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原子力显微镜磁驱动轻敲模式在活细胞成像中的应用研究
被引量：
3
1
作者
孙全梅
陈龙
+3 位作者
陈佩佩
韩东
冯喜增
赵克森
《电子显微学报》
CAS
CSCD
2008年第4期311-315,共5页
应用MI公司最新发展的磁驱动轻敲模式(MAC mode)对体外培养成纤维细胞系3T3细胞进行在位成像研究。分别用力常数为0.95 N/m及0.03 N/m的微悬臂进行磁驱动轻敲模式成像,并与接触模式进行比较。同时研究了固定细胞与活体细胞之间的形貌差...
应用MI公司最新发展的磁驱动轻敲模式(MAC mode)对体外培养成纤维细胞系3T3细胞进行在位成像研究。分别用力常数为0.95 N/m及0.03 N/m的微悬臂进行磁驱动轻敲模式成像,并与接触模式进行比较。同时研究了固定细胞与活体细胞之间的形貌差异。结果显示,利用上述两种微悬臂探针,磁驱动轻敲模式均可获得高分辨像。与接触模式相比,磁驱动轻敲模式对活细胞的影响较小,在细胞膜表面微结构及细胞内亚结构成像方面,有明显优势。而接触模式由于其施力方式,使活细胞应力纤维应激性绷紧,更适合于对活体细胞应力纤维的成像研究。固定细胞与活细胞表面形貌存在较大差异,在生理环境下,进行活细胞检测更能了解细胞的真实状况。
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关键词
原子力显微镜
磁驱动轻敲模式
接触模式
细胞
成像
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职称材料
NKAIN2真核表达载体的构建与表达鉴定
2
作者
罗飞
周柏伟
+2 位作者
黄梦怡
吕永杰
赵善超
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2016年第11期1163-1166,共4页
目的 NKAIN2基因位于6号染色体长臂,6号染色体长臂的缺失现象经常发生于各种肿瘤。现构建候选抑癌基因NKAIN2真核表达载体,使其在前列腺癌细胞22RV1中过表达并观察其细胞定位,为进一步功能研究奠定实验基础。方法采用PCR方法扩增NKAIN2...
目的 NKAIN2基因位于6号染色体长臂,6号染色体长臂的缺失现象经常发生于各种肿瘤。现构建候选抑癌基因NKAIN2真核表达载体,使其在前列腺癌细胞22RV1中过表达并观察其细胞定位,为进一步功能研究奠定实验基础。方法采用PCR方法扩增NKAIN2基因序列,将其重组于pc DNA4载体中,利用PCR和DNA测序鉴定克隆正确性;并转染到22RV1细胞,Western blot检测其蛋白表达,免疫荧光检测其在细胞中的定位。结果重组质粒中插入正确目的片段,片段大小为627 bp,与预计位置相符。Western blot检测表明,在25 000处检测到目的蛋白条带,与预计大小相符,而阴性对照未检测到相应条带,说明真核表达载体成功转染细胞,并且能够瞬时表达。转染了pc DNA4-FLAG-NKAIN2质粒的22RV1细胞在Petri皿培养24 h后可测到转染的带FLAG-NKAIN2片段的蛋白表达,且过表达的蛋白主要定位于细胞膜和细胞质中。转染未带FLAG标签的pc DNA4质粒未检测到蛋白荧光信号。结论成功构建了pc DNA4-FLAG-NKAIN2真核表达载体,转染22RV1细胞后高表达,为进一步研究NKAIN2在前列腺癌中的生物行为和其发生发展的相互作用机制提供基础。
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关键词
NKAIN2
抑癌基因
真核细胞
载体构建
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职称材料
题名
原子力显微镜磁驱动轻敲模式在活细胞成像中的应用研究
被引量：
3
1
作者
孙全梅
陈龙
陈佩佩
韩东
冯喜增
赵克森
机构
南方医科大学病理生理教研室
南开
大学
生命科学学院生物活性材料教育部重点实验室
国家纳米科学中心纳米生物医学成像与表征实验室
出处
《电子显微学报》
CAS
CSCD
2008年第4期311-315,共5页
基金
国家自然科学基金重大研究计划面上项目(No.90709054)
国家自然科学基金面上项目(No.30672179)~~
文摘
应用MI公司最新发展的磁驱动轻敲模式(MAC mode)对体外培养成纤维细胞系3T3细胞进行在位成像研究。分别用力常数为0.95 N/m及0.03 N/m的微悬臂进行磁驱动轻敲模式成像,并与接触模式进行比较。同时研究了固定细胞与活体细胞之间的形貌差异。结果显示,利用上述两种微悬臂探针,磁驱动轻敲模式均可获得高分辨像。与接触模式相比,磁驱动轻敲模式对活细胞的影响较小,在细胞膜表面微结构及细胞内亚结构成像方面,有明显优势。而接触模式由于其施力方式,使活细胞应力纤维应激性绷紧,更适合于对活体细胞应力纤维的成像研究。固定细胞与活细胞表面形貌存在较大差异,在生理环境下,进行活细胞检测更能了解细胞的真实状况。
关键词
原子力显微镜
磁驱动轻敲模式
接触模式
细胞
成像
Keywords
AFM
magnetic AC mode
contact mode
living cells
in situ imaging
分类号
TH742 [机械工程—光学工程]
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职称材料
题名
NKAIN2真核表达载体的构建与表达鉴定
2
作者
罗飞
周柏伟
黄梦怡
吕永杰
赵善超
机构
南方医科大学
南方
医院泌尿外科
南方医科大学病理生理教研室
伦敦
大学
玛丽皇后学院Barts肿瘤研究所分子肿瘤研究室
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2016年第11期1163-1166,共4页
基金
国家自然科学基金(81328017)
广东省科技计划项目(2013B051000050)
文摘
目的 NKAIN2基因位于6号染色体长臂,6号染色体长臂的缺失现象经常发生于各种肿瘤。现构建候选抑癌基因NKAIN2真核表达载体,使其在前列腺癌细胞22RV1中过表达并观察其细胞定位,为进一步功能研究奠定实验基础。方法采用PCR方法扩增NKAIN2基因序列,将其重组于pc DNA4载体中,利用PCR和DNA测序鉴定克隆正确性;并转染到22RV1细胞,Western blot检测其蛋白表达,免疫荧光检测其在细胞中的定位。结果重组质粒中插入正确目的片段,片段大小为627 bp,与预计位置相符。Western blot检测表明,在25 000处检测到目的蛋白条带,与预计大小相符,而阴性对照未检测到相应条带,说明真核表达载体成功转染细胞,并且能够瞬时表达。转染了pc DNA4-FLAG-NKAIN2质粒的22RV1细胞在Petri皿培养24 h后可测到转染的带FLAG-NKAIN2片段的蛋白表达,且过表达的蛋白主要定位于细胞膜和细胞质中。转染未带FLAG标签的pc DNA4质粒未检测到蛋白荧光信号。结论成功构建了pc DNA4-FLAG-NKAIN2真核表达载体,转染22RV1细胞后高表达,为进一步研究NKAIN2在前列腺癌中的生物行为和其发生发展的相互作用机制提供基础。
关键词
NKAIN2
抑癌基因
真核细胞
载体构建
Keywords
NKAIN2
Tumor suppressor gene
Eukaryotic cell
Vector construction
分类号
R737.25 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
原子力显微镜磁驱动轻敲模式在活细胞成像中的应用研究
孙全梅
陈龙
陈佩佩
韩东
冯喜增
赵克森
《电子显微学报》
CAS
CSCD
2008
3
在线阅读
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职称材料
2
NKAIN2真核表达载体的构建与表达鉴定
罗飞
周柏伟
黄梦怡
吕永杰
赵善超
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2016
0
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