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热休克蛋白70对中暑大鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究
被引量:
13
1
作者
耿焱
彭娜
+4 位作者
童华生
潘志国
刘云松
马强
苏磊
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第4期295-300,共6页
目的观察热休克蛋白70(HSP70)对急性肺损伤的保护作用。方法 64只SD大鼠按随机数字表法分为假加热正常对照组(Sham组)、中暑组(HS组)、中暑加谷氨酰胺处理组(HS+GLN组)和中暑加槲皮素处理组(HS+QU组),每组16只。Sham组大鼠置于温度23℃...
目的观察热休克蛋白70(HSP70)对急性肺损伤的保护作用。方法 64只SD大鼠按随机数字表法分为假加热正常对照组(Sham组)、中暑组(HS组)、中暑加谷氨酰胺处理组(HS+GLN组)和中暑加槲皮素处理组(HS+QU组),每组16只。Sham组大鼠置于温度23℃,湿度55%±5%环境中,其余3组大鼠置于模拟热气候动物舱(舱内温度39℃,相对湿度65%)内。监测大鼠直肠温度、收缩压和脉率,比较各组大鼠热应激反应的差异。以收缩压从峰值开始下降作为中暑的开始,之后将大鼠移至常温复温。分别在中暑恢复期0h和6h处死大鼠,每个时间点8只,留取支气管肺泡灌洗液(BALF)后分离肺脏组织行组织学观察。采用酶联免疫法检测BALF中的IL-1β、TNF-α和IL-6浓度,以及肺组织匀浆中的HSP70浓度。结果与HS组和HS+QU大鼠比较,HS+GLN组大鼠承受更多的热负荷后才发生HS(P<0.001),起病后的中位生存时间明显延长(P<0.001)。与Sham组比较,HS组大鼠肺组织匀浆HSP70浓度呈时间依赖性升高(P<0.001);HS+GLN组HSP70浓度在各个时点与HS组比较均明显升高(P<0.001),而HS+QU组的HSP70表达则受到明显抑制时点与Sham组比较差异无统计学意义(P>0.05),但明显低于HS组和HS+GLN组(P<0.001)。与HS组和HS+QU组比较,HS+GLN组大鼠BALF中的IL-1β、TNF-α和IL-6浓度明显降低(P<0.001),病理结果显示其肺损伤更轻(P<0.001),而HS+QU组则相反。结论 HSP70具有保护HS大鼠急性肺损伤的作用,其机制可能与增强大鼠热耐受能力和抑制HS大鼠肺部炎症相关。
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关键词
中暑
HSP70热休克蛋白质类
肺损伤
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职称材料
氧化应激在中暑大鼠急性肝损伤中的作用及机制研究
被引量:
7
2
作者
耿焱
彭娜
+4 位作者
童华生
潘志国
刘云松
马强
苏磊
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第4期285-289,共5页
目的探讨氧化应激在中暑急性肝损伤发生中的作用及其可能机制。方法 32只大鼠按随机数字表法分为4组:假加热正常对照组(Sham组)、中暑组(HS组)、假加热N-乙酰半胱氨酸治疗组(Sham-NAC组)以及中暑NAC治疗组(HS-NAC组),每组8只。通过人工...
目的探讨氧化应激在中暑急性肝损伤发生中的作用及其可能机制。方法 32只大鼠按随机数字表法分为4组:假加热正常对照组(Sham组)、中暑组(HS组)、假加热N-乙酰半胱氨酸治疗组(Sham-NAC组)以及中暑NAC治疗组(HS-NAC组),每组8只。通过人工气候舱制备中暑大鼠模型,监测大鼠直肠温度(Tr)、脉率(HR)、收缩压(SBP)。记录中暑发生的时间。于中暑开始后12h处死大鼠,测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和总胆红素(TBIL)水平,以及肝脏组织匀浆IL-6、IL-1β、TNF-α、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽(GSH)等指标的变化,组织学观察肝脏氧自由基(ROS)含量、中性粒细胞浸润以及病理损伤情况。结果中暑发生时HS-NAC组与HS组Tr、HR、SBP、中暑发生时间等比较差异无统计学意义(P>0.05),但HS-NAC组的生存时间与HS组相比明显延长,差异有统计学意义(P=0.039)。中暑发生后12h,HS组肝组织匀浆中ROS和MDA含量及血清ALT和TBIL水平较其他3组明显升高(P=0.000),肝组织匀浆中T-SOD和GSH含量较其他3组明显下降(P=0.000)。病理观察显示HS-NAC组肝损伤较HS组减轻(P=0.000)。HS组肝脏中性粒细胞浸润水平及IL-6、IL-1β、TNF-α浓度均明显高于HS-NAC组(P=0.000)。结论氧化应激在中暑肝损伤中起重要作用,其机制可能与直接细胞毒和介导炎症反应有关。
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关键词
中暑
氧化应激
肝损伤
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职称材料
人C-Src蛋白酪氨酸激酶真核表达、纯化及活性检测
被引量:
1
3
作者
徐岚
肖斌
+2 位作者
陈慧芹
李晓荣
郝文波
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期75-81,共7页
旨在构建人C-Src蛋白酪氨酸激酶(Csk)基因真核表达系统。从He La细胞中提取总的RNA,通过RT-PCR获得Csk基因全长c DNA序列,并将其克隆至真核表达载体p ENTER中,构建重组质粒p ENTER-Csk-his。重组质粒转染293T细胞48h后通过SDS-PAGE、Wes...
旨在构建人C-Src蛋白酪氨酸激酶(Csk)基因真核表达系统。从He La细胞中提取总的RNA,通过RT-PCR获得Csk基因全长c DNA序列,并将其克隆至真核表达载体p ENTER中,构建重组质粒p ENTER-Csk-his。重组质粒转染293T细胞48h后通过SDS-PAGE、Western blot检测Csk蛋白表达情况,间接免疫荧光进行蛋白定位,通过镍螯合的磁珠法纯化Csk蛋白,hispulldown及CO-IP检测表达蛋白的活性。结果显示,经双酶切及测序鉴定,真核表达载体p ENTER-Csk-his正确没有突变,SDSPAGE及Western blot均可检测到大小约为51 k D的目的蛋白,说明Csk蛋白在293T细胞中表达成功,间接免疫荧光定位重组Csk蛋白在细胞质中表达,通过磁珠纯化得到Csk蛋白,最后通过his-pulldown及CO-IP发现Csk能够与IGF1R、SHC1相互作用,说明表达的Csk蛋白具有生物学活性。成功获得Csk基因全长序列,并构建重组p ENTER-Csk-his真核表达质粒,在真核细胞293T的细胞质中获得高效表达且表达的蛋白具有生物学活性。
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关键词
Csk基因
293T细胞
真核表达
纯化
活性鉴定
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职称材料
题名
热休克蛋白70对中暑大鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究
被引量:
13
1
作者
耿焱
彭娜
童华生
潘志国
刘云松
马强
苏磊
机构
解放军
广州军区广州总医院重症医学科
南方医科大学抗体工程研究所
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第4期295-300,共6页
基金
国家自然科学基金(81671896,81471839)
中国博士后科学基金(2012M512181)
+2 种基金
广西省自然科学基金(2016GXNSFAA380313)
广东省自然科学基金(2016A030310288,2014A030313601)
广东省科技计划项目(2013B031800010)~~
文摘
目的观察热休克蛋白70(HSP70)对急性肺损伤的保护作用。方法 64只SD大鼠按随机数字表法分为假加热正常对照组(Sham组)、中暑组(HS组)、中暑加谷氨酰胺处理组(HS+GLN组)和中暑加槲皮素处理组(HS+QU组),每组16只。Sham组大鼠置于温度23℃,湿度55%±5%环境中,其余3组大鼠置于模拟热气候动物舱(舱内温度39℃,相对湿度65%)内。监测大鼠直肠温度、收缩压和脉率,比较各组大鼠热应激反应的差异。以收缩压从峰值开始下降作为中暑的开始,之后将大鼠移至常温复温。分别在中暑恢复期0h和6h处死大鼠,每个时间点8只,留取支气管肺泡灌洗液(BALF)后分离肺脏组织行组织学观察。采用酶联免疫法检测BALF中的IL-1β、TNF-α和IL-6浓度,以及肺组织匀浆中的HSP70浓度。结果与HS组和HS+QU大鼠比较,HS+GLN组大鼠承受更多的热负荷后才发生HS(P<0.001),起病后的中位生存时间明显延长(P<0.001)。与Sham组比较,HS组大鼠肺组织匀浆HSP70浓度呈时间依赖性升高(P<0.001);HS+GLN组HSP70浓度在各个时点与HS组比较均明显升高(P<0.001),而HS+QU组的HSP70表达则受到明显抑制时点与Sham组比较差异无统计学意义(P>0.05),但明显低于HS组和HS+GLN组(P<0.001)。与HS组和HS+QU组比较,HS+GLN组大鼠BALF中的IL-1β、TNF-α和IL-6浓度明显降低(P<0.001),病理结果显示其肺损伤更轻(P<0.001),而HS+QU组则相反。结论 HSP70具有保护HS大鼠急性肺损伤的作用,其机制可能与增强大鼠热耐受能力和抑制HS大鼠肺部炎症相关。
关键词
中暑
HSP70热休克蛋白质类
肺损伤
Keywords
heat stroke
HSP70 heat shock proteins
lung injury
分类号
R594.12 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
氧化应激在中暑大鼠急性肝损伤中的作用及机制研究
被引量:
7
2
作者
耿焱
彭娜
童华生
潘志国
刘云松
马强
苏磊
机构
解放军
广州军区广州总医院重症医学科
南方医科大学抗体工程研究所
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第4期285-289,共5页
基金
国家自然科学基金(81671896
81471839)
+4 种基金
中国博士后科学基金(2012M512181)
广西省自然科学基金(2016GXNSFAA380313)
广东省自然科学基金(2016A030310288
2014A030313601)
广东省科技计划项目(2013B031800010)~~
文摘
目的探讨氧化应激在中暑急性肝损伤发生中的作用及其可能机制。方法 32只大鼠按随机数字表法分为4组:假加热正常对照组(Sham组)、中暑组(HS组)、假加热N-乙酰半胱氨酸治疗组(Sham-NAC组)以及中暑NAC治疗组(HS-NAC组),每组8只。通过人工气候舱制备中暑大鼠模型,监测大鼠直肠温度(Tr)、脉率(HR)、收缩压(SBP)。记录中暑发生的时间。于中暑开始后12h处死大鼠,测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和总胆红素(TBIL)水平,以及肝脏组织匀浆IL-6、IL-1β、TNF-α、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽(GSH)等指标的变化,组织学观察肝脏氧自由基(ROS)含量、中性粒细胞浸润以及病理损伤情况。结果中暑发生时HS-NAC组与HS组Tr、HR、SBP、中暑发生时间等比较差异无统计学意义(P>0.05),但HS-NAC组的生存时间与HS组相比明显延长,差异有统计学意义(P=0.039)。中暑发生后12h,HS组肝组织匀浆中ROS和MDA含量及血清ALT和TBIL水平较其他3组明显升高(P=0.000),肝组织匀浆中T-SOD和GSH含量较其他3组明显下降(P=0.000)。病理观察显示HS-NAC组肝损伤较HS组减轻(P=0.000)。HS组肝脏中性粒细胞浸润水平及IL-6、IL-1β、TNF-α浓度均明显高于HS-NAC组(P=0.000)。结论氧化应激在中暑肝损伤中起重要作用,其机制可能与直接细胞毒和介导炎症反应有关。
关键词
中暑
氧化应激
肝损伤
Keywords
heat stroke
oxidative stress
liver injury
分类号
R594.12 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
人C-Src蛋白酪氨酸激酶真核表达、纯化及活性检测
被引量:
1
3
作者
徐岚
肖斌
陈慧芹
李晓荣
郝文波
机构
南方医科大学抗体工程研究所
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期75-81,共7页
基金
国家高技术研究发展计划("863"计划)(2014AA020904)
文摘
旨在构建人C-Src蛋白酪氨酸激酶(Csk)基因真核表达系统。从He La细胞中提取总的RNA,通过RT-PCR获得Csk基因全长c DNA序列,并将其克隆至真核表达载体p ENTER中,构建重组质粒p ENTER-Csk-his。重组质粒转染293T细胞48h后通过SDS-PAGE、Western blot检测Csk蛋白表达情况,间接免疫荧光进行蛋白定位,通过镍螯合的磁珠法纯化Csk蛋白,hispulldown及CO-IP检测表达蛋白的活性。结果显示,经双酶切及测序鉴定,真核表达载体p ENTER-Csk-his正确没有突变,SDSPAGE及Western blot均可检测到大小约为51 k D的目的蛋白,说明Csk蛋白在293T细胞中表达成功,间接免疫荧光定位重组Csk蛋白在细胞质中表达,通过磁珠纯化得到Csk蛋白,最后通过his-pulldown及CO-IP发现Csk能够与IGF1R、SHC1相互作用,说明表达的Csk蛋白具有生物学活性。成功获得Csk基因全长序列,并构建重组p ENTER-Csk-his真核表达质粒,在真核细胞293T的细胞质中获得高效表达且表达的蛋白具有生物学活性。
关键词
Csk基因
293T细胞
真核表达
纯化
活性鉴定
Keywords
Csk gene
293T cells
eukaryotic expression
purification
activity testing
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
Q55 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
热休克蛋白70对中暑大鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究
耿焱
彭娜
童华生
潘志国
刘云松
马强
苏磊
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
13
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职称材料
2
氧化应激在中暑大鼠急性肝损伤中的作用及机制研究
耿焱
彭娜
童华生
潘志国
刘云松
马强
苏磊
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
7
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职称材料
3
人C-Src蛋白酪氨酸激酶真核表达、纯化及活性检测
徐岚
肖斌
陈慧芹
李晓荣
郝文波
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
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职称材料
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