素(FITC)标记副干酪乳酪杆菌E6,在荧光显微镜下观察副干酪乳酪杆菌斑马鱼肠道的定植情况。运用长春瑞滨构建斑马鱼免疫低下模型,分... 目的通过斑马鱼模式生物探究副干酪乳酪杆菌E6改善长春瑞滨诱导免疫抑制的作用机制。方法用异硫氰酸荧光素(FITC)标记副干酪乳酪杆菌E6,在荧光显微镜下观察副干酪乳酪杆菌斑马鱼肠道的定植情况。运用长春瑞滨构建斑马鱼免疫低下模型,分别通过斑马鱼尾部造血组织(CHT)处巨噬细胞、中性粒细胞的生成,胸腺T细胞的生成,以及斑马鱼体内免疫基因白介素-12(IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)的表达来研究副干酪乳酪杆菌E6的免疫调节活性。运用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)靶向代谢组学技术分别检测副干酪乳酪杆菌E6发酵上清液和副干酪乳酪杆菌E6在斑马鱼体内代谢物短链脂肪酸(SCFAs)的含量。通过斑马鱼免疫低下模型评价SCFAs乙酸钠、丙酸钠、丁酸钠的免疫调节作用。结果与正常组相比,斑马鱼肠球、中肠和后肠部位均清晰可见FITC标记副干酪乳酪杆菌E6的绿色荧光。与模型组相比,副干酪乳酪杆菌E6缓解长春瑞滨诱导斑马鱼CHT巨噬细胞和中性粒细胞的数量减少(P<0.05),增加斑马鱼体内胸腺T细胞的荧光强度(P<0.05)。同时副干酪乳酪杆菌E6可促进斑马鱼免疫低下模型免疫因子IL-12和IFN-γ基因的表达(P<0.01)。与MRS培养基相比,副干酪乳酪杆菌E6发酵上清液中代谢物SCFAs乙酸、丙酸、丁酸的含量增加(P<0.001)。副干酪乳酪杆菌E6在斑马鱼体内的代谢物SCFAs乙酸、丙酸、丁酸的含量也增加(P<0.05)。SCFAs乙酸钠、丙酸钠均能够增加斑马鱼免疫低下模型CHT处巨噬细胞和中性粒细胞的数量(P<0.001),抑制长春瑞滨诱导斑马鱼胸腺T细胞荧光强度的降低(P<0.01)。结论副干酪乳酪杆菌E6通过其代谢物SCFAs乙酸、丙酸改善长春瑞滨诱导斑马鱼免疫抑制。 展开更多
关键词 副干酪乳酪杆菌E6 代谢物 短链脂肪酸 长春瑞滨 免疫抑制
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植物乳植杆菌ZG03通过其代谢物短链脂肪酸缓解斑马鱼的氧化应激
2
作者 林淑娴 郭丽娜 +6 位作者 马燕 熊尧 何盈犀 许欣筑 盛雯 许素哗 邱峰 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第10期2223-2230,共8页
目的分析植物乳植杆菌ZG03的菌株特性并通过代谢组学结合斑马鱼模式生物探究ZG03缓解氧化应激作用机制。方法测定并绘制ZG03生长曲线,通过场发射扫描电镜观察菌体形态,进一步通过全基因组学测序技术从基因层面评估其安全性和潜在功效。... 目的分析植物乳植杆菌ZG03的菌株特性并通过代谢组学结合斑马鱼模式生物探究ZG03缓解氧化应激作用机制。方法测定并绘制ZG03生长曲线,通过场发射扫描电镜观察菌体形态,进一步通过全基因组学测序技术从基因层面评估其安全性和潜在功效。通过异硫氰酸荧光素(FITC)标记植物乳植杆菌ZG03,在荧光显微镜下观察其在斑马鱼肠道中的定植情况。运用2%葡萄糖溶液诱导斑马鱼建立氧化应激模型,通过荧光显微镜观察斑马鱼尾部造血组织(CHT)处中性粒细胞的生成情况,和检测斑马鱼体内SOD活力、ROS水平以及MDA含量,评估ZG03缓解氧化应激作用。运用液相色谱-质谱技术进行靶向代谢组学检测ZG03作用斑马鱼后体内的代谢产物短链脂肪酸(SCFAs)含量,明确抗氧化应激关键代谢物。运用氧化应激模型评价关键代谢物乙酸、丙酸和己酸的缓解氧化应激作用。结果植物乳植杆菌ZG03在MRS固体培养基上呈圆形、表面光滑、湿润、乳白色单菌落,菌体呈杆状,ZG03具有丰富的糖代谢通路基因簇。与空白组相比,斑马鱼肠球、中肠和后肠部位均清晰可见FITC标记植物乳植杆菌ZG03的绿色荧光。与模型组相比,ZG03显著降低葡萄糖诱导氧化应激模型斑马鱼体内的ROS水平(P<0.05)、斑马鱼CHT处中性粒细胞的数量(P<0.001)、升高斑马鱼体内SOD活性(P<0.05),同时植物乳植杆菌ZG03在斑马鱼体内的代谢物SCFAs乙酸、丙酸、己酸含量增加(P<0.05)。SCFAs乙酸钠、丙酸钠、己酸钠能够提升氧化应激模型斑马鱼体内的SOD活性(P<0.001)。结论植物乳植杆菌ZG03通过其代谢物SCFAs乙酸、丙酸、己酸改善葡萄糖诱导模型斑马鱼的氧化应激。 展开更多
关键词 植物乳植杆菌ZG03 短链脂肪酸 葡萄糖 氧化应激
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健康妇女生殖道内格氏乳杆菌的分离鉴定与安全性评价 被引量：1
3
作者 苏炳森 操龙斌 +3 位作者 郑介婷 张琳 张子康 邱峰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1809-1815,共7页
目的对健康妇女生殖道内分离得到的菌株LGV03进行鉴定及安全性评价。方法通过稀释平板涂布法和划线分离法在MRS固体培养基上对女性生殖道分泌物中的菌株进行分离纯化和菌落形态观察;采用革兰氏染色鉴别分离菌株的形态与革兰氏阴阳性;采... 目的对健康妇女生殖道内分离得到的菌株LGV03进行鉴定及安全性评价。方法通过稀释平板涂布法和划线分离法在MRS固体培养基上对女性生殖道分泌物中的菌株进行分离纯化和菌落形态观察;采用革兰氏染色鉴别分离菌株的形态与革兰氏阴阳性;采用VITEK ANC鉴定卡对菌株LGV03进行生理生化性质的鉴定;采用DNA提取、PCR扩增、16S rDNA和pheS产物测序和数据分析对菌株LGV03进行分子生物学鉴定和系统发育分析鉴定;采用血琼脂平板检测菌株LGV03的溶血性;采用E-test法检测菌株LGV03对青霉素、氨苄西林、美罗培南、万古霉素、红霉素、利奈唑胺、克林霉素的敏感性;菌株LGV03以体积分数5%接种于MRS培养基中,于37℃发酵后,运用生化分析仪检测其发酵液中的乳酸浓度;最后,通过小鼠急性毒性试评价菌株LGV03的安全性。结果菌株LGV03经鉴定,其培养特性为:在MRS固体培养基上,37℃厌氧生长良好,菌落呈圆形、白色、表面湿润、不透明、边缘整齐。菌株LGV03革兰氏染色呈阳性,细胞呈杆状,菌体大小为0.4~0.5μm×0.9~6.3μm。结合生理生化试验结果可初步鉴定分离菌株LGV03为乳杆菌属。同时,经分子生物学鉴定和系统发育树显示,菌株LGV03被鉴定为格氏乳杆菌。溶血性试验结果显示格氏乳杆菌LGV03在血平板上未产生溶血环。药敏试验结果显示,格氏乳杆菌LGV03对青霉素、氨苄西林、美罗培南、万古霉素、红霉素、利奈唑胺敏感,最小抑菌浓度分别为0.048、0.19、0.38、0.75、0.064、0.75μg/mL,而对克林霉素耐药最小抑菌浓度为6μg/mL。菌株LGV03在MRS培养基中可产生乳酸,约18 h后达到饱和浓度,最终乳酸浓度达到1.72 mg/mL。小鼠毒性实验结果显示,与生理盐水组相比,格氏乳杆菌LGV03组小鼠的体质量变化无统计学意义(P>0.05)。格氏乳杆菌LGV03组小鼠的器官质量和脏器指数与生理盐水组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论从女性生殖道中分离的菌株LGV03被鉴定为格氏乳杆菌,其具有潜在的益生效应和安全性。 展开更多
关键词 格氏乳杆菌 分离鉴定 安全性评价
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