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脑膜炎大肠杆菌新基因cglE的克隆、表达及功能分析
被引量：
5
1
作者
陈丽丹
曹虹
+3 位作者
黄胜和
杨军
周浩
贡树基
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期419-422,共4页
目的研究脑膜炎大肠杆菌新基因cglE在细菌穿透血脑屏障中的作用。方法1)PCR扩增cglE基因片段,克隆到原核表达载体pET22b,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达并对目的蛋白进行纯化及初步鉴定。2)应用生物信息学方法对cglE表达产物进...
目的研究脑膜炎大肠杆菌新基因cglE在细菌穿透血脑屏障中的作用。方法1)PCR扩增cglE基因片段,克隆到原核表达载体pET22b,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达并对目的蛋白进行纯化及初步鉴定。2)应用生物信息学方法对cglE表达产物进行一级和二级结构预测。结果经Western-blot验证原核表达的CglE蛋白,SDS-PAGE电泳显示其分子量大小约50 000 Da。生物信息学分析表明,该基因与编码二氢硫辛酰胺脱氢酶(Dihydrolipoamide Ddhydrogenase,DLDH)的基因有同源性,与脑膜炎大肠杆菌侵袭素IbeA在二级结构上有相似性。结论建立稳定的原核表达系统并成功表达cglE基因产物,cglE基因可能与能量代谢及细菌穿透血脑屏障有关。目的蛋白CglE的表达及初步鉴定可为研究其功能及脑膜炎大肠杆菌的感染组学奠定了良好的基础。
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关键词
脑膜炎
大肠杆菌
cglE
IbeA蛋白表达
生物信息学
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职称材料
SARS冠状病毒M基因在大肠杆菌中的表达及其免疫学特性初步研究
被引量：
1
2
作者
晏辉钧
赵卫
+5 位作者
方丹云
周经姣
龙北国
张文炳
郭辉玉
江丽芳
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第1期38-41,共4页
【目的】在大肠杆菌中表达SARS冠状病毒包膜(M)蛋白与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并对其进行血清学鉴定。【方法】克隆编码SARS冠状病毒M蛋白的基因,并在原核系统中表达GST-M融合蛋白,用Westernblot和酶联免疫吸附试验(ELISA)分析GS...
【目的】在大肠杆菌中表达SARS冠状病毒包膜(M)蛋白与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并对其进行血清学鉴定。【方法】克隆编码SARS冠状病毒M蛋白的基因,并在原核系统中表达GST-M融合蛋白,用Westernblot和酶联免疫吸附试验(ELISA)分析GST-M融合蛋白。【结果】10份SARS患者恢复期血清均能识别M-GST融合蛋白,并在Mr=52000附近出现特异性结合带;而10份正常人血清不与M-GST融合蛋白起反应。【结论】本研究获得了SARS冠状病毒GST-M融合蛋白,它可与SARS患者的恢复期血清产生特异性的结合反应,为研究SARS冠状病毒感染宿主细胞的过程和制备重组疫苗提供了条件。
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关键词
SARS冠状病毒
表达
GST融合蛋白
融合蛋白
恢复期
免疫学特性
血清
大肠杆菌
特异性结合
克隆
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职称材料
小干扰RNA分子对乙肝病毒复制的抑制作用研究
被引量：
2
3
作者
焦京
曹虹
+2 位作者
周美娟
刘志华
丁振华
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期465-467,共3页
目的筛选特异高效抗乙型肝炎病毒(HBV)的小干扰RNA分子(siRNA),评价其干扰效果。方法在HepG2.2.15细胞内导入筛选的3条特异抗HBV的siRNA分子,用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测干扰后HBV的mRNA表达水平;Westernblot检测细胞上清中乙肝表...
目的筛选特异高效抗乙型肝炎病毒(HBV)的小干扰RNA分子(siRNA),评价其干扰效果。方法在HepG2.2.15细胞内导入筛选的3条特异抗HBV的siRNA分子,用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测干扰后HBV的mRNA表达水平;Westernblot检测细胞上清中乙肝表面抗原(HBsAg),分析siRNA对HBV基因表达的抑制作用。结果导入特异siRNA分子细胞中HBV的mRNA表达量明显降低(P<0.05),上清中HBsAg含量显著减少。阴性对照细胞中HBV的mRNA含量和上清中HBsAg含量基本不变(P>0.05)。结论所筛选的siRNA分子能特异性抑制HBV的mRNA和蛋白的合成。
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关键词
SIRNA
RNA干扰
乙肝病毒表面抗原
MRNA
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职称材料
题名
脑膜炎大肠杆菌新基因cglE的克隆、表达及功能分析
被引量：
5
1
作者
陈丽丹
曹虹
黄胜和
杨军
周浩
贡树基
机构
南方医科大学微生物学教研室
Childrens Hospital Los Angele California CA
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期419-422,共4页
基金
广东省自然科学基金重点项目(C020094)
文摘
目的研究脑膜炎大肠杆菌新基因cglE在细菌穿透血脑屏障中的作用。方法1)PCR扩增cglE基因片段,克隆到原核表达载体pET22b,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达并对目的蛋白进行纯化及初步鉴定。2)应用生物信息学方法对cglE表达产物进行一级和二级结构预测。结果经Western-blot验证原核表达的CglE蛋白,SDS-PAGE电泳显示其分子量大小约50 000 Da。生物信息学分析表明,该基因与编码二氢硫辛酰胺脱氢酶(Dihydrolipoamide Ddhydrogenase,DLDH)的基因有同源性,与脑膜炎大肠杆菌侵袭素IbeA在二级结构上有相似性。结论建立稳定的原核表达系统并成功表达cglE基因产物,cglE基因可能与能量代谢及细菌穿透血脑屏障有关。目的蛋白CglE的表达及初步鉴定可为研究其功能及脑膜炎大肠杆菌的感染组学奠定了良好的基础。
关键词
脑膜炎
大肠杆菌
cglE
IbeA蛋白表达
生物信息学
Keywords
meningitis
E. coil
cglE
IbeA
protein expression
bioinformaties.
分类号
R378.2 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
SARS冠状病毒M基因在大肠杆菌中的表达及其免疫学特性初步研究
被引量：
1
2
作者
晏辉钧
赵卫
方丹云
周经姣
龙北国
张文炳
郭辉玉
江丽芳
机构
中山
大学
基础医学院
微生物学
教研室
南方医科大学微生物学教研室
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第1期38-41,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30340013)
广东省科技攻关基金资助项目(532014202028)
文摘
【目的】在大肠杆菌中表达SARS冠状病毒包膜(M)蛋白与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并对其进行血清学鉴定。【方法】克隆编码SARS冠状病毒M蛋白的基因,并在原核系统中表达GST-M融合蛋白,用Westernblot和酶联免疫吸附试验(ELISA)分析GST-M融合蛋白。【结果】10份SARS患者恢复期血清均能识别M-GST融合蛋白,并在Mr=52000附近出现特异性结合带;而10份正常人血清不与M-GST融合蛋白起反应。【结论】本研究获得了SARS冠状病毒GST-M融合蛋白,它可与SARS患者的恢复期血清产生特异性的结合反应,为研究SARS冠状病毒感染宿主细胞的过程和制备重组疫苗提供了条件。
关键词
SARS冠状病毒
表达
GST融合蛋白
融合蛋白
恢复期
免疫学特性
血清
大肠杆菌
特异性结合
克隆
Keywords
SARS-CoV
membrane (M) protein
gene expression
antibody
分类号
R563 [医药卫生—呼吸系统]
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
小干扰RNA分子对乙肝病毒复制的抑制作用研究
被引量：
2
3
作者
焦京
曹虹
周美娟
刘志华
丁振华
机构
南方医科大学
防原医学
教研室
南方医科大学微生物学教研室
南方医科大学
南方
医院感染内科
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期465-467,共3页
基金
广东省科技计划项目(2005B10401034)~~
文摘
目的筛选特异高效抗乙型肝炎病毒(HBV)的小干扰RNA分子(siRNA),评价其干扰效果。方法在HepG2.2.15细胞内导入筛选的3条特异抗HBV的siRNA分子,用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测干扰后HBV的mRNA表达水平;Westernblot检测细胞上清中乙肝表面抗原(HBsAg),分析siRNA对HBV基因表达的抑制作用。结果导入特异siRNA分子细胞中HBV的mRNA表达量明显降低(P<0.05),上清中HBsAg含量显著减少。阴性对照细胞中HBV的mRNA含量和上清中HBsAg含量基本不变(P>0.05)。结论所筛选的siRNA分子能特异性抑制HBV的mRNA和蛋白的合成。
关键词
SIRNA
RNA干扰
乙肝病毒表面抗原
MRNA
Keywords
small interfering RNA
RNA interfering
HBsAg
mRNA
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
脑膜炎大肠杆菌新基因cglE的克隆、表达及功能分析
陈丽丹
曹虹
黄胜和
杨军
周浩
贡树基
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
SARS冠状病毒M基因在大肠杆菌中的表达及其免疫学特性初步研究
晏辉钧
赵卫
方丹云
周经姣
龙北国
张文炳
郭辉玉
江丽芳
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2005
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
小干扰RNA分子对乙肝病毒复制的抑制作用研究
焦京
曹虹
周美娟
刘志华
丁振华
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
在线阅读
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职称材料
已选择
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