汉坦病毒基因分型及其分子流行病学研究进展 被引量：10

1

作者 杨占清 俞守义 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第3期252-255,共4页

关键词 分子流行病学研究 病毒基因分型 汉坦病毒肺综合征 负链RNA病毒 肾综合征出血热 汉坦病毒属 RNA多聚酶 布尼亚病毒 病毒基因组 RNA依赖 G1和G2 病毒糖蛋白 衣壳蛋白 人类感染

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高校大学生亚健康状况的横断面调查研究 被引量：54

2

作者 王英 陈清 《中国全科医学》 CAS CSCD 2005年第9期738-740,共3页

目的了解高校大学生亚健康状态的分布情况及其影响因素.方法采用自行设计的亚健康调查表,对广州市某医科大学1～4年级医学生进行亚健康横断面流行病学调查,并用等级相关、χ2检验以及Logistic 回归方法分析与亚健康相关的影响因素.结果 ... 目的了解高校大学生亚健康状态的分布情况及其影响因素.方法采用自行设计的亚健康调查表,对广州市某医科大学1～4年级医学生进行亚健康横断面流行病学调查,并用等级相关、χ2检验以及Logistic 回归方法分析与亚健康相关的影响因素.结果 665名大学生中,亚健康发生率为62.3%,亚健康状态发生频率随着年级升高而增加;亚健康状态在精神感受方面较集中;亚健康主要危险因素包括年级增加、学习压力加大、缺乏身体锻炼、学习兴趣不高、就业态度不乐观、在校表现不满意、父母亲身体欠佳等.亚健康状态的保护因素为学习压力减小.学习环境变差成为亚健康状态的保护因素.结论大学生的健康状况不容乐观,学校、教师、家庭以及全社会应针对学生亚健康状况,采取积极的预防干预措施. 展开更多

关键词 亚健康状况 高校大学生 横断面调查 Logistic回归方法 亚健康状态 流行病学调查 学习压力 保护因素 健康调查表 X^2检验 分布情况 自行设计 医科大学 等级相关 健康相关 发生频率 精神感受 危险因素 身体锻炼 学习兴趣

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南方战区783名空军官兵生存质量的调查与分析 被引量：2

3

作者 王斌会 俞守义 《第一军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期554-555,共2页

目的调查、分析和评价南方战区部分空军官兵的生存质量。方法采用自行设计的部队官兵生存质量量表———自测健康评定量表,在南方战区调查了783名空军官兵,从生理、心理、社会3方面考察了其生存质量状况。结果空军官兵的生存质量情况为... 目的调查、分析和评价南方战区部分空军官兵的生存质量。方法采用自行设计的部队官兵生存质量量表———自测健康评定量表,在南方战区调查了783名空军官兵,从生理、心理、社会3方面考察了其生存质量状况。结果空军官兵的生存质量情况为中等水平。生理得分为66.33±9.38,心理得分为58.99±10.09,社会得分为53.69±12.40,总得分为:178.44±22.60。不同文化程度(P<0.01)、不同入伍地(P<0.01)、不同兵种(P<0.05)、不同身份(P<0.01)、入伍前不同职业(P<0.01)的空军官兵的生存质量有显著差别。结论不同文化程度、不同入伍地、不同兵种、不同身份、入伍前不同职业对军人的生存质量有一定影响,但不同民族、是否为独生子女对军人的生存质量影响并不大。 展开更多

关键词 军人生存质量 生存质量量表 调查分析

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词语联想软件对大学生情结心理的研究 被引量：1

4

作者 宋旻烨 俞守义 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期738-740,共3页

目的研制词语联想软件,在大学生被试群体中加以运用,作为潜意识的实验性主体的定量测量工具。方法词语联想软件有四部分,包括荣格经典一百词、附加一百词施测,计录两个时间段,通过荣格词语联想测验指标证实情结的激活存在。结果反应时... 目的研制词语联想软件,在大学生被试群体中加以运用,作为潜意识的实验性主体的定量测量工具。方法词语联想软件有四部分,包括荣格经典一百词、附加一百词施测,计录两个时间段,通过荣格词语联想测验指标证实情结的激活存在。结果反应时间是词语联想软件测试结果评估的重要标准。对照组反应时间均显著低于实验组,情结能够引起反应时延长的现象。结论词语联想软件简便易行,是心理咨询的一种有效诊断工具。使用计算机记录时间和内容的研究手段比人工记录方法得到潜意识信息更精确,易准确地发现被试的心理症结,反映被试心理情结存在。 展开更多

关键词 词语联想软件 潜意识的定量测量工具 情结

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珠海地区猪乙脑病毒血清抗体调查和传播媒介监测 被引量：10

5

作者 孙虹 俞守义 +6 位作者 马洪波 柯明剑 姚若东 谭华 王遇春 曾新宇 陈琨 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期94-95,98,共3页

关键词 乙脑病毒 血清抗体调查 媒介监测 珠海地区 流行性乙型脑炎 自然疫源性疾病 传播 日本脑炎

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复发性口腔溃疡患者口腔菌群的变化 被引量：19

6

作者 王见璋 陈清 申洪 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期986-989,共4页

目的通过检测复发性口腔溃疡患者(ROU)常见口腔菌群的变化,探讨口腔菌群改变与复发性口腔溃疡间的关系。方法分别收集处于溃疡期(溃疡组)与愈合期(愈合组)的复发性口腔溃疡患者及健康成人(对照组)的唾液,用细菌16SrRNA荧光定量PCR法对... 目的通过检测复发性口腔溃疡患者(ROU)常见口腔菌群的变化,探讨口腔菌群改变与复发性口腔溃疡间的关系。方法分别收集处于溃疡期(溃疡组)与愈合期(愈合组)的复发性口腔溃疡患者及健康成人(对照组)的唾液,用细菌16SrRNA荧光定量PCR法对唾液中常见的3种口腔菌群(链球菌、韦荣氏菌、奈瑟氏菌)进行定量检测及统计分析。结果溃疡组链球菌及韦荣氏菌含量的对数值分别为7.30±0.89copies/ml和8.29±0.77copies/ml,均显著低于对照组(8.15±0.55copies/ml和8.93±0.76copies/ml,P<0.01),溃疡组与愈合组间的差异无统计学意义;愈合组链球菌含量的对数值为7.51±0.81copies/ml,显著低于对照组(8.15±0.55copies/ml,P<0.01),而两组间韦荣氏菌含量的对数值差异无统计学意义;奈瑟氏菌含量的对数值在3组之间的差异均无统计学意义。结论复发性口腔溃疡患者唾液中链球菌及韦荣氏菌的含量较非口腔溃疡者降低,提示复发性口腔溃疡的发生与口腔中链球菌及韦荣氏菌的减少性菌群变化有关。 展开更多

关键词 复发性口腔溃疡 荧光定量PCR 链球菌 韦荣氏菌 奈瑟氏菌

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2004年SARS-CoV毒株S基因分子进化特征 被引量：10

7

作者 黄平 宋怀东 +2 位作者 邹丽容 李晖 俞守义 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期957-960,共4页

目的通过对2004年SARS-CoV毒株S基因序列的变异分析,揭示SARS-CoV毒株S基因进化与SARS流行的关系。方法对广东地区2004年2株SARS-CoV毒株S基因进行序列分析,其余15株毒株S基因序列从GenBank检索,采用DNAStar5.0软件,对检索的SARS-CoV的... 目的通过对2004年SARS-CoV毒株S基因序列的变异分析,揭示SARS-CoV毒株S基因进化与SARS流行的关系。方法对广东地区2004年2株SARS-CoV毒株S基因进行序列分析,其余15株毒株S基因序列从GenBank检索,采用DNAStar5.0软件,对检索的SARS-CoV的S基因核苷酸序列进行比对和分析;并结合临床资料对变异毒株进行进化速度分析。结果17株毒株中,S基因7个氨基酸位点全部置换,35个氨基酸位点在不同毒株中置换;所有SARS-CoV均通过氨基酸227位点的置换,增加一个糖基化位点。同义进化中,S基因置换速度为1.46×10-6个核苷酸,进化线性回归方程为Y=1.46×10-6X+0.000736,同时通过Ka计算显示S基因进化明显存在选择性压力。2004年17株SARS-CoV毒株可以分为两条进化途径,其中广东地区的人类的GZ0401毒株与果子狸的PC4-115毒株核苷酸同源性达到99.97%,氨基酸同源性为100%。结论冠状病毒S基因的1个糖蛋白位点增加,可能导致人类SARS-CoV毒株出现并SARS流行;2004年果子狸冠状病毒与人类SARS-CoV毒株分子结构类似,可能存在交叉宿主。S基因同义进化速度较流感HA1基因慢4.2倍,但基因进化明显存在选择性压力。 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征 SARS-冠状病毒 S基因 进化

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腺苷脱氨酶的测定及临床意义 被引量：9

8

作者 胡卫红 魏小文 +4 位作者 陈清 王超要 张薇 王华 李建业 《实用医学杂志》 CAS 2006年第10期1208-1209,共2页

目的:探讨腺苷脱氨酶(ADA)在全自动生化分析仪上的测定及临床意义。方法:在贝克曼库尔特SYNCHRONCX4PRO全自动生化分析仪上,用酶法测定132例健康人员及562例各种疾病患者血清、107例胸腹水及101例脑脊液(CSF)中ADA活性水平。结果:吸毒... 目的:探讨腺苷脱氨酶(ADA)在全自动生化分析仪上的测定及临床意义。方法:在贝克曼库尔特SYNCHRONCX4PRO全自动生化分析仪上,用酶法测定132例健康人员及562例各种疾病患者血清、107例胸腹水及101例脑脊液(CSF)中ADA活性水平。结果:吸毒组、伤寒组、副伤寒组、病毒性肝炎组、肝硬化组、肝癌组血清ADA活性明显高于健康对照组(均P<0.01)。结核性胸腹水ADA活性高于其它炎性和癌性胸腹水ADA活性(均P<0.01);其他炎性胸腹水ADA活性高于癌性胸腹水ADA活性(P<0.01);结核性脑膜炎CSF中ADA活性高于病毒性脑膜炎及脑肿瘤CSF中ADA活性(均P<0.01)。结论:ADA可作为吸毒、伤寒、副伤寒、病毒性肝炎、肝硬化、肝癌等疾病的辅助诊断指标,对结核性与癌性胸腹水和结核性脑膜炎与病毒性脑膜炎的鉴别诊断有重要意义。 展开更多

关键词 腺苷脱氨酶 临床实验技术 吸毒 副伤寒 胸腹水 脑脊液

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广州地区扎幌样病毒的检出及基因型分析 被引量：8

9

作者 刘翼 戴迎春 +4 位作者 李建栋 詹惠春 陈清 俞守义 聂军 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第10期1147-1149,1152,共4页

目的了解广州腹泻儿童是否存在扎幌样病毒(Sapporo-like virus,SLV)感染。方法在2003年秋冬季腹泻流行期间在南方医院儿科收集临床诊断为病毒性腹泻患儿的粪便标本,并采用半套式反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测。纯化阳性标本PCR产... 目的了解广州腹泻儿童是否存在扎幌样病毒(Sapporo-like virus,SLV)感染。方法在2003年秋冬季腹泻流行期间在南方医院儿科收集临床诊断为病毒性腹泻患儿的粪便标本,并采用半套式反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测。纯化阳性标本PCR产物并测序,然后将其同GenBank中的参比毒株序列比较。结果收集的169份标本中有1份SLV(CH03354)PCR扩增阳性,检出率为0.59%,同源性分析表明该毒株属于SLV GⅠ-1群。结论广州地区存在SLV所致感染,本次实验检出毒株基因型与安徽毒株不同,说明我国不同地区可能存在不同的SLV基因型。 展开更多

关键词 扎幌样病毒 人类杯状病毒 基因型 反转录聚合酶链反应

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蛋白质芯片制作条件的优化 被引量：6

10

作者 江凌晓 郭兆彪 +4 位作者 陈泽良 王津 王红霞 俞守义 杨瑞馥 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第11期1230-1232,共3页

目的探讨以醛基化玻片为固相载体制备蛋白质芯片的条件.方法蛋白质用含40%甘油的PBS稀释后点加在醛基化玻片上,室温干燥1h,4℃冰箱保存,经封闭剂封闭,PBS漂洗后,依次加入抗体,反应结果用扫描仪进行扫读.结果以醛基化玻片为固相载体时预... 目的探讨以醛基化玻片为固相载体制备蛋白质芯片的条件.方法蛋白质用含40%甘油的PBS稀释后点加在醛基化玻片上,室温干燥1h,4℃冰箱保存,经封闭剂封闭,PBS漂洗后,依次加入抗体,反应结果用扫描仪进行扫读.结果以醛基化玻片为固相载体时预点10～15个点后点样均一性较好;点样后4℃冰箱保存24～48h再进行漂洗和封闭处理,所得结果的荧光测量值较高;3%BSA为封闭剂时所得图像的荧光背景值最低;点样量影响荧光信号的强度.结论以醛基化玻片为固相载体制备蛋白质芯片时要预点15～20个点后再正式点样,点样后应4℃保存24～48h再进行漂洗和3%BSA封闭处理. 展开更多

关键词 蛋白质芯片 制作条件 醛基化玻片 固相载体

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不同定额结算模式下住院医疗费用的变化 被引量：11

11

作者 陈琳 刘玉秀 俞守义 《医学研究生学报》 CAS 2008年第5期519-522,共4页

住院费用是医疗保险基金的主要补偿内容。作者通过对不同定额结算模式下医保患者住院医疗费用的变化情况分析,探讨定额结算模式对住院费用的影响及其影响因素。为在充分考虑医疗资源需求强度的前提下,建立科学、合理的结算模式提供参考。

关键词 医疗保险 医疗费用 定额结算

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含hTERT片段的重组逆转录病毒感染对树突状细胞功能的影响 被引量：2

12

作者 胡贵方 孙莉莎 +3 位作者 金宏 欧程山 蒋毅萍 庞建新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期394-397,共4页

目的观察含人端粒酶逆转录酶(hTERT)片段的重组逆转录病毒感染对树突状细胞(DCs)功能的影响。方法 ELISA试剂盒检测DCs培养液中IL-12水平;混合白细胞(MLR)反应检测含hTERT片段的重组逆转录病毒感染的 DCs(hTERT-DCs)和未感染的DCs(N-DCs... 目的观察含人端粒酶逆转录酶(hTERT)片段的重组逆转录病毒感染对树突状细胞(DCs)功能的影响。方法 ELISA试剂盒检测DCs培养液中IL-12水平;混合白细胞(MLR)反应检测含hTERT片段的重组逆转录病毒感染的 DCs(hTERT-DCs)和未感染的DCs(N-DCs)刺激同种异体淋巴细胞增殖能力;流式细胞术检测DCs表面分子CD80、 CD83、CD86和HLA-DR的变化;CytoTox 96非放射性细胞毒性检测试剂盒检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应。结果 hTERT-DCs和N-DCs在分泌IL-12的水平、刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力方面无明显差异;hTERT-DCs的 CD83表达水平低于N-DCs,同时,hTERT-DCs激发的CTL对端粒酶阳性的靶细胞杀伤率明显高于端粒酶阴性的靶细胞(P<0．05)。结论 hTERT-DCs尽管有可能阻止DCs自身的成熟,但在活化淋巴细胞、刺激淋巴细胞分化增殖的能力方面并没发生明显改变,并且还能激发hTERT特异性CTL。 展开更多

关键词 HTERT 逆转录病毒 树突状细胞 免疫治疗

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副溶血弧菌不耐热溶血毒素tlh基因的序列分析 被引量：2

13

作者 李志峰 聂军 +3 位作者 戴迎春 李建栋 陈清 俞守义 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第10期1153-1155,共3页

目的利用PCR技术扩增副溶血弧菌不耐热溶血毒素tlh基因,对tlh基因进行生物信息学分析。方法利用PCR技术扩增tlh基因,克隆至载体pET32a+并测序。将测序结果提交国际互联网上有关生物信息网站进行生物信息学分析。结果和结论测序结果tlh14... 目的利用PCR技术扩增副溶血弧菌不耐热溶血毒素tlh基因,对tlh基因进行生物信息学分析。方法利用PCR技术扩增tlh基因,克隆至载体pET32a+并测序。将测序结果提交国际互联网上有关生物信息网站进行生物信息学分析。结果和结论测序结果tlh14-90被GenBank收录,登录号为AY289609。tlh14-90全长1 257 bp,与国际标准株WP1的同源性为99%,含有启动子和密码子,预测其编码一个含418个氨基酸的蛋白质(TLH14-90),分子式为C2131H3184N548O649S16, 相对分子质量47 392.9,理论等电点pI为4.92,丙氨酸、亮氨酸和天冬酰氨的含量分别为11.0%、7.4%和7.2%,含有4个半胱氨酸(Cys),κ-D法推算的疏水性参数为-34。预测其二级折叠结构为α/□蛋白,三级结构未给出。 展开更多

关键词 弧菌 副溶血性 碱基序列 聚合酶链反应 溶血素类

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肠聚集性大肠杆菌ybtE基因缺失突变株的构建 被引量：2

14

作者 张冬梅 胡静 俞守义 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期433-437,共5页

目的构建肠聚集性大肠杆菌ybtE缺失突变株,为下一步ybtE基因功能的研究奠定基础。方法应用PCR扩增肠聚集性大肠杆菌的ybtE基因,将其克隆至pUC18载体,酶切缺失988bp ybtE片段,并插入998bp的卡那霉素抗性基因,利用定向克隆技术将突变的ybt... 目的构建肠聚集性大肠杆菌ybtE缺失突变株,为下一步ybtE基因功能的研究奠定基础。方法应用PCR扩增肠聚集性大肠杆菌的ybtE基因,将其克隆至pUC18载体,酶切缺失988bp ybtE片段,并插入998bp的卡那霉素抗性基因,利用定向克隆技术将突变的ybtE片段克隆至自杀质粒pKTN701,形成重组自杀质粒。将携带重组自杀质粒的SM10λpir与EAEC17-2进行接合转移,利用同源重组,根据卡那霉素抗性筛选并鉴定接合子。结果经PCR、酶切和探针杂交鉴定,得到2株肠聚集性大肠杆菌ybtE缺失突变株。结论成功构建肠聚集性大肠杆菌ybtE基因缺失突变株。 展开更多

关键词 ybtE基因 毒力岛 肠聚集性大肠杆菌 基因突变

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携带外源基因的rAAV-2在人树突状细胞中的稳定表达 被引量：1

15

作者 胡贵方 康禹 +4 位作者 俞守义 彭建强 马鑫 吴小兵 侯云德 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期728-730,共3页

目的:观察2型重组腺相关病毒(rAAV-2)载体介导外源基因对人外周血单核细胞来源的树突状细胞(DC)的感染效能.方法:采用激光共聚焦显微镜观察FTTC标记的rAAV-2进入DC的过程;用不同的感染复数(MOI)的rAAV-2-Luc和rAAV-2-GFP感染新分离的DC... 目的:观察2型重组腺相关病毒(rAAV-2)载体介导外源基因对人外周血单核细胞来源的树突状细胞(DC)的感染效能.方法:采用激光共聚焦显微镜观察FTTC标记的rAAV-2进入DC的过程;用不同的感染复数(MOI)的rAAV-2-Luc和rAAV-2-GFP感染新分离的DC,荧光素酶(Luc)检测试剂盒检测Iuc的表达和流式细胞术(FACS)检测GFP表达细胞的百分率.结果:加入rAAV-2后80分钟就可见病毒吸附在DC膜上,至90分钟可完全进入细胞内;MOI为1×104vp/cell时就可检测到Luc的表达,并呈现出随着MOI的加大而提高的趋势,自MOI为5×105vp/cell起,再提高MOI值并不能明显增加luc的表达;rAAV-2介导外源基因感染DC48小时后就可检测到表达,从96～240小时表达水平无明显变化;GFP的表达率为5～18%.结论:rAAV-2介导外源基因能有效感染DC,感染的DC可稳定表达外源基因,rAAV-2载体体外遗传修饰的DC可以进一步用于ex vivo途径的免疫治疗研究. 展开更多

关键词 重组腺相关病毒2型 载体 树突状细胞 免疫治疗 人

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肠出血性大肠杆菌O157：H7志贺样毒素2B亚基的表达 被引量：1

16

作者 丁益强 王长军 俞守义 《医学研究生学报》 CAS 2008年第6期587-590,I0003,共5页

目的:克隆肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7 AH07株志贺样毒素2B(Stx2B)亚单位基因,应用原核表达系统制备重组蛋白质。方法:根据靶基因序列设计特异性寡核苷酸引物,采用PCR法克隆EHEC AH07株Stx2B的编码基因stx2b,靶基因经TA克隆后连接... 目的:克隆肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7 AH07株志贺样毒素2B(Stx2B)亚单位基因,应用原核表达系统制备重组蛋白质。方法:根据靶基因序列设计特异性寡核苷酸引物,采用PCR法克隆EHEC AH07株Stx2B的编码基因stx2b,靶基因经TA克隆后连接到表达载体pET-28a构建重组质粒,阳性重组子转化表达宿主菌E.coliBL-21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导目的蛋白表达,应用SDS-PAGE和Western-blot(WB)分析重组蛋白生物活性。结果:PCR扩增stx2b基因约220 bp,成功构建重组质粒pET28a-stx2b,并在原核细胞中得到高效表达,目的蛋白质的相对分子质量约为7500,约占蛋白质总量的40%;WB显示目的蛋白质可与特异性抗体发生特异性反应。结论:成功克隆EHEC O157∶H7stx2b基因,在原核系统获得目的蛋白质的高效表达,为O157∶H7感染机制及疾病诊断和疫苗研究奠定基础。 展开更多

关键词 肠出血性大肠杆菌0157:H7 志贺样毒素2B亚基 克隆表达

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缺失HPI毒力岛的EAggEC O42突变菌株的构建及鉴定 被引量：1

17

作者 胡静 俞守义 +1 位作者 阚飙 刘志华 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第11期1352-1356,共5页

目的构建并鉴定HPI毒力岛缺失的EAggEC突变株。方法运用基因重组方法,以irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有卡那霉素(Km)抗性基因(kan)标记。以pCVD442作为载体,构建含有irp8部... 目的构建并鉴定HPI毒力岛缺失的EAggEC突变株。方法运用基因重组方法,以irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有卡那霉素(Km)抗性基因(kan)标记。以pCVD442作为载体,构建含有irp8部分序列和irp5基因的重组自杀质粒pCO85。以EAggECO42为出发菌株,构建缺失irp8￣irp5约24kb的HPI毒力岛功能核心区区域的全岛缺失株EAG85。结果通过接合转移和同源重组,利用蔗糖抗性筛选,pCO85上的同源序列有效的置换了EAggECO42的irp8和irp5基因。PCR方法扩增irp3、ybtA、irp9等基因的结果显示,筛选出的EAG85确为缺失HPI毒力岛基因的EAggEC菌株。结论成功地构建了缺失HPI毒力岛的EAggECO42突变菌株,为进一步阐明HPI毒力岛在EAggEC菌株中的功能建立了重要的物质基础。 展开更多

关键词 肠集聚性粘附大肠杆菌 HPI毒力岛 耶尔森菌 缺失

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应用噬菌体肽文库筛选肾综合征出血热病毒优势B细胞结合表位肽

18

作者 王倩 俞守义 王长军 《医学研究生学报》 CAS 2008年第5期475-479,共5页

目的：应用噬菌体展示肽文库筛选鉴定肾综合征出血热病毒优势B细胞结合表位肽。方法：以Prote in-A纯化的肾综合征出血热患者恢复期血清为筛选配基,对经正常人血清预吸附的噬菌体展示随机12肽文库（或次级肽文库）进行生物亲和淘选;夹心... 目的：应用噬菌体展示肽文库筛选鉴定肾综合征出血热病毒优势B细胞结合表位肽。方法：以Prote in-A纯化的肾综合征出血热患者恢复期血清为筛选配基,对经正常人血清预吸附的噬菌体展示随机12肽文库（或次级肽文库）进行生物亲和淘选;夹心ELISA、竞争ELISA鉴定所获得克隆的结合特性,并进一步对阳性克隆进行序列测定和分析。结果：ELISA测定显示,通过5轮淘选得到的噬菌体克隆半数以上可与筛选血清发生特异性结合;对45个阳性克隆进行序列测定分析,根据其推导的氨基酸序列可大致分为8组,同源性分析显示,Ⅰ-Ⅶ组序列基序可能为LVXKR、LTXR、IXKP、LXPA、VGA、KX IR、EKXP,其中4组基序在病毒结构蛋白氨基酸序列中发现同源区。结论：获得了一组肾综合征出血热病毒（HFRSV）优势B细胞表位肽,HFRSV核蛋白可能是诱导高水平抗体的主要免疫原,研究结果为基于表位的基因工程诊断试剂的研制和多肽疫苗的设计提供依据。 展开更多

关键词 肾综合征出血热病毒 噬菌体展示肽文库 抗体 表位

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